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CULTIVO CELULAR
Y VACUNAS
Andrea Flórez Martínez
Wolfang Rodríguez
Victor Hugo Grande López
Universidad INCCA de Colombia
Programa de biología
Cultivos de celular
in vitro
Equipo básico de laboratorio
Aplicaciones en el área del
cultivo celular
• Actividad intracelular
• Flujo intracelular
• Ecología celular
• Interacciones celulares
Tipos de estudios a nivel celular
Para sintetizar
Estudios virológicos
Producción de vacunas
Ingeniería de proteínas
Estudios de interacción
Producción de trasplantes
Ensayo de medicamentos
Estudio de toxinas
Tipos de cultivos celulares
Monocapa Suspensión
• Significa que las células se
adherirán al sustrato y en esa
forma inician la proliferación.
Muchas líneas celulares son
anclaje-dependientes, es decir,
no inician la proliferación hasta
que se han adherido al sustrato.
Ej., este método es utilizado para
la mayoría de células, excepto
las hematopoyéticas
• Las células se encuentran
dispersas en el medio de cultivo.
Su crecimiento no depende de
un anclaje. Alcanzan la
confluencia cuando el numero
de células es grande y los
nutrientes son insuficientes: Ej.
Las células hematopoyéticas
células madre, líneas celulares
transformadas o tumorales
Modalidades de cultivo
Cultivo de órganos Cultivo a partir de
células disociadas
Cultivo de explantes Cultivo de organotípico
Cultivo de órganos
• Se cultiva el órgano en sobre un rejilla
situada en un interface liquido-
gaseosa de un medio que obtiene los
nutrientes y al que puede liberar los
desechos.
• Esto permite mantener la arquitectura
característica del tejido “in vivo”
• Permite mantener los tipos celulares
diferenciados
• No permite propagación ni
crecimiento
• El crecimiento solo se produce a la
periferia d
• La falta de propagación tiene como
consecuencia repetir el experimento y
se necesite nuevo material, lo que
produce cierta heterogeneidad de las
muestras
• Constituidos por pequeños fragmentos de tejidos u órganos que se
adhieren a una superficie donde generalmente las células crecen
hacia la periferia
• Son de gran utilidad para pequeñas cantidades de tejidos como
biopsias de piel
Cultivos organotípicos
• Constan de varios tipos celulares
que interaccionan entre si de
una forma que que intenta
parecerse lo mas posible a la
original el objetivo final de es
tipo de cultivos es la creación in
vitro de tejidos u órganos
completamente funcionales que
puedan ser utilizados en injertos
o en transplantes.
Explantes primarios
• Se coloca un fragmento de tejido en la interface solido-liquido de un
soporte de vidrio o plástico.
• Las células se adhieren a la superficie y las células de la periferia del
explante migran y proliferan sobre la superficie del soporte
Cultivos organotípicos
• Permiten el crecimiento in vitro de
tejidos que logran replicar parte de
su normal fisiología y función
• Constituyen poderosas
herramientas para la investigación
dermatologías validando
importantes mecanismos
patológicos para el testeo de
drogas terapéuticas
Aplicaciones
• Estudios de diferenciación
celular
• Estudios de patogénesis
• Patogénesis microbiana
• Análisis de agentes s
terapéuticos
• Sistema que permite manipular
las células de partida
Cultivos organotípicos
Ventajas
• Fácil implementación en laboratorios
estándares
• Protocolos de tallados de fácil acceso
• Permite el estudio de mecanismos
complejos que tienen lugar en células
in vivo en un contexto fisiológico
• Pueden utilizarse células manipuladas
genéticamente
• Permiten el screening de potenciales
drogas
Desventajas
• Representan solo una parte de la
organización y función normal
• No permite reproducir repuestas
sistémicas completas con las
cicatrización de heridas
• El tamaño de los cultivos individuales
se ve limitado por la ineficiente
difusión de nutrientes
• Los resultados obtenidos necesitan se
validados a partir de ensayos en
tejidos in vivo
Diferentes tipos de cultivos
• Primario: iniciando a partir de las células, tejidos u órganos tomados
directamente de un organismo
• Líneas celulares: se origina de l cultivo primario a partir del primer
cultivo exitoso
• Línea celular continua: las células que han logrado sobrevivir a muchos
sub-cultivos
Cultivo celular primario
• Estas se pueden obtener a partir
de cualquier tipo de tejido, pero
dan mejor resultados si se
obtienen de tejidos
embrionarios o tumorales
debido a su grado de
diferenciación es menor y a su
capacidad de mayor división
• Se pueden hacer a partir de
explantes primarios o de
suspensiones de células
disgregadas
• Disgregación celular: se pierden
las interacciones célula-célula de
la célula con la matriz celular
• Papaces de proliferar
• Los cultivos celulares pueden ser obtenidos a partir de explantes o
biopsias (órgano o tejido), por perfusión de un órgano especifico, por
disgregación de tejidos o a partir de fluidos orgánicos como la sangre
Cultivo primario
Cultivos en Monocapa
• Células que crecen adheridas sobre
un soporte solido (plástico o
vidrio). El anclaje al sustrato es un
prerrequisito para la proliferación
celular
Cultivos en suspensión
• Las células se encuentran en
suspensión dispersas en el medio, y
su crecimiento no depende de un
anclaje, por lo que este tipo de
cultivo se restringe a las células
hematopoyéticas, células madre,
líneas celulares transformadas y
células tumorales
Cultivo primario: Monocapa
• Sub-cultivo por tripsinización (degradan la matriz extracelular o por
arrastre mecánico (raspadores)
Tripnización
Cambios de medio de cultivo
• El objetivo de los cambios de medio es
renovar los nutrientes y evitar la
acumulación de productos metabólicos
potencialmente tóxicos y de células
muertas.
