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RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR C13Y H1
CONCEPTO.-
La resonancia magnética nuclear de C13 es complementaria a la de H1. Esta
última técnica se utiliza para deducir la estructura del esqueleto carbonado
observando los entornos magnéticos de los átomos de hidrógeno, mientras que
la espectroscopia de RMN de C13 determina el entorno magnético de los
átomos de carbono.
Aproximadamente el 99% de los átomos de carbono en una muestra natural
son del isótopo C12. Este isótopo posee un número par de protones y un
número par de neutrones, por tanto, no tiene espín magnético y no puede dar
lugar a señales de resonancia magnética nuclear. El isótopo de C13 menos
abundante tiene un número impar de neutrones, lo que le confiere un espín
magnético de 172, igual al del protón.
La espectroscopia de resonancia magnética nuclear de C13 es menos sensible
que la de H1 debido a que sólo el 1% de los átomos de carbono posee espín y a
que, además, la frecuencia de resonancia del C13, para un campo magnético
dado, es la cuarta parte de la que se da en la RMN de H1.
Los desplazamientos químicos del carbono son de 15 a 20 veces mayores que
los del hidrógeno debido a que el carbono está directamente unido a los
átomos que resultan ser bien apantallantes o desapantallantes. Por ejemplo, el
protón de un aldehído absorbe a 9.4 ppm en el espectro de H1 mientras que el
carbono de carbonilo absorbe a 180 ppm en el espectro de C13.
Además, las señales en el espectro de C13 son líneas verticales, es decir, no hay
desdoblamientos de espín-espín. Esto se debe a que sólo el 1% de los átomos
de carbono entran en resonancia, y por tanto, existe una probabilidad muy
pequeña de que un núcleo de C13 esté adyacente a otro núcleo de C13.
A continuación se da una tabla de valores aproximados de desplazamientos
químicos en un espectro de resonancia magnética nuclear de C13
.
GENERALIDADES.-
La resonancia magnética nuclear (RMN) es un fenómeno físico basado en las
propiedades mecánico-cuánticas de los núcleos atómicos. RMN también se
refiere a la familia de métodos científicos que explotan este fenómeno
paraestudiar moléculas(Espectroscopia de RMN),macromoléculas (RMN
biomolecular), así como tejidos y organismos completos (imagen por resonancia
magnética).
Todos los núcleos que poseen un número impar
de protones o neutrones tienen un momento magnético y un momento
angular intrínseco, en otras palabras, tienen un espín > 0. Los núcleos más
comúnmente empleados en RMN son el protón (1
H, el isótopo más sensible en
RMN después del inestable tritio, 3
H), el 13
C y el 15
N, aunque los isótopos de
núcleos de muchos otros elementos
(2
H, 10
B, 11
B, 14
N, 17
O, 19
F, 23
Na, 29
Si, 31
P, 35
Cl, 113
Cd, 195
Pt) son también utilizados.
Las frecuencias a las cuales resuena un núcleo atómico (i. e. dentro de
una molécula) son directamente proporcionales a la fuerza del campo
magnético ejercido, de acuerdo con la ecuación de la frecuencia de precesión
de Larmor. La literatura científica hasta el 2008 incluye espectros en un gran
intervalo de campos magnéticos, desde 100 nT hasta 20 T. Los campos
magnéticos mayores son a menudo preferidos puesto que correlacionan con un
incremento en la sensibilidad de la señal. Existen muchos otros métodos para
incrementar la señal observada. El incremento del campo magnético también se
traduce en una mayor resolución espectral, cuyos detalles son descritos por
el desplazamiento químico y el efecto Zeeman.
La RMN estudia los núcleos atómicos al alinearlos a un campo magnético
constante para posteriormente perturbar este alineamiento con el uso de un
campo magnético alterno, de orientación ortogonal. La resultante de esta
perturbación es el fenómeno que explotan las distintas técnicas de RMN. El
fenómeno de la RMN también se utiliza en la RMN de campo bajo, la RMN de
campo terrestre y algunos tipos de magnetómetros.
APLICACIONES MÁS COMUNES
La resonancia magnética hace uso de las propiedades de resonancia
aplicando radiofrecuenciasa los núcleos atómicos o dipolos entre los campos
alineados de la muestra, y permite estudiar la información estructural
o química de una muestra. La RM se utiliza también en el campo de la
investigación de ordenadores cuánticos. Sus aplicaciones más frecuentes se
encuentran ligadas al campo de la medicina, la bioquímica y la química
orgánica. Es común denominar "resonancia magnética" al aparato que
obtiene imágenes por resonancia magnética (MRI, por las siglas en inglés de
"MagneticResonanceImaging").
DESCUBRIMIENTO
La resonancia magnética nuclear fue descrita y medida en rayos moleculares
por IsidorRabi en 1938.1
Ocho años después, en 1946,Félix Bloch y Edward Mills
Purcell refinan la técnica usada en líquidos y en sólidos, por lo que
compartieron el Premio Nobel de Físicaen 1952.2
Purcell había trabajado en el desarrollo del radar y sus aplicaciones durante
la Segunda Guerra Mundial en el Lab de Radiación delInstituto Tecnológico de
Massachusetts. Su trabajo durante tal proyecto fue producir y detectar energía
de radiofrecuencias, y sobre absorciones de tales energías de RF por la materia,
precediendo a su codescubrimiento de la RMN.
Ellos se dieron cuenta de que los núcleos magnéticos, como 1
H (protio) y 31
P,
podían absorber energía de RF cuando eran colocados en un campo magnético
de una potencia específica y así lograban identificar los núcleos. Cuando esa
absorción ocurre, los núcleos se describen como estando en resonancia.
Diferentes núcleos atómicos dentro de una molécula resuenan a diferentes
frecuencias de radio para la misma fuerza de campo magnético. La observación
de tales frecuencias resonantes magnéticas de los núcleos presentes en una
molécula permite al usuario entrenado descubrir información esencial, química
y estructural acerca de las moléculas.
El desarrollo de la resonancia magnética nuclear como técnica de química
analítica y de bioquímica fue paralela con el desarrollo de la tecnología
electromagnética y su introducción al uso civil.
PRINCIPIO FÍSICOESPÍN NUCLEAR
Las partículas elementales que componen al núcleo
atómico (neutrones y protones), tienen la propiedad mecánico-cuántica
intrínseca del espín. El espín de un núcleo está determinado por el número
cuántico del espín I. Si el número combinado de protones y neutrones en
un isótopo dado es par, entonces I = 0, i. e. no existe un espín general; así como
los electrones se aparean en orbitales atómicos, de igual manera se asocian
neutrones y protones en números pares (que también son partículas de espín ½
y por lo tanto sonfermiones) para dar un espín general = 0.
Un espín distinto a cero, I, está asociado a un momento magnético distinto a
cero, μ:
en donde γ es la proporción giromagnética. Esta constante indica la intensidad
de la señal de cada isótopo usado en RMN
VALORES DEL MOMENTO ANGULAR DEL ESPÍN.-
El momento angular asociado al espín nuclear esta cuantizado. Esto significa
que tanto la magnitud como la orientación del momento angular
están cuantizadas (i.e. I solo puede tomar valores en un intervalo restringido). El
número cuántico asociado se conoce como número cuántico magnético, m, y
puede tomar valores enteros desde +I hasta -I. Por lo tanto, para cualquier
núcleo, existe un total de 2I+1 estados de momento angular.
