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Manuela Echavarría N
Susana Bustamante V
Introduction
People infected with HIV, are in a constant risk of various opportunistic infections,
especially Staphylococci which is one of the most important pathogens responsible
of a lot of cases of bacteremia, where is also involved the coagulase negative
staphylococci (CoNS), and drug resistance which is an other complication of these
people such as meticillin resistant S. aureus (MRSA).
Staphylococcus Aureus
Gram-positive bacterium.
Is a facultative anaerobe that can grow without the need for oxygen.
Is not always pathogenic, but it is a common cause of skin infections such as a skin abscess, respiratory infections such as
sinusitis, and food poisoning. Pathogenic strains often promote infections by producing virulence factors such as potent
protein toxins, and the expression of cell-surface proteins that bind and inactivate antibodies.
An estimated 20% of the human population are long-term carriers of S. aureus which can be found as part of the normal skin
flora.
The emergence of antibiotic-resistant strains of S. aureus such as methicillin-resistant S. aureus (MRSA) is a worldwide
problem in clinical medicine.
It is still one of the five most common causes of hospital-acquired infections and is often the cause of wound infections
following surgery.
Bacteremia
Bacteremia is the presence of viable bacteria in the circulating blood. When a bacteria enter to the bloodstream,
it may occur through a wound, infection, surgical procedure or injection. It may cause nothing or it may produce
fever and other symptoms of infections. It´s a potentially life-threatening condition because it can lead to septic
shock.
Symptoms:
● Fever
● Rapid heart rate
● Shaking chills
● Low blood pressure
● Rapid breathing
● Become confused when a probable sepsis or septic shock.
HIV
The human immunodeficiency virus (HIV) is a retrovirus (specifically lentivirus) that causes HIV infection
and over time acquired immunodeficiency syndrome (AIDS). AIDS is a condition in humans in which
progressive failure of the immune system allows life-threatening opportunistic infections and cancers to
thrive. Infection with HIV occurs by the transfer of blood, semen, vaginal fluid, pre-ejaculate, or breast milk.
HIV infects vital cells in the human immune system: helper T cells (specifically CD4+ T cells), macrophages,
and dendritic cells. HIV infection leads to low levels of CD4+ T cells through a number of mechanisms,
including apoptosis, direct viral killing of infected cells, and killing of infected CD4+ T cells by CD8 cytotoxic
lymphocytes. When CD4+ T cell numbers decline below a critical level, cell-mediated immunity is lost, and
the body becomes progressively more susceptible to opportunistic infections.
Relation
As HIV leads to the failure of the immune system (AIDS), the opportunistic
infections like staphylococcus aureus who can even be found in the skin and needs
few things to survive, takes advantage of the low immune system to colonize.
General Objective
The present study aimed at determining the species distribution and occurrence of
staphylococcal bacteremia in HIV – positive patients in Lagos, Nigeria.
Staphylococcal bloodstream infection in febrile HIV patients was investigated by
culture technique.
Materiales y métodos
Western blot:
Es una técnica por la cual se pueden identificar proteínas específicas en una mezcla compleja, como los
tejidos por ejemplo. Utiliza tres etapas para lograr esto: separación por tamaño, transferencia a un soporte
sólido y visualización mediante la marcación de proteínas con el uso de anticuerpos primarios o secundarios
apropiados.
Hemocultivo
Es un examen de laboratorio para verificar si hay bacterias u otros microbios en una muestra de sangre.
La muestra de sangre se envía al laboratorio y se coloca en cajas Petri junto a sustancias que favorecen la proliferación de los
microorganismos que pudieran estar presentes en ella. Posteriormente este recipiente se coloca en una incubadora en la que
permanece en condiciones de humedad y temperatura constantes y se espera el tiempo necesario para que los
microorganismos crezcan y pueda confirmarse su presencia y, por tanto, la existencia de una infección en el paciente del que
procede la muestra de sangre.
En algunos casos, las bacterias también pueden ser identificadas mediante técnicas de tinción de la muestra de sangre con
colorantes específicos que permiten su detección a través del microscopio. La más utilizada es la denominada tinción de Gram.
API
Consiste en una serie de métodos rápidos que permiten la identificación de microorganismos a través de la
realización de diferentes pruebas bioquímicas.
Estos sistemas consisten en un dispositivo de plástico con varios microtubos que contienen diferentes
medios de cultivo deshidratados o diferentes sustratos de enzimas de acuerdo al tipo de prueba que se
requiere montar. Entre algunas de las pruebas bioquímicas que pueden realizarse con estos sistemas están
las pruebas de fermentación de carbohidratos, la determinación de la producción de H2S, la determinación
de la hidrólisis de la gelatina, entre otras.