• Cultivos en suspensión (centrifugación)
• Cultivos adherentes (aspiración)
Pase de células
• Es transferir un pequeño numero de células a un nuevo contenedor
las células puede cultivarse por mas tiempo si se pasan regularmente
ya que si se evita la senescencia asociada a situaciones prolongadas
de alta densidad celular
• Cultivos en suspensión ( se toman unas pocas y se re-suspenden en
un cultivo fresco
• Cultivos adherentes (despegar y pasar)
Hayflick & Moorehead
• Estudiaron el potencial del
crecimiento celular embrionario
humano y comprobaron que las
células podían crecer mediante
sub-cultivos repetidos, durante
unas 50 generaciones.
• Pasado este tiempo las células
entran en senescencias y pierden
la capacidad de dividirse. Por lo
tanto las cellas tiene una
capacidad finita de divisiones
mitóticas y es número se
denomina limite de Hayflick
Líneas celulares establecidas o continuas
Transformación de línea celular
• Forma espontanea (exposición a radiaciones ionizantes o a
carcinógenos químico)
• Inducida (infección vírica o transfección de ADN)
• Células tumorígenas (inmortales)
• Células tumorígenas: deben ser transformadas a líneas estables
Concepto ce cepa celular
• Una cepa celular deriva tanto
de un cultivo primario como de
una línea celular por la
selección o clonado de células
que tienen propiedades o
marcadores específicos.
• Estas propiedades o marcadores
deben persistir en cultivos
subsecuentes.
• Con los sucesivos pasajes o sub-
cultivos, un cultivo primario forma una
línea celular. Este termino implica la
presencia de varios linajes celulares de
fenotipos similares o distintos
• Así al seleccionar uno de los linajes
celulares por clonado o por separación
celular física o por cualquier otra
técnica de selección, para tener ciertas
propiedades especificas que han sido
identificadas en la masa de las células
de cultivo esta línea celular se
transforma en lo que se conoce como
cepa celular (Cell strain)
Designación de líneas celulares
Líneas celulares finitas
Líneas celulares infinitas
Algunas líneas celulares
Raw 264.7 Vero Adipocitos 3T3
He La: primera línea celular continua
He La
Bancos de colecciones de líneas celulares
• Líneas celulares frecuentemente mas utilizadas:
• Las dos colecciones o bancos de líneas celulares mas importantes:
• American Type Culture Collection (ATCC)
• European Colletion of Cell Culture (ECACC)
Ventajas y desventajas del cultivo In vitro
celular
Ventajas
• Permiten un control preciso y
fino del medio ambiente
• Caracterización y homogeneidad
de la muestra
• Economía
• Bioética
• Desventajas
• Técnicas sensibles
• Cantidad y coste
• Inestabilidad
• Desdinfericiación e identificación
de las células
• Validez del modelo in vitro
Vacunas
¿Que es una vacuna?
• Una vacuna es cualquier
preparación cuya función es la de
generar del organismo inmunidad
frente a una determinada
enfermedad, estimulándolo para
que produzca anticuerpos que
luego actuarán protegiéndolo
frente a futuras infecciones
¿Que es una vacunación?