El componente z del vector de momento angular, Iz es por lo tanto:
En la que es la constante de Planck reducida.
El componente z del momento magnético es simplemente:
COMPORTAMIENTO DEL ESPÍN EN UN CAMPO MAGNÉTICO.-
Consideremos un núcleo que posee un espín de ½, como 1
H, 13
C o 19
F. Este
núcleo tiene dos estados posibles de espín: m = ½ o m= -½ (que también se
les llama 'arriba' y 'abajo', o α y β, respectivamente). Las energías de estos dos
estados son degeneradas —lo cual significa que son las mismas. Por lo tanto las
poblaciones de estos dos estados (i.e. el número de átomos en los dos estados)
serán aproximadamente iguales en condiciones de equilibrio térmico.
Sin embargo, al poner este núcleo bajo un campo magnético, la interacción
entre el momento magnético nuclear y el campo magnético externo promoverá
que los dos estados de espín dejen de tener la misma energía. La energía del
momento magnético μ bajo la influencia del campo magnético B0 (el subíndice
cero se utiliza para distinguir este campo magnético de cualquier otro campo
magnético utilizado) está dado por el producto escalar negativo de los vectores:
En el que el campo magnético ha sido orientado a lo largo del eje z.
Por lo tanto:
Como resultado, los distintos estados nucleares del espín tienen diferentes
energías en un campo magnético ≠ 0. En otras palabras, podemos decir que los
dos estados del espín de un espín ½ han sido alineados ya sea a favor o en
contra del campo magnético. Si γ es positiva (lo cual es cierto para la mayoría
de los isótopos) entonces m = ½ está en el estado de baja energía.
La diferencia de energía entre los dos estados es:
Y esta diferencia se traduce en una pequeña mayoría de espines en el estado de
baja energía.
La absorción de resonancia ocurre cuando esta diferencia de energía es excitada
por radiación electromagnética de la misma frecuencia. La energía de
un fotón es E = hν, donde ν es su frecuencia. Por lo tanto la absorción ocurrirá
cuando:
Estas frecuencias corresponden típicamente al intervalo de radiofrecuencias del
espectro electromagnético. Esta es la absorción de resonancia que se detecta en
RMN.
APANTALLAMIENTO NUCLEAR
Podría parecer por lo dicho arriba que todos los núcleos del mismo núclido (y
por lo tanto la misma γ) resuenan a la misma frecuencia. Este no es el caso. La
perturbación más importante en las frecuencias de RMN para aplicaciones en
RMN es el efecto de 'apantallamiento' que ejercen los electrones circundantes.
En general, este apantallamiento electrónico reduce el campo magnético del
núcleo (lo cual determina la frecuencia de la RMN). Como resultado, la brecha
energética se reduce y la frecuencia requerida para alcanzar resonancia también
se reduce. Este desplazamiento de la frecuencia de RMN dado por el ambiente
químico se conoce como desplazamiento químico, y explica porque el RMN es
una sonda directa de la estructura química. Si un núcleo está más apantallado,
estará desplazado hacia 'campo alto' (menor desplazamiento químico) y si está
más desapantallado, entonces estará desplazado hacia 'campo bajo' (mayor
desplazamiento químico).3
A menos que la simetría local sea particularmente alta, el efecto de
apantallamiento depende de la orientación de la molécula con respecto al
campo externo. En RMN de estado sólido, el 'giro al ángulo mágico'
(magicangle spinning) es necesario para disipar esta dependencia orientacional.
Esto no se requiere en RMN convencional puesto que el movimiento rápido y
desordenado de moléculas en solución disipa el componente anisótropo del
corrimiento químico.
DIGITACION MEDIANTE TRANSFORMADA DE FOURIER.-
Con la desalineación de los espines, es decir, la recuperación natural de la
dirección y sentido de éstos una vez sometidos a la radiación electromagnética,
generará unas emisiones a consecuencia de la liberación energética, los cuales
serán captados por la antena receptora del escáner. Estas emisiones han de ir en
concordancia con la Dim-Fase, siendo la compilación de todas estas emisiones
el principio de la resonancia magnética.
Una vez finalizada toda la extracción de datos se procederá al trato de las
mismas en el dominio de la frecuencia mediante el empleo de la transformada
de Fourier, la cual nos facilitará la reconstrucción de la imagen final por pantalla.
La frecuencia de la variación de una señal en el espacio se denomina "K", es
decir, los datos compilados en el dominio de las frecuencias espaciales se
denominaespacio K.
La finalidad de la creación de este espacio es poder aplicar las leyes
matemáticas de Fourier, lo que permite identificar el lugar de procedencia de las
emisiones en un determinado momento y, por lo tanto, su lugar de procedencia
ESPECTROSCOPIA DE RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR.-
La espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN) es una técnica
empleada principalmente en la elucidación de estructuras moleculares, aunque
también se puede emplear con fines cuantitativos y en estudios cinéticos y
termodinámicos.
Algunos núcleos atómicos sometidos a un campo magnético externo
absorben radiación electromagnética en la región de las frecuencias de radio
o radiofrecuencias. Como la frecuencia exacta de esta absorción depende del
entorno de estos núcleos, se puede emplear para determinar la estructura de la
molécula en donde se encuentran éstos.
Para que se pueda emplear la técnica los núcleos deben tener un momento
magnético distinto de cero. Esta condición no la cumplen los núcleos
con número másico y número atómico par (como el 12
C, 16
O, 32
S). Los núcleos
más importantes en química orgánica son: 1
H, 13
C, 31
P, 19
F y 15
N.
Otros núcleos
importantes: 7
Li, 11
B, 27
Al, 29
Si, 77
Se, 117
Sn, 195
Pt, 199
Hg, 203
Tl, 205
Tl, 207
Pb
Se prefieren los núcleos de número cuántico de espín nuclear igual a 1/2, ya
que carecen de un momento cuadripolar eléctrico que produce un
ensanchamiento de las señales de RMN. También es mejor que el isótopo sea
abundante en la naturaleza, ya que la intensidad de la señal dependerá de la
concentración de esos núcleos activos. Por eso, uno de los más útiles en la
elucidación de estructuras es el 1
H, dando lugar a la espectroscopia de
resonancia magnética nuclear de protón. También es importante en química
orgánica el 13
C, aunque se trata de un núcleo poco abundante y poco sensible.
La técnica se ha empleado en química orgánica, química
inorgánica y bioquímica. La misma tecnología también ha terminado por
extenderse a otros campos, por ejemplo en medicina, en donde se obtienen
imágenes por resonancia magnética.
INTRODUCCION.-
La RMN o RMI (Resonancia Magnética Nuclear o Resonancia Magnética por
Imágenes) es un nuevo método de Diagnóstico por Imágenes que se basa en
principios físicos distintos de los otros métodos que se estudiaron hasta ahora.
