Este documento resume la historia, clasificación, características biológicas, estructura, mecanismo de infección, cuadros clínicos, diagnóstico y tratamiento del citomegalovirus. El CMV fue descrito inicialmente en 1900 y clasificado como virus en la familia Herpesviridae en 1956. Produce un efecto citomegálico en las células y puede causar infecciones asintomáticas o sintomáticas dependiendo del estado inmunológico del huésped. El diagnóstico incluye pruebas

1. CITOMEGALOVIRUS

2. HISTORIA Fue descrito inicialmente en 1900 por Ribbert catalog á ndolo como un protozoario ( Entamoeba mortinatalium). 1920 Goodpasture postulo la etiolog í a viral . Fue aislado en cultivos de tejido en 1956 . 1960 Weller : C itomegalovirus . 1970 y 1980 : se le dio el rol de pat ó geno importante.

3. CITOMEGALOVIRUS CLASIFICACIÓN . FAMILIA : Herpesviridae SUBFAMILIA : Betaherpesvirinae GÉNERO : Cytomegalovirus NOMBRE OFICIAL : Herpes virus humano 5 NOMBRE COMÚN : Citomegalovirus

5. Clasificación de Herpes

6. CITOMEGALOVIRUS CARACTERISTICAS BIOLOGICAS De lento crecimiento Produce en la célula efecto citomegálico Permanece latente en glándulas secretoras y riñón. Se replica in vitro solo en fibroblastos humanos. Virus tiene ciclo reproductivo largo ESTRUCTURA VIRAL: Semejante al resto de los herpes virus, siendo el de mayor tamaño.

7. PROTEINAS DEL CMV. Codifica unas 230 proteínas ,aunque solo unas pocas están identificadas. DNA polimerasa Fosfotransferasa( fosforila a Ganciclovir) Proteínas estructúrales Nucleoproteínas Proteínas que regulan e inhiben la respuesta inmune.

8. ESTRUCTURA Glicoproteina G-H

9. MECANISMO Ciclo biológico • Entrada por endocitosis dentro de la célula (se desconoce la proteína que interactúa, pero son receptores específicos). • Retirada de cubierta lipoproteica y cápside en el citoplasma, quedando el virión con su ADN dentro. • Transporte del DNA y nucleoproteínas al núcleo celular. • Producción de DNA polimerasa viral. • Replicación viral: se transcribe el ADNviral a ARN, y en el citoplasma se codifican las proteínas del virus, que ensamblan dando como resultado los nuevos CMV.

10. puede ser:

11. EPIDEMIOLOGIA Infección congénita - perinatal En niños Asintomática - Subclínica Adultos sanos: M.Inf. similar Trasplantados Inmunodeprimidos – SIDA

12. CUADRO CLINICO EN NIÑOS En los neonatos se manifiesta por inmadurez del sistema inmunológico, infecciones oportunistas por la prescripción de esteroides o trasmisión transversal después de la rotura prematura de membranas

13. La diseminación del citomegalovirus produce necrosis focal, con inflamación mínima de todos los órganos, los más afectados son: las glándulas salivales, el riñón, los pulmones, el hígado y el intestino. En los pulmones provoca neumonía intersticial, con edema intralveolar y membranas hialinas. INFECCIÓNCONGÉNITA .- Ocurre en 1 a 3 % de todas las gestaciones a nivel mundial. Desarrollan sintomatología: sólo 25% de los niños infectados M ANIFESTACIONES CLÍNICAS: Hepatoesplenomegalia, ictericia, exantema petequial, microcefalia Afectación del oido interno, alteraciones motoras, Coriorretinitis y microcalcificaciones cerebrales

14. CUADRO CLINICO EN ADULTOS INMUNOCOMPETENTE * asintomático o * s. Mononucleósico ( la > frecuente tras neonato) similar a mononucleosis infecciosa,< faringoamigdalitis y adenopatías. Raras complicaciones, similares a la M.I. INMUNODEPRIMIDOS colitis, hepatitis, neumonía, úlceras digestivas, retinitis, rechazo. (1-6 m. Postrasplante)

15. Hay que sospechar el CMV si un paciente: tiene síntomas de mononucleosis infecciosa pero tiene resultados negativos en las pruebas para la mononucleosis y el virus de Epstein-Barr, y muestra signos de hepatitis, pero tiene resultados negativos en las pruebas de la hepatitis A, B y C.

16. DIAGNOSTICO Primoinfección : * Dx: Acs. tipo IgM (tras 4 s. primoinfección) * Acs. IgG (persisten muchos años) Reinfección : muchas limitaciones: e n inmunocompetentes no se producen Acs. IgM en inmunodeprimidos se producen Acs. IgG. Actualmente la técnica dx. mejor es la detección del Ag del virus pp65 , en leucocitos de sangre; y PCR del DNA viral en sangre o LCR (si hay afectación del SNC )

17. PRUEBAS DE DETECCION ELISA MEIA Inmunofluorescencia la hemaglutinación indirecta y la aglutinación en látex. PCR Cultivos celulares

18. PRUEBAS DE DETECCION

19. DIAGNOSTICO La muestra puede tomarse orina, saliva, líquido de lavado bronquial, sangre periférica y biopsia de tejidos Hallazgo histológico: Célula citomegálica en “ojo de buho”. CMV solo crece en cultivo de fibroblastos humanos en 4 a 6 semanas.