Antibiograma
Es una prueba utilizada para determinar la susceptibilidad (sensibilidad o resistencia) de una bacteria a un grupo de antibióticos.
Ampicillin, Gentamicin, Chloramphenicol, Amoxicillin Clavulanic acid, Erythromycin, Tetracycline, Cloxacillin, Vancomycin,
Trimethoprim-sulfamethoxazole, Oxacillin and Ciprofloxacin. Los antibióticos utilizados en el artículo.
PFGE
Consigue la separación de grandes fragmentos de DNA induciendo su reorientación mediante cambios
periódicos en el campo eléctrico, cuya duración determina el intervalo de tamaños que se pueden separar.
Los fragmentos se estiran y se orientan según la dirección de dicho campo. Luego se aplica un segundo
campo, perpendicular al anterior, lo que obliga a los fragmentos de DNA a relajarse, elongarse y alinearse de
acuerdo con este segundo campo eléctrico. El tiempo que se consume en esta reorientación depende del
tamaño de los fragmentos, tardando más los mayores.
Aplicando sucesivos cambios de campo eléctrico, se consigue la separación de los fragmentos en función de
su tamaño.
Población
86 pacientes con VIH/SIDA.
Con fiebre. Temperatura superior a 36,5-37 °C
Resultados
En el cultivo se encontraron 19 pacientes con crecimiento de Staphylococcus.
Resultados del antibiograma.
Resultados PFGE. Se sometieron a esta prueba, los 7 aislamientos de Staphylococcus aureus.
Se ven principalmente 5 patrones para las 7 muestras.
1 y 7 se muestran indistinguibles. Grupo A. Y la línea 2 corresponde al grupo B.
Y las muestras del grupo C son 2 (3 y 4), ya que hay un subtipo C1 que corresponde a la linea 4.
Discusión
● Vida sexual temprana probabilidad de adquirir VIH bacteremia,
● Asocian la S. aureus bacteremia entre personas HIV(+).
● Estudio 14% de los casos de bacteremia Stafilococo coagulasa negativos (patógeno normal en
sangre).
● 6-21% de las bacteremias polimicrobianas en individuos de alto riesgo.
● Hill y colaboradores 18,3% de S. aureus aislados responsables de los episodios
bacteriémicos investigados entre 871 pacientes hospitalizados, incluidos 36 individuos VIH positivos
del hospital urbano de África occidental.
● Pruebas de sensibilidad a antibióticos son para el tratamiento, (pacientes HIV (+))con CoNS, pero la
mayoria, mas de 3 fenotipos resistentes reservorios de genes resistentes a antibióticos = la
causa de infección de personas con HIV.
Discusión
● La resistencia a la meticilina, se explicó por la producción de la proteína de
unión a penicilina 2a gen mecA detectado por la PCR.
● PCR estudio estándar para el gen mecA, pero el método de agar salado
usado en el estudio, detección de resistencia y sensibilidad a meticilina.
● Significativa diversidad genética entre los 7 aislamientos = las cepas sensibles a
la meticilina de S. aureus menos probabilidades de estar relacionadas en
comparación con MRSA (evolucionan a partir de un # limitado de eventos
genéticos).
● 2 Aislados de S. aureus en el estudio patrones de PFGE y resistencia
similares, = origen común.
Tabla de autores
Autor Qué dijo ¿Se cumplió?
Rahman et al., 2013. “In contrast, we observed a
different spectrum of CoNS
but confirmed that CoNS
are common pathogens in
blood cultures”
Conclusiones
● HIV courses with many complications that affect life, especially by the decrease
of the immune system
● Opportunistic infections deteriorates the health status of HIV-positive
patients, as we can see it with Staphylococcus aureus in the study presented.
● Personal care behaviors play important role in surviving to the microorganisms
present in the environment ready to colonize the patient.
● Inappropriate use of antibiotics can lead to resistance, limiting treatment
options when they are needed because of an infection.
Mapas
Mapas
Referencias
Cardozo-Bernal AM, Ramón LF, Poutou-Piñales RA, Carrascal-Camacho AK, Zambrano DC (2013) Electroforesis en Gel
de Campo Pulsado (PFGE) para la diferenciación molecular de Listeria monocytogenes. Universitas Scientiarum 18(2):
203-222 doi: 10.11144/Javeriana.SC18-2.egcp.
Francisco Archundia Camacho Alfredo Ramírez Moran Heriberto Ramírez Morales INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL
HOSPITAL GENERAL DE ZONA No. 32 “VILLA COAPA” CARRERA PROFESIONAL T.L.C. INMUNOLOGIA Electroforesis en Campos
Pulsantes.