Mientras que el uso de los Rayos X (Radiología Convencional, Tomografía
Computada o Angiografía por Sustracción digital) se basa en la atenuación de
los fotones por los tejidos, la Ecografía en el uso de ultrasonidos donde la
información obtenida depende de la impedancia reflexión acústica de los
tejidos y la Medicina Nuclear en la inyección de radiofármacos para determinar
su acumulación en los distintos tejidos.
En la RM la información obtenida se basa en aprovechar las propiedades
magnéticas de los átomos de H (también Na, P y F) que tiene un número impar
de protones y neutrones en su núcleo y el predominio de carga positiva le da
con su movimiento de spin, propiedades magnéticas donde cada protón es un
pequeño vector magnético, que en estado natural la sumatoria de todos los
vectores es cero por estar en todas las direcciones del espacio.
Pero cuando sometemos el cuerpo a un campo magnético externo de cierta
magnitud, esos pequeños vectores se orientan en sentido paralelo o
antiparalelo (Norte-Sur, con predominio Norte por ser de menor energía) del
campo magnético externo.
Si luego le aplicamos una onda de radiofrecuencia (rf) que sea semejante a la
frecuencia a la que se mueven los protones (frecuencia deprecesión que es
específica para cada magnitud de campo magnético) con ello logramos cambiar
la orientación en el espacio del vector magnético que representa la sumatoria
de los vectores nucleares, al plano transversal – con un pulso de 90°-, o al
longitudinal -pulso de 180°-, y sumar energía a los protones que luego al parar
la onda de RF, los protones se relajan y la devuelven en forma de calor y en
parte con ondas de rf de la misma frecuencia a la que fueron estimulados; que
permite captarlas con una bobina y formar la imagen de RM.
Esas imágenes pueden adquirirse en los distintos tiempos de relajación tisular
T1 o T2, que son bastante específicos para cada tejido. Y en los distintos planos
del espacio -sagital, transversal o coronal- realizando cortes de milímetros a
centímetros mediante campos de gradientes superpuestos al campo principal
del magneto.
Hay distintos tipos de resonadores con imanes permanentes en general de
campo bajo y abiertos, con magnetos resistivos de campo bajo y medio y los
superconductivos de campo medio y alto de 1,5 T hasta 3 T que es el uso
clínico; los campos mayores de 3 T solo se usan para investigación.
La espectroscopia por RM o RME, requiere de campos altos de 1,5T, y
superiores, permite información sobre datos físico-químicos de los tejidos que
orienta sobre su origen y aproxima información sobre si un tumor es benigno o
maligno.
Las señales que emiten los tejidos luego de ser estimulados por ondas de rf en
un campo magnético se denominan hiperintensas, isoohipointensas y dependen
de distintas variables como la cantidad de H libre, el T1, el T2 y el flujo. La
sangre en movimiento no da señal por salirse de la influencia de las ondas de rf
y determinan vacío de señal de flujo -negro-.
- La densidad de H libre, que es la cantidad de agua es directamente
proporcional a la señal, por eso el hueso cortical y el aire no emiten señal -
negro-.
- La grasa que tiene un T1 corto y como la señal cuando ponderamos imágenes
T1 es inversamente proporcional, presentahiperintensidad. -blanca-. Y cuando
ponderamos T2 presenta señal alta pero menor, porque aquí es directamente
proporcional y tiene un tiempo T2 no tan largo.
1- El agua que tiene un T1 largo, no tiene señal cuando ponderamos la señal T1
-negro-, porque es inversamente proporcional. Y como elT2 es bien largo
presenta una señal alta en las imágenes T2 - directamente proporcional-. Por lo
que el agua es el contraste natural en RM.
Entre las imágenes T1 y T2, se puede adquirir una imagen intermedia que
depende de la densidad de protones de los tejidos y la imagen es de menor
contraste y mayor gama de grises, esta imagen de densidad protónica sirve para
visualizar entre otras cosas las áreas de desmielinización y gliosis en cerebro
junto con secuencias específicas como las técnicas FLAIR, (de atenuación del
agua e inversión de la recuperación).
En general toda la patología por ejemplo los tumores tienen un T1 hipo intenso
y un T2 hiperintenso,Que se asemejan al agua. Por lo que muchas veces es
preciso usar un medio de contraste, que al acorta los tiempos de relajación T1 y
T2 producen un T1 hiperintensode los tejidos tumorales que permite,OTORD
POT COTIXA¿¿DO
diferenciarlos.
El medio de contraste que se inyecta por vía endovenosa, es el Gadolinio, que
es una tierra rara.Hay tumores como el melanoma o losmeningiomas que
pueden verse en T1 hiperintensos y en T2 hipointensos. Como guía general
diremos que las ventajas de la RM son:
- No usa radiaciones ionizantes, ni tiene efectos biológicos adversos, que
permite el uso en embarazadas.
- Se estudian todos los planos del espacio –sagital, transversal y coronal o
incluso oblicuos si es necesario
- El medio de contraste (Gadolinio) no presenta la frecuencia de reacciones de
hipersensibilidad de loscontrastes yodados. No se usa en la gestación.
- Es excelente para estudiar fosa posterior o medula espinal sin la inyección de
sustancias de contraste
intratecales, con alta sensibilidad para enfermedades desmielinizantes.
Como contraindicaciones podemos mencionar los pacientes con marcapasos,
implantes cocleares
o clips vasculares de aneurismas cerebrales (aunque actualmente se usan de
titanio y material no ferromagnético compatibles con ). Una contraindicación
relativa es la claustrofobia que muchas veces requiere sedación o anestesia al
igual que en los niños.
MARCO TEORICO
estetrabajo informativo nos permite definir que la RMN,
Se basa en la medida de la absorción de la radiación electromagnética en la
región de las radiofrecuencias aproximadamente de 4 a 900MHZ.
La espectrocopia de RMN, es una de las principales técnicas empleadas
para obtener información física, química electrónica y estructural sobre
moléculas. Es una poderosa serie de medología que proveen información
sobre la topología , dinámica y estructuralmente tridimensional de
moléculas en solución y en estado sólido.
TECNICAS ESPECTROSCÓPICA
La elucidación estructural es fundamental en el descubrimiento y desarrollo de
nuevos fármacos, pues permite, al combinar la información obtenida mediante
la aplicación de diversas técnicas espectroscópicas y espectrométricas,
establecer la estructura química de una molécula, un hecho fundamental para
entender la forma en cómo se da la interacción entre el fármaco y su diana
biológica. Las técnicas espectroscópicas y espectrométricas más comúnmente
empleadas en la elucidación estructural de fármacos son: Ultravioleta visible (UV
– VIS), Infrarrojo (IR), Resonancia Magnética de Protón
1
H-RMN, y Carbono 13
C-RMN y Espectrometría de Masas (EM) (ver Tutorial
ANEXO).
