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Mariana Correa Giraldo
Semestre III
Facultad de Medicina , UPB
INTRODUCTION
JARID2
It is a protein coding
gene that functions as
a transcription factor
Catalyzes the methylation
of H3K27 and causes the
negative regulation of
PTEN
Is involvedin the
proliferation
PTEN
is a protein with
phosphatase activity
It antagonizes the PI3K-AKT / PKB
signaling route
It is a tumor suppressor.
is a group of kinase
enzymes
It is an antiapoptotic factor that
promotes cell proliferation,
growth and survival
also called protein kinase B
AKT
CANCER
Is a genetic disease
caused by changes
in the genes that
control cell growth
and proliferation.
BLADDER CANCER
It is an abnormal growth of tissue in
the lining of the bladder. In some
cases, the tumor spreads into the
bladder muscle.
PTEN action was inhibited:
DECONTROLLED GROWTH
(CANCER)
JARID2 inhibits PTEN when it
methylatesH3K27
"In the present study, we aimed
to explore whetherJarid2 could
interact with H3K27me3 to
regulate PTEN expression in
bladder cancer."
O
B
J
E
T
I
V
E
MATERIALES Y MÉTODOS
Para el estudio se usaron
veinte muestras de tejido
de cáncer de vejiga
humana y de tejido de
cáncer de vejiga no
tumorales adyacentes de
pacientes con cáncer de
vejiga, además de realizar
el respectivo cultivode
celulas
TRANSFECCIÓN CELULAR
WESTERN BLOT
Es una tecnica
que se basa
en la
identificacion
de una
proteina
basado en la
reaccion entre
un antigeno y
un anticuerpo
Se hace la
electroforesis
de unas
proteinas y
posteriormente
se marca con
un antigeno
especifico de
la proteina
que esta
buscando
En este estudio
estaban
evaluando la
expresion de la
proteina Jarid2
en tejidos con
cancer de
veijga y cells
sanas.
WESTERN BLOT
PCR CUANTITATIVA EN
TIEMPO REAL (RT-PCR):
ES UNA TECNICA QUE
SE BASA EN LA
AMPLIFICACIÓN DE
UNA SECUENCIA
ESPECIFICA DE ADN.
ENEL RT-PCR SE USA
ADNC OBTENIDO POR
LA ACCIÓN DE UNA
TRANSCRIPTASA
REVERSA APARTIR DE
ARNM.
SE USÓ EN EL ESTUDIO
PARA DETERMINAR LA
EXPRESIÓN DE ARNM
DE JARID2 EN LAS
LÍNEAS CELULARES DE
CÁNCER DE VEJIGA Y
SANAS
CITOMETRÍA DE
FLUJO
es una
técnicade
análisis
celular que
estudia
multiples
parametros
se basa en hacer pasar
una suspensión de
partículas (generalmente
células) alineadas y de
una en una por delante
de un haz de láser
focalizado
Se usó para
evluar las
poblaciones
celular en
apoptosis y
las vivas
RESULTADOS
SE PUEDE
APRECIAR EN LA
GRÁFICA B QUE
EN LAS CÉLULAS
TUMORALES HT-
1376,T24 Y 5637
LA EXPRESIÓN DE
JARID2 ES MAYOR
EN LA GRÁFICA D
SE OBSERVA
COMO LA BANDA
DE LOS TEJIDOS
NO TUMORALES
ES MAS DELGADA
Y CLARA QUE EN
LOS TEJIDOS
TUMORALES.
EN AMBAS
GRÁFICAS SE VE
COMO EL JARID2
SE EXPRESA
MUCHO MÁS EN
TEJIDOS
CANCEROSOS
QUE EN LOS
SANOS.
•
En esta gráfica se
puede apreciar como
el sh-1 disminuye
notablemente la
expresión del JARID-2
principalmenteen las
células tumorales tipo
HT-1376
Tanto en las células
tumorales tipo T-24
como en las TH-13-76 se
observaclaramente
como a las que se les
hizo la transfección de
sh-NC sufrieron
apoptosis
La imágen muestracomo en las células tipo
T24 con el sh-JARID2 expresaron en gran
cantidad e-cadherinas mientras que las
demás proteinas tienen valores más bajos
que en las que tienen el sh-NC
Las células tumorales T24 que tienen el
sh-JARID2 que hace una regulación
negativade dicho gen muestrauna
expresión muy marcada de PTEN en
comparacióncon las células control.
Se observa como las
células tupo T24 con el 5-
aza-CdR tuvieron una
disminución considerable
en la p-AKT y la N-
cadherina mientrs que
con la OE+Jarid2
tuvieron el valor más alto
de proteina snail.