Fuente: https://www.sanitas.es/sanitas/seguros/es/particulares/biblioteca-de-salud/prevencion-salud/importancia-vacunas/index.html
Las vacunas reducen las incidencias de
enfermedades altamente transmisibles
Las vacunas reducen las incidencias de
enfermedades altamente transmisibles
El Programa de Erradicación de la
Viruela (1966-1980)
• La OMS celebra el 40° aniversario de la
erradicación de la viruela
Consecuencias de campañas anti-vacunas
• La pobreza y conflictos sociales en las regiones africana, así como el
avance de los movimiento anti-vacunas en los países desarrollados han
provocado que esta enfermedad genere brotes cada vez mas grades en el
mundo.
Desarrollo de las vacunas en el tiempo
Tifoidea 1884 105 años 1989
Polio
Sarampión
Rotavirus
1908 47 años 1955
1953 42 años 1995
1973 26 años 1998
SARS-Cov-2 2019 1 año 2020
Desarrollo de una vacuna: pre-clínica
• Uso de información previa de
los pandemias anteriores
Cultivos celulares
Modelos animales
5 – 10 años
6 – 9 meses
SARS-Cov-2
Otras vacunas
Desarrollo de una vacuna: etapa clínica
Otras vacunas
SARS-Cov-2
VACUNAS CREADAS A PARTIR DE CEPAS CELULARES HUMANAS
ALGO DE HISTORIA
desde finales del siglo XIX, cuando se establecieron las
granjas de vacunas para recolectar virus de viruela vacuna
por medio de terneros
a lo largo de la primera mitad del siglo XX, la mayoría de las
vacunas seguirían creándose con la ayuda de los animales,
ya fuera cultivando patógenos en animales vivos o utilizando
células animales
A mediados del siglo XX, las vacunas de la Polio fueron
hechas con células de mono y se descubrió que contenían
un virus llamado SV40, o virus símico 40 (afortunadamente,
se descubrió que el virus no era nocivo para los humanos).
cuando la creación de las vacunas se realiza empleando productos animales, y no animales
vivos se puede alterar o incluso suspender el desarrollo de la vacuna si disminuyen los
productos animales
las vacunas contra la influenza se pueden producir con más rapidez a partir de cultivos
celulares, a diferencia del uso de huevos de pollo embrionados. es más sencillo disponer
de cultivos celulares que de huevos de pollo.
Al usar cultivos y líneas celulares, los investigadores pueden cultivar patógenos humanos,
como virus, en un tipo de célula en particular, y así atenuarlos o debilitarlos
Una manera de adaptar los virus para usarlos en las vacunas es alterándolos, para que no
puedan crecer correctamente en el cuerpo humano
VACUNAS CREADAS A PARTIR DE CEPAS CELULARES
HUMANAS
La primera vacuna creada a partir de cepas celulares humanas fue la de la rubéola, cuyo
descubridor fue Stanley Plotkin del Instituto Wistar de Filadelfia
Después de un aborto de este tipo, se enviaba el feto al laboratorio que Plotkin
había designado para investigar la rubéola. Al realizar exámenes al riñón del feto,
Plotkin encontró y aisló el virus de la rubéola
Por separado, Leonard Hayflick (quien trabajaba en el Instituto Wistar en esa época)
desarrolló una cepa celular usando las células del pulmón de un feto abortado. Muchos
virus, se desarrollaban bien en la cepa celular resultante. Finalmente, la cepa recibió el
nombre de WI-38.
• el virus se desarrollaba mal a una temperatura corporal normal
(Plotkin eligió el criterio de la baja temperatura después de
pruebas previas con atenuación de poliovirus).
Plotkin cultivó el virus de la
rubéola aislado en células
de WI-38 mantenidas a 86
°F (30 °C)
• A finales de la década de 1960 surgieron inquietudes sobre la
vacuna, creada con una línea celular humana, y su posible
contaminación con otros patógenos, aunque estas inquietudes
no parecían tener pruebas documentadas como respaldo.
• la vacuna de Plotkin obtuvo autorización oficial en Estados
Unidos en 1979, y reemplazó al componente de la vacuna
contra la rubéola que se había utilizado anteriormente en la
vacuna conjugada MMR
Son varias las vacunas que se utilizan para la inmunización del hombre pero se
les puede clasificar en tres tipos
las obtenidas del tejido nervioso
de animales adultos ovejas cabras
y conejos o animales recién
nacidos conejos ratas ratones
las obtenidas de tejidos de ave
embriones de pato
las preparadas en cultivos
celulares sepas de células
diploides humanas y cultivos
celulares de animales
VACUNAS ACTUALES QUE SE CREAN EMPLEANDO CEPAS
CELULARES HUMANAS
Se han utilizado dos cepas celulares humanas principales para crear algunas
vacunas disponibles actualmente, y en cada caso con las células fetales
originales, obtenidas en la década de 1960
Las siguientes vacunas se crearon con las cepas celulares WI-38 o MRC-5
Vacunas contra la hepatitis A
Vacuna contra la rubéola
Vacuna contra la varicela
Vacuna contra el herpes (zóster)
Vacuna oral contra el adenovirus tipo 4 y tipo 7
Vacuna contra la rabia
una alta pero finita capacidad de multiplicación in vitro.
capacidad de multiplicarse indefinidamente in vitro,
manteniendo sus características intactas y sin sufrir alteraciones con los sucesivos pases.
