3. NA (primaria)
Prueba específica para pentosas. Una pentosa está formada por 5 átomos de carbono, por lo tanto
cuando se habla de una aldopentosa se hace referencia a un monosacárido que contiene 5 átomos
de carbono y puede contener también el grupo cetosis por el cual toma el nombre de cetohexosa.
Material
- 5 tubos de ensayo
- 1 gradilla
- 6 pipetas de 1ml
- 1 baño maría
Reactivos
- Reactivo de bencidina
- Carbohidratos al 1%
4. TECNICA
1. En un tubo de ensayo colocar o.5ml del reactivo de bencidina.
2. Añadir 1 o 2 gotas de solución de carbohidratos.
3. Calentar en agua hirviendo durante varios minutos, inmediatamente después enfriar con
agua.
5. 4. Si se forma un color rosa o roja la prueba es positiva.
La prueba resulo negativa en todos los tubos.
PRUEVA DE ANALINA
Esta prueba sirve para diferenciar las pentosas de los acidos uronicos y de las hexosas que no dan
la prueba.
Por deshidratación de las pentosas, se forman furfural, que reaccionan primero con una molécula
de anilina dando un compuesto que es una base deschiff, de poco color.
Dando también la prueba positiva los polisacáridos que por hidrolisis dan pentosas.
MATERIAL
- 5 tubos de ensayo
REACTIVOS
- Ácido acético glacial
6. - 1 gradilla
- 3 pipetas de 5ml
- 1 baño maría
- Anilina
- Carbohidratos al 1%
TECNICA
1- Colocar 1 ml de carbohidrato.
7. 2- Añadir 2ml de ácido acético glacial y 3 gotas de anilina.
3- Calentar a hervir a 1 minuto la coloración roja es positiva.
Esta prueba la dan positiva las pentosas pueden servir para diferenciar las pentosas de
ácido uronicos.
10. PRUEBA DE FEHLING
MATERIAL
5 tubos de ensayo
2 pipetas de 1 ml
1 mechero
REACTIVOS
Fehling “A”
Fehling “B”
Carbohidratos al 1%
11. TÉCNICA
1. Colocar en un tubo de ensayo 1 ml de carbohidratos.
2. Añadir 1 ml de Fehling “A” y 1 ml de Fehling “B”.
3. Mezclar bien y ponerlo a baño maría o en la flama del mechero durante cierto tiempo.
4. Sí se mira a marrón o rojo la prueba es positiva.
12. Esta prueba es una reacción de oxido-reducción, los alcoholes del azúcar se oxidan a aldehídos
y ácidos, el cobre se reduce de cúprico a cuproso por eso cambia de color la solución y se forma el
precipitado.
PRUEBA DE BENEDICT
MATERIAL REACTIVOS
5 tubos de ensayo Reactivo de Benedict
6 pipetas de 5 ml Carbohidratos de 1%
1 gradilla
1 baño maría
TÉCNICA
1. Colocar en varios tubos de ensayo 1 ml de solución de Benedict
2. Añadir 3 gotas de cada solución de carbohidratos en cada tubo.
13. 3. Agitar y colocar los tubos al mismo tiempo en agua hirviendo durante 3 minutos.
4. Enfriar la solución y hacer comparaciones.
5. Obsérvese el precipitado formado. Un cambio de color NO indica reacción positiva, solo el
precipitado.
NOTA: Deberán darse los resultados comparativos de las 3 pruebas de azúcares reductores.
N=Negativo
P=Positivo
PRACTICA
CARBOHIDRATO
1 2 3 4 5 6 7 8 9
TOLLENS P P P P P P P P P
FEHLING P P P P P N P P P
BENEDICT N N N P P P P P P
14. PRUEBA DEL ÁCIDO PICRICO
2, 4,6 TRINITROFENOL
Se puede obtener, pero con mal rendimiento, por acción de la mezcla sulfónica sobre fenol.
Se obtiene mejor la acción sucesiva de los ácidos sulfúricos y nítricos.
O por
nitración de
coloro
benceno,
hidrólisis de
nitrito cloro
benceno
obtenido a
dinitrofenol, y
después nitración de este por mezcla sulfonítrica.
El
ácido
pícrico es
un sólido
cristalizado,
amarillo
pálido (p.f.
122°C), un
poco
soluble en agua, con sabor amargo (picros-amarillo)
Su descomposición explosiva, desencadena por un detonador (fulminante de mercurio) lo
hace útil como explosivo (melenita), si bien tiene el inconveniente de corroer el alma del cañón por
su carácter ácido, por lo que tiene más empleo en bombas de aviación.
El ácido pícrico es un ácido relativamente fuerte que ataca los metales dando picratos
metálicos muy inestables y explosivos, lo que requiere proteger el acero de abuses con un barniz o
vidriados.
Los picratos de amonio C6H2(NO2)3(ONH4) y de potasio, son pocos solubles en agua.
El picrato de amonio se utiliza como explosivo. El ácido pícrico se emplea para teñir de amarillo
la lana, como reactivo de alcaloides y proteínas (investigación de albúminas en líquidos biológicos:
reactivo de Esboch).