ESPECTROSCOPIA DE INFRARROJO (IR)
Esta técnica se fundamenta en el hecho de que los enlaces moleculares
presentan estados vibracionales y rotacionales, que dependen del tipo de
átomos que los constituyen y de su momento dipolar (es un requisito que en
este caso sea distinto de 0). La incidencia de la radiación IR (λ: 800 – 40000
nmaprox) ocasiona que este momento dipolar sufra pequeñas alteraciones (sin
ruptura ni generación de nuevos enlaces) originando fundamentalmente dos
tipos de vibración: a) Estiramientos (requieren mayor energía) y b) Flexiones de
enlace, que están asociados con señales de absorción específicas que se
registran en lo que se denomina Espectro IR (estiramientos: señales en la
región izquierda del espectro y flexiones: en la región derecha del espectro).
Todo esto, permite que se puedan establecer tablas de correlación entre la
frecuencia de la señal generada y el grupo funcional al cual pertenece el enlace
que la genera. La integración de esta información permite establecer qué tipo
de grupos funcionales componen la molécula que se esté analizando (ver
Tutorial ANEXO).
ESPECTROSCOPIA O ESPECTROFOTOMETRÍA DE ULTRAVIOLETA-VISIBLE
(UV – VIS)
En este caso las señales de absorción, son generadas principalmente por las
transiciones electrónicas (σ – σ, σ – π, π – π, etc), producidas por la incidencia de
radiación correspondiente a la región Ultravioleta y Visible del espectro
electromagnético (λ: 190 – 800 nm). Las transiciones de los electrones π
(presentes en dobles enlaces) son de gran utilidad en el análisis de compuestos
insaturados o compuestos que contienen enlaces π. Esta técnica
espectroscópica permite obtener información acerca de la presencia
de: insaturaciones, grupos cromóforos (sistemas conjugados pi) y grupos
aromáticos en la molécula analizada.
ESPECTROSCOPÍA DE RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR (RMN)
En esta técnica espectroscópica el requisito fundamental es que la estructura
molecular que se pretenda elucidar presente un momento magnético de spin
(núcleo del átomo) distinto de 0, ya que este es el que se ve alterado por la
influencia de un campo magnético controlado generado por una fuente externa
(campo de radiofrecuencia generado por el imán del equipo). Dos modalidades
de RMN comúnmente empleadas en la elucidación estructural de moléculas
orgánicas son:
1
H-RMN:
La RMN de hidrógeno, permite obtener un espectro en donde las señales
muestran la ubicación (desplazamiento químico) y disposición de los
hidrógenos (específicamente isótopos 1
H cuyo spin es ½) en la molécula
analizada. Esto se da en función de la protección o desprotección electrónica
que generan los átomos a los cuales estén directamente enlazados o los átomos
adyacentes, permitiendo conocer los ambientes químicos en los que se
encuentran los diferentes protones que componen la molécula (Nota:tenga
presente que los electrones son partículas cargadas que giran y producen un
campo magnético secundario que se opone al campo aplicado). Comúnmente
se habla de que un espectro de RMN está compuesto de dos regiones: Campo
alto (región hacía la derecha del espectro) donde se ubican las señales de los H
con mayor protección electrónica (H en metilos, metilenos, etc) y Campo
bajo (región a la izquierda del espectro)donde se ubican las señales de los H
con mayor desprotección electrónica (aromáticos principalmente). Otro tipo de
información que brindan estos espectros, es que las señales pueden verse
divididas en función de los hidrógenos vecinos, a lo cual se le
denomina acoplamiento. Adicionalmente, el espectro indica la integración, que
es la intensidad relativa de cada señal, proporcional al número de protones que
la componen
13
C-RMN:
En este caso, el principio es el mismo que para 1
H-RMN y por lo tanto la
información que brindan es muy similar. Las principales diferencias, al
compararlo con el espectro de RMN deprotón protón radican en:
Los espectros de 13
C son más sencillos, ya que, dependiendo del número de
carbonos no equivalentes,lasseñalesaparecencomosingletes.
En el espectro de 13
C no se observan acoplamientos 13
C-13
C debido a su baja
abundancia natural.
La escala de los desplazamientos químicos en 13
C es mayor, yendo desde 0
hasta un poco más de 200 ppm (en 1
H-RMN va desde 0 hasta 14 ppm).
La integración de las señales en el espectro de 13
C no es posible, fenómeno que
si ocurre en los espectros de hidrógeno.
Como ventaja fundamental se tiene que el espectro de carbono 13 proporciona
información directa acerca los átomos de carbono que componen la molécula,
lo que en 1
H-RMN se obtendría de forma indirecta. Además, el espectro de 13
C
brinda información acerca de carbonilos y de átomos de carbono cuaternarios
ESPECTROMETRÍA DE MASAS
Está técnica se vale de la ionización de las moléculas a causa del bombardeo de
la molécula con un haz de partículas de alta energía. Los electrones son el tipo
de partícula más utilizada (ESPECTROMETRÍA DE IMPACTO ELECTRÓNICO). La
ionización de la molécula genera un patrón de fragmentación característico que
depende de la estructura química de la misma y sirve, por comparación con un
patrón, para la identificación de la misma. Cada fragmento producido genera
una señal cuya intensidad y ubicación depende de su abundancia relativa (%
respecto del fragmento más abundante) y de su relación masa– carga,
respectivamente. Una ventaja adicional, es que también puede obtenerse el
peso molecular antes de conocer con certeza toda la estructura molecular (ver
tutorial ANEXO).
Por último, es importante mencionar que el análisis integrado de la información
que proporcionan dos o más técnicas espectroscópicas es mucho más valioso
que la información que brinda cada espectro por aparte para establecer de
manera inequívoca la estructura de una molécula.
CONCLUSION.-
La obtención de imágenes utilizando principios de la Resonancia Magnética
Nuclear ha sido ampliamente desarrollada en los últimos años debido
principalmente a su utilidad médica, ya que es capaz de diferenciar tejidos con
una resolución mayor en el caso de la tomografía computada, sin utilizar
radiación ionizante, siendo de esta manera menos nociva para la salud del
paciente. Pero no sólo se restringe su aplicación al campo de la medicina,
también es plausible en un amplio rango de aplicaciones en investigación
básica, así como en la industria.
En un experimento de imágenes resulta natural pensar en contrastes. Esto
surge de las variaciones de ciertos parámetros físicos que puede existir entre
una región y otra dentro del objeto, generando así, variaciones en las
intensidades de la señal que permite diferenciar distintas regiones en la
imagen. Los parámetros físicos más comunes son: la densidad de espines , el
tiempo de relajación longitudinal T1 y el tiempo de relajación transversal T2.
En este trabajo se producirá un perfil unidimensional o imagen 1D, y se
estudiará un nuevo parámetro de contraste generado por la destrucción de la
magnetización producida por los campos locales presentes en ciertas muestras.
En este caso se trabajó con una muestra de liposomas de
dimiristoilfosfatidilcolina
(DMPC). Para obtener esta imagen pesada por este nuevo parámetro se aplica
previo a la secuencia de imágen, una secuencia de espín-lock, para diferentes.
OBJETIVOGENERAL:
Informar acerca del procedimiento, indicaciones, precauciones de la resonancia
magnéticanuclear.
OBJETIVOSESPECIFICOS
-Exponer todo aquello sobre la resonancia magnética nuclear.
-Mostrar su procedimiento, ventajas y desventajas, precauciones, etc.