J. Willis Hurst, Medicina para la práctica clínica. Editorial Médica Panamericana, 4ª. Edición, 1998.

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  • 2. Introduction People infected with HIV, are in a constant risk of various opportunistic infections, especially Staphylococci which is one of the most important pathogens responsible of a lot of cases of bacteremia, where is also involved the coagulase negative staphylococci (CoNS), and drug resistance which is an other complication of these people such as meticillin resistant S. aureus (MRSA).
  • 3. Staphylococcus Aureus Gram-positive bacterium. Is a facultative anaerobe that can grow without the need for oxygen. Is not always pathogenic, but it is a common cause of skin infections such as a skin abscess, respiratory infections such as sinusitis, and food poisoning. Pathogenic strains often promote infections by producing virulence factors such as potent protein toxins, and the expression of cell-surface proteins that bind and inactivate antibodies. An estimated 20% of the human population are long-term carriers of S. aureus which can be found as part of the normal skin flora. The emergence of antibiotic-resistant strains of S. aureus such as methicillin-resistant S. aureus (MRSA) is a worldwide problem in clinical medicine. It is still one of the five most common causes of hospital-acquired infections and is often the cause of wound infections following surgery.
  • 4. Bacteremia Bacteremia is the presence of viable bacteria in the circulating blood. When a bacteria enter to the bloodstream, it may occur through a wound, infection, surgical procedure or injection. It may cause nothing or it may produce fever and other symptoms of infections. It´s a potentially life-threatening condition because it can lead to septic shock. Symptoms: ● Fever ● Rapid heart rate ● Shaking chills ● Low blood pressure ● Rapid breathing ● Become confused when a probable sepsis or septic shock.
  • 5. HIV The human immunodeficiency virus (HIV) is a retrovirus (specifically lentivirus) that causes HIV infection and over time acquired immunodeficiency syndrome (AIDS). AIDS is a condition in humans in which progressive failure of the immune system allows life-threatening opportunistic infections and cancers to thrive. Infection with HIV occurs by the transfer of blood, semen, vaginal fluid, pre-ejaculate, or breast milk. HIV infects vital cells in the human immune system: helper T cells (specifically CD4+ T cells), macrophages, and dendritic cells. HIV infection leads to low levels of CD4+ T cells through a number of mechanisms, including apoptosis, direct viral killing of infected cells, and killing of infected CD4+ T cells by CD8 cytotoxic lymphocytes. When CD4+ T cell numbers decline below a critical level, cell-mediated immunity is lost, and the body becomes progressively more susceptible to opportunistic infections.
  • 6. Relation As HIV leads to the failure of the immune system (AIDS), the opportunistic infections like staphylococcus aureus who can even be found in the skin and needs few things to survive, takes advantage of the low immune system to colonize.
  • 7. General Objective The present study aimed at determining the species distribution and occurrence of staphylococcal bacteremia in HIV – positive patients in Lagos, Nigeria. Staphylococcal bloodstream infection in febrile HIV patients was investigated by culture technique.
  • 8. Materiales y métodos Western blot: Es una técnica por la cual se pueden identificar proteínas específicas en una mezcla compleja, como los tejidos por ejemplo. Utiliza tres etapas para lograr esto: separación por tamaño, transferencia a un soporte sólido y visualización mediante la marcación de proteínas con el uso de anticuerpos primarios o secundarios apropiados.
  • 9. Hemocultivo Es un examen de laboratorio para verificar si hay bacterias u otros microbios en una muestra de sangre. La muestra de sangre se envía al laboratorio y se coloca en cajas Petri junto a sustancias que favorecen la proliferación de los microorganismos que pudieran estar presentes en ella. Posteriormente este recipiente se coloca en una incubadora en la que permanece en condiciones de humedad y temperatura constantes y se espera el tiempo necesario para que los microorganismos crezcan y pueda confirmarse su presencia y, por tanto, la existencia de una infección en el paciente del que procede la muestra de sangre. En algunos casos, las bacterias también pueden ser identificadas mediante técnicas de tinción de la muestra de sangre con colorantes específicos que permiten su detección a través del microscopio. La más utilizada es la denominada tinción de Gram.
  • 10. API Consiste en una serie de métodos rápidos que permiten la identificación de microorganismos a través de la realización de diferentes pruebas bioquímicas. Estos sistemas consisten en un dispositivo de plástico con varios microtubos que contienen diferentes medios de cultivo deshidratados o diferentes sustratos de enzimas de acuerdo al tipo de prueba que se requiere montar. Entre algunas de las pruebas bioquímicas que pueden realizarse con estos sistemas están las pruebas de fermentación de carbohidratos, la determinación de la producción de H2S, la determinación de la hidrólisis de la gelatina, entre otras.