Ser susceptible de ser escalada para
producción industrial en biorreactores.
Demostrarse segura, libre de otros patógenos
UNA LINEA CELULAR PARA PRODUCIR VACUNAS DEBE:
Poder ser infectada con el virus de interés Crecimiento rápido
para que una cepa puede utilizarse en la producción del virus ha de
satisfacer requisitos básicos
1. las cepas se debe de comportar de manera uniforme cuando es
inoculan determinado sustratos celulares y suscitar una respuesta
satisfactoria cuando se inocula animales de laboratorio
2.la cepa ha de ser neutralizada por el suero antirrábico
3.la cepa ha de haber sido purificada en placas en sustratos
celulares aceptados Y deberán ser registrados en condiciones
experimentales específicos
4.es preciso que la composicion antigenica del virus de siembra
quede bien caracterizado mediante un juego de anticuerpos
monoclonales.
ESTUDIO DE EFECTIVIDAD DE LA VACUNA
CONTRA ROTAVIRUS EN EL SALVADOR
(RESULTADO PRELIMINARES)
ROTAVIRUS
• Se transmiten por vía fecal-oral & fomites.
P.V.R. Sobreviven al entorno ácido del
estómago después de una comida.
• La replicación vírica se lleva acabo tras la
absorción en las células epiteliales en el
intestino delgado.
• I. rotavirus impide absorción de agua,
provocando diarrea líquida. NSP4
• Perdida excesiva de líquidos y electrolitos
puede generar una deshidratación grave, e
incluso la muerte.
• Durante la enfermedad se eliminan hasta
10°10 partículas víricas por gramo de heces
por lo que se fomenta su diseminación.
• Causan principalmente gastroenteritis.
• Periodo de incubación de diarrea asociada a
rotavirus es de 48 horas.
• Síntomas principales son: vómitos, diarrea, fiebre y
deshidratación.
• Generalmente es de resolución espontanea y sin
secuelas.
• Transmisión Vía oral-fecal: comida, agua,
superficies
• Epidémico en Hogares infantiles
• Incubación de 2 días
• En países estacionales se dan picos epidémicos en
Noviembre y Abril
• Síntomas: Incluye diarrea acuosa, Vómito, Fiebre
alta, Síntomas respiratorios, Deshidratación
Población :
Menores de cinco
años : Área
Geográfica:
Densidad
poblacional:
Departamentos:
Municipios
Red de Hospitales:
Unidades de Salud
6 millones de habitantes
500,000
21,000 km ²
273 /km ²
14
262
30
76
30
376
TENDENCIA DE LAS DIARREAS EN MENORES DE
CINCO AÑOS EN EL SALVADOR
BROTE DE DIARREA EN EL 2005
ROTAVIRUS EN EL SALVADOR
Estudios
1985, se describe circulación (Navarro E.)