El ácido pícrico, como otros nitrofenoles, existe en dos formas: la normal que da cristales
cuando se cristaliza la ligroína.
15. Y la ací, que da soluciones amarillas en agua y cristales amarillos de esta solución,
especialmente si es alcalina.
Así el 2,4, dinitrofenol se utiliza como indicador del pH en la
escala de Michaelis, debido a la mayor intensidad de coloración amarilla que presenta una solución
según variaciones pH del medio, se utiliza también para adelgazar, pero su empleo es muy delicado,
debido a su toxicidad.
El grupo aldehído le da característica reductora a monosacáridos.
El grupo aldehído de las aldohexosas se oxida con facilidad el carboxílico correspondiente.
Esto sucede con un pH neutro o poco alcalino, empleando agentes oxidantes o enzimas.
El ácido monocarboxílico que se produce se conoce con el nombre de ácido aldónico (a partir
de galactosa). En presencia de este agente oxidante se oxidan tanto el grupo aldehídico como la
función alcohólica primaria.
16. MATERIAL REACTIVOS
6 pipetas de 5 ml Ácido pícrico saturado
1 pipeta de 1 ml Carbonato de sodios al 10%
1 gradilla Carbohidratos al 1%
1 baño maría
5 tubos de ensayo
TÉCNICA
1. A 3 ml de solución de carbohidratos añadir 1 ml de solución saturada de ácido pícrico.
2. Agregar 0.5 ml de solución de carbonato de sodio al 10%.
3. Calentar en agua hirviendo durante 1.5 minutos.
17. Un color café denota prueba positiva.
RESULTADOS Y OBSERVACIONES
PRACTICA CARBOHIDRATOS 1 2 3 4 5 6 7 8 9
TRINITROFENOL
ANILINA
TOLLENS
FEHLING P P N P P P N P P
BENEDICT P P P P P N P P P
ACIDO PICRICO N N N N N P P P P
N=Negativo
P=Positivo
18. 1: Galactosa
2: Dextrosa
3: Manosa
4: Maltosa
5: Arabinosa
6: Miel
7: Ribosa Mininum
8: Fructosa
9: Xilosa
CONCLUSIONES DE LA PRUEBA FEHLING
los resultados positivos que se dieron fueron porque reaccionan principalmente con los aldehídos
porque tienen un grupo carbonilo más expuesto, que le da el carácter reductor, y existe la
presencia del precipitado rojo ladrillo (oxido cuproso). La fructosa cuya estructura es una cetosa
característica alfa-hidroxi-cetonicos, que al reaccionar con Fehing da un resultado positivo.
CUESTIONARIO
1. Escribe las formulas de los carbohidratos utilizados en la práctica.
1: Galactosa C6H12O6
2: Dextrosa C6H12O6
3: Manosa C6H12O6
4: Maltosa C12H22O11
5: Arabinosa C5H10O5
6: Miel C12H22O11 → C6H12O6 + C6H12O6
7: Ribosa Mininum C5H10O5
8: Fructosa C6H12O6
9: Xilosa C5H10O5
2. ¿Qué es un azúcar reductor?
Es todo azúcar con un grupo carbonilo en su estructura, el cual puede funcionar como
aldehído o cetona según su ubicación en dicha estructura. Se llaman azucares
reductores porque poseen la capacidad de reducir otros compuestos gracias a la alta
reactividad del doble enlace del oxígeno. Es un término químico para un azúcar que
actúa como agente reductor y puede donar electrones a otra molécula.
3. ¿Qué usos tiene el reactivo de Fehling?
Se caracteriza fundamentalmente por su utilización como reactivo para la determinación
de azucares reductores es decir demostrar la presencia de glucosa o sus derivados
19. como la sacarosa o la fructosa, también se le conoce como licor de Fehling.
4. Explica por el yodo da coloración azul marino, con el almidón.
Se debe a que en esta reacción el yodo entra a la estructura helicoidal del almidón, es
decir, que los átomos de yodo se introducen entre las espirales provocando la absorción
o fijación de yodo en las moléculas del almidón (amilosa).
5. ¿Qué importancia farmacológica, tiene el identificar los carbohidratos?
Los Carbohidratos son importantes porque ayudan a obtener energía al menor precio
para el cuerpo, obtienes más moléculas de CO2 y H2O sin necesidad de invertir tanta
energía ATP´s para lograrlo como lo hicieras con las grasas.
Por lo tanto, los hidratos de carbono te dan suficiente energía para levantarte después de
un día agotador.
CONCLUSIONES
En estas practica observamos diferentes reacciones químicas en los carbohidratos. En tres
pruebas observamos cuales carbohidratos son azucares reductores. También pusimos en práctica
nuestros fundamentos teóricos acerca de los objetivos de cada practica.
BIBLIOGRAFIAS
Bioquímica II
http://bioquimicaii.foroblog.net/t25-que-es-un-azucar-reductor.
REACCIÓN DE FEHLING
https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/carbohidratos/reaccion-de-fehling.
¿Cuál es la importancia farmacológica de los hidratos de carbono?
https://mx.answers.yahoo.com/question/index?qid=20081010105545AAkEf5F.
PRUEBA DEL ALMIDON
https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/prueba-del-almidon.