BIBLIOGRAFÍA
-OTAMENDI, A ESTUDIOS DE FACTIBILIDAD DEL USO DE LA TÉCNICA DE
RESONANCIA.
-ALONSO,P.LA RESONANCIA PARAMAGNÉTICA, UNA TECNICA
MULTIDICIPLINAR,ZARAGOSA 2002.

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RMN C13 y H1: Resonancia magnética nuclear de carbono 13 y protón

  • 1. RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR C13Y H1 CONCEPTO.- La resonancia magnética nuclear de C13 es complementaria a la de H1. Esta última técnica se utiliza para deducir la estructura del esqueleto carbonado observando los entornos magnéticos de los átomos de hidrógeno, mientras que la espectroscopia de RMN de C13 determina el entorno magnético de los átomos de carbono. Aproximadamente el 99% de los átomos de carbono en una muestra natural son del isótopo C12. Este isótopo posee un número par de protones y un número par de neutrones, por tanto, no tiene espín magnético y no puede dar lugar a señales de resonancia magnética nuclear. El isótopo de C13 menos abundante tiene un número impar de neutrones, lo que le confiere un espín magnético de 172, igual al del protón. La espectroscopia de resonancia magnética nuclear de C13 es menos sensible que la de H1 debido a que sólo el 1% de los átomos de carbono posee espín y a que, además, la frecuencia de resonancia del C13, para un campo magnético dado, es la cuarta parte de la que se da en la RMN de H1. Los desplazamientos químicos del carbono son de 15 a 20 veces mayores que los del hidrógeno debido a que el carbono está directamente unido a los átomos que resultan ser bien apantallantes o desapantallantes. Por ejemplo, el protón de un aldehído absorbe a 9.4 ppm en el espectro de H1 mientras que el carbono de carbonilo absorbe a 180 ppm en el espectro de C13. Además, las señales en el espectro de C13 son líneas verticales, es decir, no hay desdoblamientos de espín-espín. Esto se debe a que sólo el 1% de los átomos de carbono entran en resonancia, y por tanto, existe una probabilidad muy pequeña de que un núcleo de C13 esté adyacente a otro núcleo de C13.
  • 2. A continuación se da una tabla de valores aproximados de desplazamientos químicos en un espectro de resonancia magnética nuclear de C13 . GENERALIDADES.- La resonancia magnética nuclear (RMN) es un fenómeno físico basado en las propiedades mecánico-cuánticas de los núcleos atómicos. RMN también se refiere a la familia de métodos científicos que explotan este fenómeno paraestudiar moléculas(Espectroscopia de RMN),macromoléculas (RMN biomolecular), así como tejidos y organismos completos (imagen por resonancia magnética). Todos los núcleos que poseen un número impar de protones o neutrones tienen un momento magnético y un momento angular intrínseco, en otras palabras, tienen un espín > 0. Los núcleos más comúnmente empleados en RMN son el protón (1 H, el isótopo más sensible en RMN después del inestable tritio, 3 H), el 13 C y el 15 N, aunque los isótopos de núcleos de muchos otros elementos (2 H, 10 B, 11 B, 14 N, 17 O, 19 F, 23 Na, 29 Si, 31 P, 35 Cl, 113 Cd, 195 Pt) son también utilizados.
  • 3. Las frecuencias a las cuales resuena un núcleo atómico (i. e. dentro de una molécula) son directamente proporcionales a la fuerza del campo magnético ejercido, de acuerdo con la ecuación de la frecuencia de precesión de Larmor. La literatura científica hasta el 2008 incluye espectros en un gran intervalo de campos magnéticos, desde 100 nT hasta 20 T. Los campos magnéticos mayores son a menudo preferidos puesto que correlacionan con un incremento en la sensibilidad de la señal. Existen muchos otros métodos para incrementar la señal observada. El incremento del campo magnético también se traduce en una mayor resolución espectral, cuyos detalles son descritos por el desplazamiento químico y el efecto Zeeman. La RMN estudia los núcleos atómicos al alinearlos a un campo magnético constante para posteriormente perturbar este alineamiento con el uso de un campo magnético alterno, de orientación ortogonal. La resultante de esta perturbación es el fenómeno que explotan las distintas técnicas de RMN. El fenómeno de la RMN también se utiliza en la RMN de campo bajo, la RMN de campo terrestre y algunos tipos de magnetómetros. APLICACIONES MÁS COMUNES
  • 4. La resonancia magnética hace uso de las propiedades de resonancia aplicando radiofrecuenciasa los núcleos atómicos o dipolos entre los campos alineados de la muestra, y permite estudiar la información estructural o química de una muestra. La RM se utiliza también en el campo de la investigación de ordenadores cuánticos. Sus aplicaciones más frecuentes se encuentran ligadas al campo de la medicina, la bioquímica y la química orgánica. Es común denominar "resonancia magnética" al aparato que obtiene imágenes por resonancia magnética (MRI, por las siglas en inglés de "MagneticResonanceImaging"). DESCUBRIMIENTO La resonancia magnética nuclear fue descrita y medida en rayos moleculares por IsidorRabi en 1938.1 Ocho años después, en 1946,Félix Bloch y Edward Mills Purcell refinan la técnica usada en líquidos y en sólidos, por lo que compartieron el Premio Nobel de Físicaen 1952.2 Purcell había trabajado en el desarrollo del radar y sus aplicaciones durante la Segunda Guerra Mundial en el Lab de Radiación delInstituto Tecnológico de Massachusetts. Su trabajo durante tal proyecto fue producir y detectar energía de radiofrecuencias, y sobre absorciones de tales energías de RF por la materia, precediendo a su codescubrimiento de la RMN. Ellos se dieron cuenta de que los núcleos magnéticos, como 1 H (protio) y 31 P, podían absorber energía de RF cuando eran colocados en un campo magnético de una potencia específica y así lograban identificar los núcleos. Cuando esa absorción ocurre, los núcleos se describen como estando en resonancia. Diferentes núcleos atómicos dentro de una molécula resuenan a diferentes frecuencias de radio para la misma fuerza de campo magnético. La observación de tales frecuencias resonantes magnéticas de los núcleos presentes en una molécula permite al usuario entrenado descubrir información esencial, química y estructural acerca de las moléculas.