2000‐2002, un brote, vigilancia y estimaciones de la
enfermedad (Guardado J)
2004‐2005, Epidemiología, características clínicas, carga y
costos de la enfermedad rotaviral (Flores C)
2006, Implementación de Vigilancia centinela de rotavirus
OBJETIVOS DE LA VIGILANCIA
Conocer la epidemiología de las diarreas por rotavirus
Disponer de datos para evaluar la carga de morbilidad
y mortalidad de la enfermedad
Aplicar medidas de control necesarias
Evaluar el impacto de la vacuna
VIGILANCIA CENTINELA DE ROTAVIRUS, EL SALVADOR
2006‐2008
Toma de muestra a paciente hospitalizado que cumpla
definición de caso sospechoso
Periodo de muestreo: todo el año
Numero de muestras: de acuerdo a cumplimiento de
definición de caso
2006: ESTABLECIMIENTO DE VIGILANCIA
CENTINELA
COMPORTAMIENTO DE LOS INGRESOS POR DIARREA EN < DE CINCO
AÑOS ATENDIDOS EN SITIOS CENTINELAS, EL SALVADOR, 2006 - 2009
 Introducción de la vacuna el 1 Octubre2006
 Se adquirieron 160,000 dosis de vacunas
 Inversion U$2,000,000
Introduccion de Vacuna contra
Rotavirus
Métodos
Estudio de casos y controles
3 controles por caso
Periodo del estudio: enero 2007 a junio de 2009
Utilización de escala de Vesikari para evaluación de severidad de la
enfermedad
Regresión logística
Efectividad e impacto de la vacuna
monovalente de rotavirus en El Salvador
Hospitalizaciones por diarrea y casos positivos a rotavirus en los 7
hospitales centinelas, El Salvador, enero - abril 2006 - 2009
Resultados
323 controles y 969 casos
Efectividad de 2 dosis de vacuna en un 76% (IC 95% 64-84%)
Escala de Vesikari
Efectividad en el 73% (IC 95% 56-84) en casos de diarrea
con score ≥ 11 puntos
Efectividad en el 83% (IC 95% 52-94) en casos de diarrea
con score ≥ 15 puntos
Se identifico G1P[8] en el 92%
Conclusiones
Alta efectividad de la vacuna monovalente de
rotavirus
Disminución de hospitalización de casos
severos
No registro de muertes asociados a rotavirus en
los últimos 2 años
Controversias Tratamientos contra el covid-19: ¿usan
células y tejidos de fetos abortados?
Especialista en salud pública dice que ciertas líneas celulares
derivadas de fetos abortados han sido utilizadas en la
elaboración de anticuerpos y vacunas .
un coctel de anticuerpos monoclonales llamado REGN-COV2,
fabricado por la compañía farmacéutica estadounidense
Regeneron.
En medio de todo esto, los grupos religiosos y contra el aborto
en Estados Unidos y Canadá han argumentado razones
éticas para rechazar el uso de ciertas vacunas que están en
pleno desarrollo por ser fabricadas con derivados de células
de fetos
Uso de células del riñón de un embrión
abortado
• Todo empezó a inicios de la década de los setenta en Leiden,
Holanda, cuando el laboratorio del científico Alex Vander -eb
buscaba producir una línea de células que pudiesen ser usadas en
la fabricación de proteínas.
• Después de 293 experimentos
• La letra H viene de la palabra humano, la E de embrionario, la K de
la palabra para riñón en inglés, kidney. Y 293 viene de la
numeración de los experimentos de Graham.
• HEK 293 significa entonces “células fetales de riñón humano
logradas en el experimento 293”.
Células de la retina de un feto abortado
• Tomaron estas líneas celulares sin el permiso de la paciente
Henrietta Lacks en los años cincuenta.
• Otra línea celular, llamada PER.C6, derivada de células de la
retina de un feto abortado a mediados de la década de los
ochenta en el mismo laboratorio del Dr. Van der Eb, está siendo
usada en el desarrollo de la vacuna del laboratorio Johnson &
Johnson.
• Esas líneas celulares no son células madre, ni células fetales, ni
embrionarias; son células epiteliales inmortales que tienen casi
50 años de vida.
contra COVID-19?
• ¿se trata de muertes causadas realmente por las
vacunas?
• ¿Pueden tener efectos secundarios mortales?
• ¿son las vacunas la solución contra el coronavirus, o
representan un problema más?
• ¿Son todas las vacunas peligrosas para la salud?
DW verifica: ¿hubo muertes por vacunas
contra COVID-19?
• Sin embargo, un sondeo de la Universidad de Erfurt, en Alemania, muestra
que solo un 56 por ciento de los encuestados están dispuestos a
vacunarse. Y un 44 por ciento es más bien escéptico al respecto.
• Alemania, Francia, España e Italia se unieron este lunes (15.03.2021) a
una lista creciente de países que han suspendido el uso de esta
vacuna. La Agencia Europea del Medicamento (EMA) ha identificado
hasta el momento una treintena de casos de trombosis tras una dosis de
la vacuna de AstraZeneca.
¿Hubo alguna muerte por las vacunas? En
esta verificación de datos de DW, hasta el
15 de marzo de 2021, analizamos informes
de ocho países:
• el rastreador global de vacunas de
Bloomberg informaba que se han administrado más de 330
millones de vacunas contra el coronavirus en más de 120
países, unos ocho millones de dosis por día.
• Alemania: ¿"Muertos tras vacunarse contra el
coronavirus"?
Controversia por muertes en Alemania….
• EL PEI es la autoridad nacional alemana responsable de la
aprobación de vacunas y de seguridad en biomedicina. Los
fallecidos tenían 84 años en promedio, y el deceso se produjo
en un lapso de una hora y 19 días luego de la vacunación…….
informó el PEI en un estudio que incluía los casos de
fallecimiento luego de una vacunación hasta el 31 de enero de
2021.