  • 11. Antibiograma Es una prueba utilizada para determinar la susceptibilidad (sensibilidad o resistencia) de una bacteria a un grupo de antibióticos. Ampicillin, Gentamicin, Chloramphenicol, Amoxicillin Clavulanic acid, Erythromycin, Tetracycline, Cloxacillin, Vancomycin, Trimethoprim-sulfamethoxazole, Oxacillin and Ciprofloxacin. Los antibióticos utilizados en el artículo.
  • 12. PFGE Consigue la separación de grandes fragmentos de DNA induciendo su reorientación mediante cambios periódicos en el campo eléctrico, cuya duración determina el intervalo de tamaños que se pueden separar. Los fragmentos se estiran y se orientan según la dirección de dicho campo. Luego se aplica un segundo campo, perpendicular al anterior, lo que obliga a los fragmentos de DNA a relajarse, elongarse y alinearse de acuerdo con este segundo campo eléctrico. El tiempo que se consume en esta reorientación depende del tamaño de los fragmentos, tardando más los mayores. Aplicando sucesivos cambios de campo eléctrico, se consigue la separación de los fragmentos en función de su tamaño.
  • 13. Población 86 pacientes con VIH/SIDA. Con fiebre. Temperatura superior a 36,5-37 °C
  • 14. Resultados En el cultivo se encontraron 19 pacientes con crecimiento de Staphylococcus.
  • 16. Resultados PFGE. Se sometieron a esta prueba, los 7 aislamientos de Staphylococcus aureus. Se ven principalmente 5 patrones para las 7 muestras. 1 y 7 se muestran indistinguibles. Grupo A. Y la línea 2 corresponde al grupo B. Y las muestras del grupo C son 2 (3 y 4), ya que hay un subtipo C1 que corresponde a la linea 4.
  • 17. Discusión ● Vida sexual temprana probabilidad de adquirir VIH bacteremia, ● Asocian la S. aureus bacteremia entre personas HIV(+). ● Estudio 14% de los casos de bacteremia Stafilococo coagulasa negativos (patógeno normal en sangre). ● 6-21% de las bacteremias polimicrobianas en individuos de alto riesgo. ● Hill y colaboradores 18,3% de S. aureus aislados responsables de los episodios bacteriémicos investigados entre 871 pacientes hospitalizados, incluidos 36 individuos VIH positivos del hospital urbano de África occidental. ● Pruebas de sensibilidad a antibióticos son para el tratamiento, (pacientes HIV (+))con CoNS, pero la mayoria, mas de 3 fenotipos resistentes reservorios de genes resistentes a antibióticos = la causa de infección de personas con HIV.
  • 18. Discusión ● La resistencia a la meticilina, se explicó por la producción de la proteína de unión a penicilina 2a gen mecA detectado por la PCR. ● PCR estudio estándar para el gen mecA, pero el método de agar salado usado en el estudio, detección de resistencia y sensibilidad a meticilina. ● Significativa diversidad genética entre los 7 aislamientos = las cepas sensibles a la meticilina de S. aureus menos probabilidades de estar relacionadas en comparación con MRSA (evolucionan a partir de un # limitado de eventos genéticos). ● 2 Aislados de S. aureus en el estudio patrones de PFGE y resistencia similares, = origen común.
  • 19. Tabla de autores Autor Qué dijo ¿Se cumplió? Rahman et al., 2013. “In contrast, we observed a different spectrum of CoNS but confirmed that CoNS are common pathogens in blood cultures”
  • 20. Conclusiones ● HIV courses with many complications that affect life, especially by the decrease of the immune system ● Opportunistic infections deteriorates the health status of HIV-positive patients, as we can see it with Staphylococcus aureus in the study presented. ● Personal care behaviors play important role in surviving to the microorganisms present in the environment ready to colonize the patient. ● Inappropriate use of antibiotics can lead to resistance, limiting treatment options when they are needed because of an infection.
  • 21. Mapas
  • 22. Mapas
  • 23. Referencias Cardozo-Bernal AM, Ramón LF, Poutou-Piñales RA, Carrascal-Camacho AK, Zambrano DC (2013) Electroforesis en Gel de Campo Pulsado (PFGE) para la diferenciación molecular de Listeria monocytogenes. Universitas Scientiarum 18(2): 203-222 doi: 10.11144/Javeriana.SC18-2.egcp. Francisco Archundia Camacho Alfredo Ramírez Moran Heriberto Ramírez Morales INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL HOSPITAL GENERAL DE ZONA No. 32 “VILLA COAPA” CARRERA PROFESIONAL T.L.C. INMUNOLOGIA Electroforesis en Campos Pulsantes. J. Willis Hurst, Medicina para la práctica clínica. Editorial Médica Panamericana, 4ª. Edición, 1998.