  • 5. El desarrollo de la resonancia magnética nuclear como técnica de química analítica y de bioquímica fue paralela con el desarrollo de la tecnología electromagnética y su introducción al uso civil. PRINCIPIO FÍSICOESPÍN NUCLEAR Las partículas elementales que componen al núcleo atómico (neutrones y protones), tienen la propiedad mecánico-cuántica intrínseca del espín. El espín de un núcleo está determinado por el número cuántico del espín I. Si el número combinado de protones y neutrones en un isótopo dado es par, entonces I = 0, i. e. no existe un espín general; así como los electrones se aparean en orbitales atómicos, de igual manera se asocian neutrones y protones en números pares (que también son partículas de espín ½ y por lo tanto sonfermiones) para dar un espín general = 0. Un espín distinto a cero, I, está asociado a un momento magnético distinto a cero, μ: en donde γ es la proporción giromagnética. Esta constante indica la intensidad de la señal de cada isótopo usado en RMN
  • 6. VALORES DEL MOMENTO ANGULAR DEL ESPÍN.- El momento angular asociado al espín nuclear esta cuantizado. Esto significa que tanto la magnitud como la orientación del momento angular están cuantizadas (i.e. I solo puede tomar valores en un intervalo restringido). El número cuántico asociado se conoce como número cuántico magnético, m, y puede tomar valores enteros desde +I hasta -I. Por lo tanto, para cualquier núcleo, existe un total de 2I+1 estados de momento angular. El componente z del vector de momento angular, Iz es por lo tanto: En la que es la constante de Planck reducida. El componente z del momento magnético es simplemente: COMPORTAMIENTO DEL ESPÍN EN UN CAMPO MAGNÉTICO.- Consideremos un núcleo que posee un espín de ½, como 1 H, 13 C o 19 F. Este núcleo tiene dos estados posibles de espín: m = ½ o m= -½ (que también se les llama 'arriba' y 'abajo', o α y β, respectivamente). Las energías de estos dos estados son degeneradas —lo cual significa que son las mismas. Por lo tanto las poblaciones de estos dos estados (i.e. el número de átomos en los dos estados) serán aproximadamente iguales en condiciones de equilibrio térmico.
  • 7. Sin embargo, al poner este núcleo bajo un campo magnético, la interacción entre el momento magnético nuclear y el campo magnético externo promoverá que los dos estados de espín dejen de tener la misma energía. La energía del momento magnético μ bajo la influencia del campo magnético B0 (el subíndice cero se utiliza para distinguir este campo magnético de cualquier otro campo magnético utilizado) está dado por el producto escalar negativo de los vectores: En el que el campo magnético ha sido orientado a lo largo del eje z. Por lo tanto: Como resultado, los distintos estados nucleares del espín tienen diferentes energías en un campo magnético ≠ 0. En otras palabras, podemos decir que los dos estados del espín de un espín ½ han sido alineados ya sea a favor o en contra del campo magnético. Si γ es positiva (lo cual es cierto para la mayoría de los isótopos) entonces m = ½ está en el estado de baja energía. La diferencia de energía entre los dos estados es: Y esta diferencia se traduce en una pequeña mayoría de espines en el estado de baja energía. La absorción de resonancia ocurre cuando esta diferencia de energía es excitada por radiación electromagnética de la misma frecuencia. La energía de un fotón es E = hν, donde ν es su frecuencia. Por lo tanto la absorción ocurrirá cuando:
  • 8. Estas frecuencias corresponden típicamente al intervalo de radiofrecuencias del espectro electromagnético. Esta es la absorción de resonancia que se detecta en RMN. APANTALLAMIENTO NUCLEAR Podría parecer por lo dicho arriba que todos los núcleos del mismo núclido (y por lo tanto la misma γ) resuenan a la misma frecuencia. Este no es el caso. La perturbación más importante en las frecuencias de RMN para aplicaciones en RMN es el efecto de 'apantallamiento' que ejercen los electrones circundantes. En general, este apantallamiento electrónico reduce el campo magnético del núcleo (lo cual determina la frecuencia de la RMN). Como resultado, la brecha energética se reduce y la frecuencia requerida para alcanzar resonancia también se reduce. Este desplazamiento de la frecuencia de RMN dado por el ambiente químico se conoce como desplazamiento químico, y explica porque el RMN es una sonda directa de la estructura química. Si un núcleo está más apantallado, estará desplazado hacia 'campo alto' (menor desplazamiento químico) y si está más desapantallado, entonces estará desplazado hacia 'campo bajo' (mayor desplazamiento químico).3
  • 9. A menos que la simetría local sea particularmente alta, el efecto de apantallamiento depende de la orientación de la molécula con respecto al campo externo. En RMN de estado sólido, el 'giro al ángulo mágico' (magicangle spinning) es necesario para disipar esta dependencia orientacional. Esto no se requiere en RMN convencional puesto que el movimiento rápido y desordenado de moléculas en solución disipa el componente anisótropo del corrimiento químico. DIGITACION MEDIANTE TRANSFORMADA DE FOURIER.- Con la desalineación de los espines, es decir, la recuperación natural de la dirección y sentido de éstos una vez sometidos a la radiación electromagnética, generará unas emisiones a consecuencia de la liberación energética, los cuales serán captados por la antena receptora del escáner. Estas emisiones han de ir en concordancia con la Dim-Fase, siendo la compilación de todas estas emisiones el principio de la resonancia magnética. Una vez finalizada toda la extracción de datos se procederá al trato de las mismas en el dominio de la frecuencia mediante el empleo de la transformada de Fourier, la cual nos facilitará la reconstrucción de la imagen final por pantalla. La frecuencia de la variación de una señal en el espacio se denomina "K", es decir, los datos compilados en el dominio de las frecuencias espaciales se denominaespacio K. La finalidad de la creación de este espacio es poder aplicar las leyes matemáticas de Fourier, lo que permite identificar el lugar de procedencia de las emisiones en un determinado momento y, por lo tanto, su lugar de procedencia ESPECTROSCOPIA DE RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR.- La espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN) es una técnica empleada principalmente en la elucidación de estructuras moleculares, aunque
  • 10. también se puede emplear con fines cuantitativos y en estudios cinéticos y termodinámicos. Algunos núcleos atómicos sometidos a un campo magnético externo absorben radiación electromagnética en la región de las frecuencias de radio o radiofrecuencias. Como la frecuencia exacta de esta absorción depende del entorno de estos núcleos, se puede emplear para determinar la estructura de la molécula en donde se encuentran éstos. Para que se pueda emplear la técnica los núcleos deben tener un momento magnético distinto de cero. Esta condición no la cumplen los núcleos con número másico y número atómico par (como el 12 C, 16 O, 32 S). Los núcleos más importantes en química orgánica son: 1 H, 13 C, 31 P, 19 F y 15 N. Otros núcleos importantes: 7 Li, 11 B, 27 Al, 29 Si, 77 Se, 117 Sn, 195 Pt, 199 Hg, 203 Tl, 205 Tl, 207 Pb Se prefieren los núcleos de número cuántico de espín nuclear igual a 1/2, ya que carecen de un momento cuadripolar eléctrico que produce un ensanchamiento de las señales de RMN. También es mejor que el isótopo sea abundante en la naturaleza, ya que la intensidad de la señal dependerá de la concentración de esos núcleos activos. Por eso, uno de los más útiles en la elucidación de estructuras es el 1 H, dando lugar a la espectroscopia de resonancia magnética nuclear de protón. También es importante en química orgánica el 13 C, aunque se trata de un núcleo poco abundante y poco sensible. La técnica se ha empleado en química orgánica, química inorgánica y bioquímica. La misma tecnología también ha terminado por extenderse a otros campos, por ejemplo en medicina, en donde se obtienen imágenes por resonancia magnética.