• "De seguro, no se trata de un gran número de fallecimientos, y
por eso también se puede decir que esas muertes no tienen
nada que ver con la vacuna”, añadió.
• En otro caso de tres personas muertas en Colonia,
Alemania, la Fiscalía está investigando qué sucedió. Luego
de recibir la vacuna contra COVID-19, tres personas de la
tercera edad fallecieron. Los tres sufrían de enfermedades
previas graves, según detalló Markus Rothschild, director
del Centro de Medicina Legal de Colonia.
• El fiscal general Ulrich Bremer dijo a DW que "no hay
sospechas ni contra los médicos ni contra el personal de
salud”, y que todavía se están elaborando los protocolos de
obducción, así como el informe de los peritos médicos.
Controversia por muertes en
Alemania….
Austria: ¿"Enfermera muere luego de ser
vacunada contra el coronavirus"?
• Dos casos saltaron a los titulares en Austria: la muerte de una
enfermera de 49 años como consecuencia de una
coagulopatía y el deceso de otra mujer luego de recibir la
vacuna, debido a una embolia pulmonar.
• El PRAC continúa investigando problemas potenciales con el
lote vacunado en Austria y revisando los sucesos
tromboembólicos (30 en 5 millones de vacunados en la UE,
según datos registrados hasta el 10 de marzo) y las
condiciones asociadas a estos.
España: ¿"Al menos siete muertos luego
de recibir vacuna de Pfizer"?
• Medios españoles informaron que en una residencia para ancianos de
España fallecieron nueve personas luego de recibir la primera dosis del
preparado de BioNTech/Pfizer. Todos los fallecidos sufrían de afecciones
preexistentes.
Bélgica: ¿"14 muertes tras la vacunación contra
el coronavirus"?
 En Bélgica, la Agencia Federal de Medicamentos y Productos Sanitarios
(FAMHP) informó que 14 personas murieron tras ser vacunadas contra el
coronavirus. Sin embargo, no se estableció una causalidad. Todos los
pacientes tenían más de 70 años, cinco de ellos más de 90,informó
el Brussels Times. No se revelaron más detalles sobre los fallecidos.
• El informe del 4 de febrero de 2021 decía: "Hasta la fecha, no se ha
establecido un vínculo causal formal con la vacuna contra COVID-
19". Bélgica utiliza actualmente las vacunas contra el coronavirus de
BioNTech/Pfizer y de Moderna. Las autoridades belgas no explicaron
qué vacunas se usaron en el caso de los 14 fallecidos.
• En promedio, mueren 45 personas cada día en hogares de ancianos
noruegos o en otras instalaciones similares de este país. Por lo
tanto, esas muertes, que ocurren cerca del momento de la
vacunación, eran de esperar, pero no implican una relación causal
con la vacuna ".
Bélgica: ¿"14 muertes tras la vacunación contra
el coronavirus"?
• En la evaluación de estos casos, un artículo en la revista médica de la
Asociación Médica Británica citó al director médico de la Agencia
Noruega de Medicamentos, Steinar Madsen: "No existe un vínculo
definitivo entre estas muertes y la vacuna". En lugar de eso, explica
Madsen, "los efectos secundarios comunes de las vacunas, que en
pacientes más jóvenes y con buena salud no son peligrosos, y tampoco
inusuales, en personas de más edad pueden empeorar las afecciones ya
existentes”.
• Si se investiga en detalle, el propio NVIC afirma que sus datos provienen
del Sistema de Notificación de Eventos Adversos a las Vacunas (VAERS)
del Gobierno de Estados Unidos, que establece explícitamente que
"cualquier persona puede enviar un informe al VAERS, incluidos padres y
pacientes" y que "los informes del VAERS por sí solos no pueden usarse
para determinar si una vacuna causó un evento adverso o enfermedad, o
contribuyó con estos".
• Además, el VAERS anima a los productores de vacunas a reportar
problemas de salud relevantes, "independientemente de si creen que la
vacuna fue la responsable, o no". Asimismo, el VAERS advierte que sus
datos "no pueden ser interpretados o utilizados para sacar conclusiones
sobre la existencia, la gravedad, la frecuencia o porcentajes de problemas
vinculados con vacunas", los cuales "deben ser interpretados en el
contexto de otras informaciones científicas".
Perú: ¿"Voluntaria para ensayos
de vacuna murió de neumonía por COVID-
19"?