En las células tipo HT-
1376 cque tenían el 5-
aza-CdR muestran una
expresión casi nula de
las proteinas snail y p-
AKT así como la
proteina Slug .Mientras
que la mayoríasiguió
con concentraciones
iguales de KT
D
I
S
C
U
S
S
I
O
N
AUTHOR CONTRIBUTION
X.Lei , et al In this study, we demonstrated that knockdown
of Jarid2 caused an obvious reduction in the
combination between Jarid2 and PTEN
promoter region, as well as a reduction in the
combination of H3K27me3 in PTEN promoter
region, suggesting that Jarid2 was indispensable
for H3K27me3 modification of PTEN and
subsequently downregulated PTEN expression
and promoted EMT process in bladder cancer
X.X. Zhu, et al we focused on the effects and mechanisms
underlying Jarid2 on bladder cancer
metastases. We found that Jarid2 was
overexpressed in bladder cancer tissue samples
and cell lines, and knockdown of Jarid2 with
shRNA significantly inhibited cell proliferation,
migration and tumorigenesis and promoted cell
apoptosis in bladder cancer T24 and HT-1376
cells, suggesting that Jarid2 might be a putative
novel therapeutic target for inhibiting the
metastases of malignant bladder cancer
V. Kasinath, et al.,
S. Sanulli, et al.
As a component element of PRC2, Jarid2 also
plays a vital role inDNAmethylated
modificationto regulategeneexpression
CONCLUSION
IN CASES LIKE THIS ITIS
WHERE THE TRUE
APPLICABILITYOF
MOLECULAR BIOLOGYIS
OBSERVED BECAUSE IT
ALLOWS TO KNOW MORE IN
DEPTH HOW CERTAIN GENES
WORK AND HOW AN
ALTERATION IN THESE CAN
MEAN HEALTH OR DISEASE
THIS AREA OF SCIENCE IS
VERY USEFUL BECAUSE IT
ALLOWS BY MEANS OF
OBSERVATION, ANALYSIS
AND GENETIC
MANIPULATION TO MODIFY
FACTORS THAT WOULD
NORMALLYCAUSE
NEGATIVE EFFECTS AND
THAT NOW ALLOW THE
NORMAL FUNCTIONING OF
THE CELLS AND WITH ITTHE
HUMAN BODY.
MAPA CONCEPTUAL
Aumento de
la expresión
del AKT
Si se modifica su
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Por manipulación
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  • 1. Mariana Correa Giraldo Semestre III Facultad de Medicina , UPB
  • 2. INTRODUCTION JARID2 It is a protein coding gene that functions as a transcription factor Catalyzes the methylation of H3K27 and causes the negative regulation of PTEN Is involvedin the proliferation PTEN is a protein with phosphatase activity It antagonizes the PI3K-AKT / PKB signaling route It is a tumor suppressor. is a group of kinase enzymes It is an antiapoptotic factor that promotes cell proliferation, growth and survival also called protein kinase B AKT
  • 3. CANCER Is a genetic disease caused by changes in the genes that control cell growth and proliferation. BLADDER CANCER It is an abnormal growth of tissue in the lining of the bladder. In some cases, the tumor spreads into the bladder muscle. PTEN action was inhibited: DECONTROLLED GROWTH (CANCER) JARID2 inhibits PTEN when it methylatesH3K27
  • 4. "In the present study, we aimed to explore whetherJarid2 could interact with H3K27me3 to regulate PTEN expression in bladder cancer." O B J E T I V E
  • 5. MATERIALES Y MÉTODOS Para el estudio se usaron veinte muestras de tejido de cáncer de vejiga humana y de tejido de cáncer de vejiga no tumorales adyacentes de pacientes con cáncer de vejiga, además de realizar el respectivo cultivode celulas TRANSFECCIÓN CELULAR
  • 6. WESTERN BLOT Es una tecnica que se basa en la identificacion de una proteina basado en la reaccion entre un antigeno y un anticuerpo Se hace la electroforesis de unas proteinas y posteriormente se marca con un antigeno especifico de la proteina que esta buscando En este estudio estaban evaluando la expresion de la proteina Jarid2 en tejidos con cancer de veijga y cells sanas. WESTERN BLOT
  • 7. PCR CUANTITATIVA EN TIEMPO REAL (RT-PCR): ES UNA TECNICA QUE SE BASA EN LA AMPLIFICACIÓN DE UNA SECUENCIA ESPECIFICA DE ADN. ENEL RT-PCR SE USA ADNC OBTENIDO POR LA ACCIÓN DE UNA TRANSCRIPTASA REVERSA APARTIR DE ARNM. SE USÓ EN EL ESTUDIO PARA DETERMINAR LA EXPRESIÓN DE ARNM DE JARID2 EN LAS LÍNEAS CELULARES DE CÁNCER DE VEJIGA Y SANAS
  • 8. CITOMETRÍA DE FLUJO es una técnicade análisis celular que estudia multiples parametros se basa en hacer pasar una suspensión de partículas (generalmente células) alineadas y de una en una por delante de un haz de láser focalizado Se usó para evluar las poblaciones celular en apoptosis y las vivas
  • 9. RESULTADOS SE PUEDE APRECIAR EN LA GRÁFICA B QUE EN LAS CÉLULAS TUMORALES HT- 1376,T24 Y 5637 LA EXPRESIÓN DE JARID2 ES MAYOR EN LA GRÁFICA D SE OBSERVA COMO LA BANDA DE LOS TEJIDOS NO TUMORALES ES MAS DELGADA Y CLARA QUE EN LOS TEJIDOS TUMORALES. EN AMBAS GRÁFICAS SE VE COMO EL JARID2 SE EXPRESA MUCHO MÁS EN TEJIDOS CANCEROSOS QUE EN LOS SANOS.