21. CULTIVO El primer procedimiento desarrollado fue el aislamiento por cultivo convencional (CC) en fibroblastos de origen humano crecidos en tubos. Es un método lento, ya que puede demorar hasta seis semanas en detectarse el efecto citopático (ECP). Este procedimiento fue posteriormente mejorado mediante el cultivo rápido en shell vial (SV) que consiste en la centrifugación de la muestra sobre monocapas de fibroblastos crecidas en cubreobjetos. Este método combina el aislamiento más la detección del antígeno temprano p72 por inmunofluorescencia a las 24 y 48 hs de cultivo, antes de la aparición del ECP. Esto represente una enorme ventaja para definir conductas terapéuticas, constituyendo el método de elección en muchos laboratorios que consideran al SV como más sensible que el CC.

22. Determinación de antigenemia pp65 y de la detección del genoma por métodos moleculares. Estos últimos permiten obtener resultados positivos más rápidamente que el aislamiento por cultivo y presentan ventajas técnicas, por lo que se emplean actualmente en el diagnóstico en inmunocomprometidos junto con el aislamiento.

23. CMV IgM Prueba ELISA para la deteccion de ac .IgM contra citomegalovirus. 1ero: Ser recubre con CMV antigenos. En la 1era etapa de Incubacion : Los ac .contra CMV se fijan a los antigenos inmovilizados. Al final los componentes excesivos son eliminados por lavado. 2da etapa: Se añade el conjugado Anti-IgM (marcados con peroxidasa) formacion de inmunocomplejos , lavar. 3era etapa : Añadir el sustrato ,se forma un color azul que pasa a amarillo despues de parar la reaccion. La intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos anti-CMV IgM presentes en la muestra. Nota : El buffer de dilución contiene anti IgG humana para prevenir interferencia de factor reumatoideo y competencia IgG especifica presente en la muestra .

24. Técnica: ELFA El procedimiento se basa en la determinación inmunoenzimática de las inmunoglobulinas en suero por técnica ELFA (Enzyme Linked Fluorescent Assay). Para los análisis correspondientes se empleó el Sistema VIDAS(®) y los kits correspondientes (VIDAS( ®) CMV IgG y VIDAS(®) CMV IgM). Estos kits permiten medir cuantitativamente las IgG/IgM anti-CMV en suero humano. Tras la etapa de pipeteo de la muestra los anticuerpos presentes (IgG ó IgM, según corresponda) van a fijarse al antígeno CMV de la pared interna del cono (fase sólida). En las etapas de lavado se eliminan los componentes no fijados. El anticuerpo monoclonal humano (anti-IgG ó anti-IgM, según corresponda) marcado con fosfatasa alcalina es aspirado y expulsado dentro del cono y se va a fijar a las IgG ó IgM anti-CMV humanas fijadas en la pared del cono. En una nueva etapa de lavado se vuelven a eliminar los componentes no fijados. En la etapa final, el sustrato (4-Metil-umbeliferil fosfato) es aspirado y después expulsado en el cono; el enzima del conjugado cataliza la reacción de hidrólisis de este sustrato en un producto (4-Metil-umbeliferona) cuya fluorescencia emitida es medida a 450 nm. La fluorescencia emitida medida es directamente proporcional a la presencia de inmunoglobulinas anticitomegalovirus en sangre. Resultado positivo un índice: igual o superior a 4 Ua/mL para la IgG e igual o superior a 0,07 Ua/mL para la IgM

25. La deteccion de Ac.especificos para IgM recientes o reactivada . FALSOS POSITIVOS : Inducidos por factor reumatoide ,ac anti nucleares y otros factores.

26. Se dispone de fármacos con actividad anti-CMV ganciclovir el foscarnet el valaciclovir como el Lo mas eficaz para prevenir este tipo de virus es el: Lavado de manos

27. TRATAMIENTO GANCICLOVIR : Es un nucleósido análogo de la guanosina,similar al aciclovir. CMV fosforila el fármaco mediante fosfotransferasa, y las ulteriores fosforilaciones se llevan a cabo por enzimas celulares. Por tanto sólo actúa en células infectadas. Ganciclovir-TP (trifosfato) es un potente inhibidor de la DNA-polimerasa del CMV, impidiendo o enlenteciendo la elongación de la cadena de DNA VALGANCICLOVIR: Es un éster de ganciclovir con buena biodisponibilidad por vía oral. FOSCARNET: es un pirofosfato con capacidad para unirse directamente a la DNA polimerasa de los herpesvirus incluyendo CMV. Se trata de una inhibición competitiva reversible, por lo que las concentraciones de Foscarnet deben permanecer altas en todo momento. Hay cepas resistentes a este antiviral, pero la resistencia no es cruzada con Ganciclovir

28. PROFILAXIS Utlización de órganos y productos sanguíneos de donantes seronegativos en receptores seronegativos - Inmunización pasiva con inumnoglobulinas en trasplantados Aciclovir o ganciclovir en trasplantes de órganos sólidos ó médula ósea. Vacunas en estudio (no disponibles)

29. GRACIAS