• La Universidad Cayetano Heredia, que estaba realizando un estudio
sobre la vacuna china Sinopharm, tuvo que suspender un estudio local
en Perú, después de que una participante murió de una neumonía
relacionada con COVID-19, informó la agencia Reuters.
 Mientras tanto, el número de muertes después de una vacunación
contra el coronavirus en Corea del Sur aumentó a 15 ( hasta el 12 de
marzo).
Corea del Sur: ¿"Tan pronto como comienzan las vacunas,
hay muertes"?
Para concluir sobre las vacunas
No se introducen en nuestro ADN ni lo modifican
No nos causan la Cov-2
Si nos protegen de la Cov-2
Para concluir sobre las vacunas
• "Por ahora, hemos llegado a la conclusión de que no es posible
establecer ninguna conexión entre los efectos secundarios
después de la vacunación y la muerte de los ocho pacientes", y
aun la invewstigacion no se a terminado.
• Nota: Esta publicación se actualizó por última vez el
12.03.2021.
Muchas gracias

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Cultivo celular y vacunas

  • 1. CULTIVO CELULAR Y VACUNAS Andrea Flórez Martínez Wolfang Rodríguez Victor Hugo Grande López Universidad INCCA de Colombia Programa de biología
  • 3. Equipo básico de laboratorio
  • 4. Aplicaciones en el área del cultivo celular • Actividad intracelular • Flujo intracelular • Ecología celular • Interacciones celulares
  • 5. Tipos de estudios a nivel celular
  • 6. Para sintetizar Estudios virológicos Producción de vacunas Ingeniería de proteínas Estudios de interacción Producción de trasplantes Ensayo de medicamentos Estudio de toxinas
  • 7. Tipos de cultivos celulares Monocapa Suspensión • Significa que las células se adherirán al sustrato y en esa forma inician la proliferación. Muchas líneas celulares son anclaje-dependientes, es decir, no inician la proliferación hasta que se han adherido al sustrato. Ej., este método es utilizado para la mayoría de células, excepto las hematopoyéticas • Las células se encuentran dispersas en el medio de cultivo. Su crecimiento no depende de un anclaje. Alcanzan la confluencia cuando el numero de células es grande y los nutrientes son insuficientes: Ej. Las células hematopoyéticas células madre, líneas celulares transformadas o tumorales
  • 8. Modalidades de cultivo Cultivo de órganos Cultivo a partir de células disociadas Cultivo de explantes Cultivo de organotípico
  • 9. Cultivo de órganos • Se cultiva el órgano en sobre un rejilla situada en un interface liquido- gaseosa de un medio que obtiene los nutrientes y al que puede liberar los desechos. • Esto permite mantener la arquitectura característica del tejido “in vivo” • Permite mantener los tipos celulares diferenciados • No permite propagación ni crecimiento • El crecimiento solo se produce a la periferia d • La falta de propagación tiene como consecuencia repetir el experimento y se necesite nuevo material, lo que produce cierta heterogeneidad de las muestras
  • 10. • Constituidos por pequeños fragmentos de tejidos u órganos que se adhieren a una superficie donde generalmente las células crecen hacia la periferia • Son de gran utilidad para pequeñas cantidades de tejidos como biopsias de piel
  • 11. Cultivos organotípicos • Constan de varios tipos celulares que interaccionan entre si de una forma que que intenta parecerse lo mas posible a la original el objetivo final de es tipo de cultivos es la creación in vitro de tejidos u órganos completamente funcionales que puedan ser utilizados en injertos o en transplantes.
  • 12. Explantes primarios • Se coloca un fragmento de tejido en la interface solido-liquido de un soporte de vidrio o plástico. • Las células se adhieren a la superficie y las células de la periferia del explante migran y proliferan sobre la superficie del soporte
  • 13. Cultivos organotípicos • Permiten el crecimiento in vitro de tejidos que logran replicar parte de su normal fisiología y función • Constituyen poderosas herramientas para la investigación dermatologías validando importantes mecanismos patológicos para el testeo de drogas terapéuticas Aplicaciones • Estudios de diferenciación celular • Estudios de patogénesis • Patogénesis microbiana • Análisis de agentes s terapéuticos • Sistema que permite manipular las células de partida
  • 14. Cultivos organotípicos Ventajas • Fácil implementación en laboratorios estándares • Protocolos de tallados de fácil acceso • Permite el estudio de mecanismos complejos que tienen lugar en células in vivo en un contexto fisiológico • Pueden utilizarse células manipuladas genéticamente • Permiten el screening de potenciales drogas Desventajas • Representan solo una parte de la organización y función normal • No permite reproducir repuestas sistémicas completas con las cicatrización de heridas • El tamaño de los cultivos individuales se ve limitado por la ineficiente difusión de nutrientes • Los resultados obtenidos necesitan se validados a partir de ensayos en tejidos in vivo
  • 15. Diferentes tipos de cultivos • Primario: iniciando a partir de las células, tejidos u órganos tomados directamente de un organismo • Líneas celulares: se origina de l cultivo primario a partir del primer cultivo exitoso • Línea celular continua: las células que han logrado sobrevivir a muchos sub-cultivos
  • 16. Cultivo celular primario • Estas se pueden obtener a partir de cualquier tipo de tejido, pero dan mejor resultados si se obtienen de tejidos embrionarios o tumorales debido a su grado de diferenciación es menor y a su capacidad de mayor división • Se pueden hacer a partir de explantes primarios o de suspensiones de células disgregadas • Disgregación celular: se pierden las interacciones célula-célula de la célula con la matriz celular • Papaces de proliferar
  • 17.