  • 11. INTRODUCCION.- La RMN o RMI (Resonancia Magnética Nuclear o Resonancia Magnética por Imágenes) es un nuevo método de Diagnóstico por Imágenes que se basa en principios físicos distintos de los otros métodos que se estudiaron hasta ahora. Mientras que el uso de los Rayos X (Radiología Convencional, Tomografía Computada o Angiografía por Sustracción digital) se basa en la atenuación de los fotones por los tejidos, la Ecografía en el uso de ultrasonidos donde la información obtenida depende de la impedancia reflexión acústica de los tejidos y la Medicina Nuclear en la inyección de radiofármacos para determinar su acumulación en los distintos tejidos. En la RM la información obtenida se basa en aprovechar las propiedades magnéticas de los átomos de H (también Na, P y F) que tiene un número impar
  • 12. de protones y neutrones en su núcleo y el predominio de carga positiva le da con su movimiento de spin, propiedades magnéticas donde cada protón es un pequeño vector magnético, que en estado natural la sumatoria de todos los vectores es cero por estar en todas las direcciones del espacio. Pero cuando sometemos el cuerpo a un campo magnético externo de cierta magnitud, esos pequeños vectores se orientan en sentido paralelo o antiparalelo (Norte-Sur, con predominio Norte por ser de menor energía) del campo magnético externo. Si luego le aplicamos una onda de radiofrecuencia (rf) que sea semejante a la frecuencia a la que se mueven los protones (frecuencia deprecesión que es específica para cada magnitud de campo magnético) con ello logramos cambiar la orientación en el espacio del vector magnético que representa la sumatoria de los vectores nucleares, al plano transversal – con un pulso de 90°-, o al longitudinal -pulso de 180°-, y sumar energía a los protones que luego al parar la onda de RF, los protones se relajan y la devuelven en forma de calor y en parte con ondas de rf de la misma frecuencia a la que fueron estimulados; que permite captarlas con una bobina y formar la imagen de RM. Esas imágenes pueden adquirirse en los distintos tiempos de relajación tisular T1 o T2, que son bastante específicos para cada tejido. Y en los distintos planos del espacio -sagital, transversal o coronal- realizando cortes de milímetros a centímetros mediante campos de gradientes superpuestos al campo principal del magneto. Hay distintos tipos de resonadores con imanes permanentes en general de campo bajo y abiertos, con magnetos resistivos de campo bajo y medio y los superconductivos de campo medio y alto de 1,5 T hasta 3 T que es el uso clínico; los campos mayores de 3 T solo se usan para investigación.
  • 13. La espectroscopia por RM o RME, requiere de campos altos de 1,5T, y superiores, permite información sobre datos físico-químicos de los tejidos que orienta sobre su origen y aproxima información sobre si un tumor es benigno o maligno. Las señales que emiten los tejidos luego de ser estimulados por ondas de rf en un campo magnético se denominan hiperintensas, isoohipointensas y dependen de distintas variables como la cantidad de H libre, el T1, el T2 y el flujo. La sangre en movimiento no da señal por salirse de la influencia de las ondas de rf y determinan vacío de señal de flujo -negro-. - La densidad de H libre, que es la cantidad de agua es directamente proporcional a la señal, por eso el hueso cortical y el aire no emiten señal - negro-. - La grasa que tiene un T1 corto y como la señal cuando ponderamos imágenes T1 es inversamente proporcional, presentahiperintensidad. -blanca-. Y cuando ponderamos T2 presenta señal alta pero menor, porque aquí es directamente proporcional y tiene un tiempo T2 no tan largo. 1- El agua que tiene un T1 largo, no tiene señal cuando ponderamos la señal T1 -negro-, porque es inversamente proporcional. Y como elT2 es bien largo presenta una señal alta en las imágenes T2 - directamente proporcional-. Por lo que el agua es el contraste natural en RM. Entre las imágenes T1 y T2, se puede adquirir una imagen intermedia que depende de la densidad de protones de los tejidos y la imagen es de menor contraste y mayor gama de grises, esta imagen de densidad protónica sirve para visualizar entre otras cosas las áreas de desmielinización y gliosis en cerebro junto con secuencias específicas como las técnicas FLAIR, (de atenuación del agua e inversión de la recuperación).
  • 14. En general toda la patología por ejemplo los tumores tienen un T1 hipo intenso y un T2 hiperintenso,Que se asemejan al agua. Por lo que muchas veces es preciso usar un medio de contraste, que al acorta los tiempos de relajación T1 y T2 producen un T1 hiperintensode los tejidos tumorales que permite,OTORD POT COTIXA¿¿DO diferenciarlos. El medio de contraste que se inyecta por vía endovenosa, es el Gadolinio, que es una tierra rara.Hay tumores como el melanoma o losmeningiomas que pueden verse en T1 hiperintensos y en T2 hipointensos. Como guía general diremos que las ventajas de la RM son: - No usa radiaciones ionizantes, ni tiene efectos biológicos adversos, que permite el uso en embarazadas. - Se estudian todos los planos del espacio –sagital, transversal y coronal o incluso oblicuos si es necesario - El medio de contraste (Gadolinio) no presenta la frecuencia de reacciones de hipersensibilidad de loscontrastes yodados. No se usa en la gestación. - Es excelente para estudiar fosa posterior o medula espinal sin la inyección de sustancias de contraste intratecales, con alta sensibilidad para enfermedades desmielinizantes. Como contraindicaciones podemos mencionar los pacientes con marcapasos, implantes cocleares o clips vasculares de aneurismas cerebrales (aunque actualmente se usan de titanio y material no ferromagnético compatibles con ). Una contraindicación relativa es la claustrofobia que muchas veces requiere sedación o anestesia al igual que en los niños.
  • 15. MARCO TEORICO estetrabajo informativo nos permite definir que la RMN, Se basa en la medida de la absorción de la radiación electromagnética en la región de las radiofrecuencias aproximadamente de 4 a 900MHZ. La espectrocopia de RMN, es una de las principales técnicas empleadas para obtener información física, química electrónica y estructural sobre moléculas. Es una poderosa serie de medología que proveen información sobre la topología , dinámica y estructuralmente tridimensional de moléculas en solución y en estado sólido.