  • 10. • En esta gráfica se puede apreciar como el sh-1 disminuye notablemente la expresión del JARID-2 principalmenteen las células tumorales tipo HT-1376 Tanto en las células tumorales tipo T-24 como en las TH-13-76 se observaclaramente como a las que se les hizo la transfección de sh-NC sufrieron apoptosis
  • 11. La imágen muestracomo en las células tipo T24 con el sh-JARID2 expresaron en gran cantidad e-cadherinas mientras que las demás proteinas tienen valores más bajos que en las que tienen el sh-NC Las células tumorales T24 que tienen el sh-JARID2 que hace una regulación negativade dicho gen muestrauna expresión muy marcada de PTEN en comparacióncon las células control.
  • 12. Se observa como las células tupo T24 con el 5- aza-CdR tuvieron una disminución considerable en la p-AKT y la N- cadherina mientrs que con la OE+Jarid2 tuvieron el valor más alto de proteina snail. En las células tipo HT- 1376 cque tenían el 5- aza-CdR muestran una expresión casi nula de las proteinas snail y p- AKT así como la proteina Slug .Mientras que la mayoríasiguió con concentraciones iguales de KT
  • 13. D I S C U S S I O N AUTHOR CONTRIBUTION X.Lei , et al In this study, we demonstrated that knockdown of Jarid2 caused an obvious reduction in the combination between Jarid2 and PTEN promoter region, as well as a reduction in the combination of H3K27me3 in PTEN promoter region, suggesting that Jarid2 was indispensable for H3K27me3 modification of PTEN and subsequently downregulated PTEN expression and promoted EMT process in bladder cancer X.X. Zhu, et al we focused on the effects and mechanisms underlying Jarid2 on bladder cancer metastases. We found that Jarid2 was overexpressed in bladder cancer tissue samples and cell lines, and knockdown of Jarid2 with shRNA significantly inhibited cell proliferation, migration and tumorigenesis and promoted cell apoptosis in bladder cancer T24 and HT-1376 cells, suggesting that Jarid2 might be a putative novel therapeutic target for inhibiting the metastases of malignant bladder cancer V. Kasinath, et al., S. Sanulli, et al. As a component element of PRC2, Jarid2 also plays a vital role inDNAmethylated modificationto regulategeneexpression
  • 14. CONCLUSION IN CASES LIKE THIS ITIS WHERE THE TRUE APPLICABILITYOF MOLECULAR BIOLOGYIS OBSERVED BECAUSE IT ALLOWS TO KNOW MORE IN DEPTH HOW CERTAIN GENES WORK AND HOW AN ALTERATION IN THESE CAN MEAN HEALTH OR DISEASE THIS AREA OF SCIENCE IS VERY USEFUL BECAUSE IT ALLOWS BY MEANS OF OBSERVATION, ANALYSIS AND GENETIC MANIPULATION TO MODIFY FACTORS THAT WOULD NORMALLYCAUSE NEGATIVE EFFECTS AND THAT NOW ALLOW THE NORMAL FUNCTIONING OF THE CELLS AND WITH ITTHE HUMAN BODY.
  • 15. MAPA CONCEPTUAL Aumento de la expresión del AKT Si se modifica su expresión Por manipulación genética(transfección) Aumenta apoptosis Disminuye el crecimiento