  • 16. TECNICAS ESPECTROSCÓPICA La elucidación estructural es fundamental en el descubrimiento y desarrollo de nuevos fármacos, pues permite, al combinar la información obtenida mediante la aplicación de diversas técnicas espectroscópicas y espectrométricas, establecer la estructura química de una molécula, un hecho fundamental para entender la forma en cómo se da la interacción entre el fármaco y su diana biológica. Las técnicas espectroscópicas y espectrométricas más comúnmente empleadas en la elucidación estructural de fármacos son: Ultravioleta visible (UV – VIS), Infrarrojo (IR), Resonancia Magnética de Protón 1 H-RMN, y Carbono 13 C-RMN y Espectrometría de Masas (EM) (ver Tutorial ANEXO). ESPECTROSCOPIA DE INFRARROJO (IR) Esta técnica se fundamenta en el hecho de que los enlaces moleculares presentan estados vibracionales y rotacionales, que dependen del tipo de átomos que los constituyen y de su momento dipolar (es un requisito que en este caso sea distinto de 0). La incidencia de la radiación IR (λ: 800 – 40000 nmaprox) ocasiona que este momento dipolar sufra pequeñas alteraciones (sin
  • 17. ruptura ni generación de nuevos enlaces) originando fundamentalmente dos tipos de vibración: a) Estiramientos (requieren mayor energía) y b) Flexiones de enlace, que están asociados con señales de absorción específicas que se registran en lo que se denomina Espectro IR (estiramientos: señales en la región izquierda del espectro y flexiones: en la región derecha del espectro). Todo esto, permite que se puedan establecer tablas de correlación entre la frecuencia de la señal generada y el grupo funcional al cual pertenece el enlace que la genera. La integración de esta información permite establecer qué tipo de grupos funcionales componen la molécula que se esté analizando (ver Tutorial ANEXO). ESPECTROSCOPIA O ESPECTROFOTOMETRÍA DE ULTRAVIOLETA-VISIBLE (UV – VIS) En este caso las señales de absorción, son generadas principalmente por las transiciones electrónicas (σ – σ, σ – π, π – π, etc), producidas por la incidencia de radiación correspondiente a la región Ultravioleta y Visible del espectro electromagnético (λ: 190 – 800 nm). Las transiciones de los electrones π (presentes en dobles enlaces) son de gran utilidad en el análisis de compuestos insaturados o compuestos que contienen enlaces π. Esta técnica espectroscópica permite obtener información acerca de la presencia de: insaturaciones, grupos cromóforos (sistemas conjugados pi) y grupos aromáticos en la molécula analizada.
  • 18. ESPECTROSCOPÍA DE RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR (RMN) En esta técnica espectroscópica el requisito fundamental es que la estructura molecular que se pretenda elucidar presente un momento magnético de spin (núcleo del átomo) distinto de 0, ya que este es el que se ve alterado por la influencia de un campo magnético controlado generado por una fuente externa (campo de radiofrecuencia generado por el imán del equipo). Dos modalidades de RMN comúnmente empleadas en la elucidación estructural de moléculas orgánicas son: 1 H-RMN: La RMN de hidrógeno, permite obtener un espectro en donde las señales muestran la ubicación (desplazamiento químico) y disposición de los hidrógenos (específicamente isótopos 1 H cuyo spin es ½) en la molécula analizada. Esto se da en función de la protección o desprotección electrónica que generan los átomos a los cuales estén directamente enlazados o los átomos adyacentes, permitiendo conocer los ambientes químicos en los que se encuentran los diferentes protones que componen la molécula (Nota:tenga presente que los electrones son partículas cargadas que giran y producen un campo magnético secundario que se opone al campo aplicado). Comúnmente se habla de que un espectro de RMN está compuesto de dos regiones: Campo alto (región hacía la derecha del espectro) donde se ubican las señales de los H con mayor protección electrónica (H en metilos, metilenos, etc) y Campo bajo (región a la izquierda del espectro)donde se ubican las señales de los H con mayor desprotección electrónica (aromáticos principalmente). Otro tipo de información que brindan estos espectros, es que las señales pueden verse divididas en función de los hidrógenos vecinos, a lo cual se le denomina acoplamiento. Adicionalmente, el espectro indica la integración, que
  • 19. es la intensidad relativa de cada señal, proporcional al número de protones que la componen 13 C-RMN: En este caso, el principio es el mismo que para 1 H-RMN y por lo tanto la información que brindan es muy similar. Las principales diferencias, al compararlo con el espectro de RMN deprotón protón radican en: Los espectros de 13 C son más sencillos, ya que, dependiendo del número de carbonos no equivalentes,lasseñalesaparecencomosingletes. En el espectro de 13 C no se observan acoplamientos 13 C-13 C debido a su baja abundancia natural. La escala de los desplazamientos químicos en 13 C es mayor, yendo desde 0 hasta un poco más de 200 ppm (en 1 H-RMN va desde 0 hasta 14 ppm). La integración de las señales en el espectro de 13 C no es posible, fenómeno que si ocurre en los espectros de hidrógeno. Como ventaja fundamental se tiene que el espectro de carbono 13 proporciona información directa acerca los átomos de carbono que componen la molécula, lo que en 1 H-RMN se obtendría de forma indirecta. Además, el espectro de 13 C brinda información acerca de carbonilos y de átomos de carbono cuaternarios ESPECTROMETRÍA DE MASAS Está técnica se vale de la ionización de las moléculas a causa del bombardeo de la molécula con un haz de partículas de alta energía. Los electrones son el tipo de partícula más utilizada (ESPECTROMETRÍA DE IMPACTO ELECTRÓNICO). La ionización de la molécula genera un patrón de fragmentación característico que depende de la estructura química de la misma y sirve, por comparación con un patrón, para la identificación de la misma. Cada fragmento producido genera
  • 20. una señal cuya intensidad y ubicación depende de su abundancia relativa (% respecto del fragmento más abundante) y de su relación masa– carga, respectivamente. Una ventaja adicional, es que también puede obtenerse el peso molecular antes de conocer con certeza toda la estructura molecular (ver tutorial ANEXO). Por último, es importante mencionar que el análisis integrado de la información que proporcionan dos o más técnicas espectroscópicas es mucho más valioso que la información que brinda cada espectro por aparte para establecer de manera inequívoca la estructura de una molécula.
  • 21. CONCLUSION.- La obtención de imágenes utilizando principios de la Resonancia Magnética Nuclear ha sido ampliamente desarrollada en los últimos años debido principalmente a su utilidad médica, ya que es capaz de diferenciar tejidos con una resolución mayor en el caso de la tomografía computada, sin utilizar radiación ionizante, siendo de esta manera menos nociva para la salud del paciente. Pero no sólo se restringe su aplicación al campo de la medicina, también es plausible en un amplio rango de aplicaciones en investigación básica, así como en la industria. En un experimento de imágenes resulta natural pensar en contrastes. Esto surge de las variaciones de ciertos parámetros físicos que puede existir entre una región y otra dentro del objeto, generando así, variaciones en las intensidades de la señal que permite diferenciar distintas regiones en la imagen. Los parámetros físicos más comunes son: la densidad de espines , el tiempo de relajación longitudinal T1 y el tiempo de relajación transversal T2. En este trabajo se producirá un perfil unidimensional o imagen 1D, y se estudiará un nuevo parámetro de contraste generado por la destrucción de la magnetización producida por los campos locales presentes en ciertas muestras. En este caso se trabajó con una muestra de liposomas de dimiristoilfosfatidilcolina (DMPC). Para obtener esta imagen pesada por este nuevo parámetro se aplica previo a la secuencia de imágen, una secuencia de espín-lock, para diferentes.
  • 22. OBJETIVOGENERAL: Informar acerca del procedimiento, indicaciones, precauciones de la resonancia magnéticanuclear. OBJETIVOSESPECIFICOS -Exponer todo aquello sobre la resonancia magnética nuclear. -Mostrar su procedimiento, ventajas y desventajas, precauciones, etc.
  • 23. BIBLIOGRAFÍA -OTAMENDI, A ESTUDIOS DE FACTIBILIDAD DEL USO DE LA TÉCNICA DE RESONANCIA. -ALONSO,P.LA RESONANCIA PARAMAGNÉTICA, UNA TECNICA MULTIDICIPLINAR,ZARAGOSA 2002.