  • 18. • Los cultivos celulares pueden ser obtenidos a partir de explantes o biopsias (órgano o tejido), por perfusión de un órgano especifico, por disgregación de tejidos o a partir de fluidos orgánicos como la sangre
  • 19. Cultivo primario Cultivos en Monocapa • Células que crecen adheridas sobre un soporte solido (plástico o vidrio). El anclaje al sustrato es un prerrequisito para la proliferación celular Cultivos en suspensión • Las células se encuentran en suspensión dispersas en el medio, y su crecimiento no depende de un anclaje, por lo que este tipo de cultivo se restringe a las células hematopoyéticas, células madre, líneas celulares transformadas y células tumorales
  • 20. Cultivo primario: Monocapa • Sub-cultivo por tripsinización (degradan la matriz extracelular o por arrastre mecánico (raspadores)
  • 21.
  • 23. Cambios de medio de cultivo • El objetivo de los cambios de medio es renovar los nutrientes y evitar la acumulación de productos metabólicos potencialmente tóxicos y de células muertas. • Cultivos en suspensión (centrifugación) • Cultivos adherentes (aspiración)
  • 24. Pase de células • Es transferir un pequeño numero de células a un nuevo contenedor las células puede cultivarse por mas tiempo si se pasan regularmente ya que si se evita la senescencia asociada a situaciones prolongadas de alta densidad celular • Cultivos en suspensión ( se toman unas pocas y se re-suspenden en un cultivo fresco • Cultivos adherentes (despegar y pasar)
  • 25. Hayflick & Moorehead • Estudiaron el potencial del crecimiento celular embrionario humano y comprobaron que las células podían crecer mediante sub-cultivos repetidos, durante unas 50 generaciones. • Pasado este tiempo las células entran en senescencias y pierden la capacidad de dividirse. Por lo tanto las cellas tiene una capacidad finita de divisiones mitóticas y es número se denomina limite de Hayflick
  • 26.
  • 27.
  • 28.
  • 29. Líneas celulares establecidas o continuas Transformación de línea celular • Forma espontanea (exposición a radiaciones ionizantes o a carcinógenos químico) • Inducida (infección vírica o transfección de ADN) • Células tumorígenas (inmortales) • Células tumorígenas: deben ser transformadas a líneas estables
  • 30. Concepto ce cepa celular • Una cepa celular deriva tanto de un cultivo primario como de una línea celular por la selección o clonado de células que tienen propiedades o marcadores específicos. • Estas propiedades o marcadores deben persistir en cultivos subsecuentes. • Con los sucesivos pasajes o sub- cultivos, un cultivo primario forma una línea celular. Este termino implica la presencia de varios linajes celulares de fenotipos similares o distintos • Así al seleccionar uno de los linajes celulares por clonado o por separación celular física o por cualquier otra técnica de selección, para tener ciertas propiedades especificas que han sido identificadas en la masa de las células de cultivo esta línea celular se transforma en lo que se conoce como cepa celular (Cell strain)
  • 34. Algunas líneas celulares Raw 264.7 Vero Adipocitos 3T3
  • 35. He La: primera línea celular continua
  • 36. He La
  • 37. Bancos de colecciones de líneas celulares • Líneas celulares frecuentemente mas utilizadas: • Las dos colecciones o bancos de líneas celulares mas importantes: • American Type Culture Collection (ATCC) • European Colletion of Cell Culture (ECACC)
  • 38.
  • 39.
  • 40.
  • 41. Ventajas y desventajas del cultivo In vitro celular Ventajas • Permiten un control preciso y fino del medio ambiente • Caracterización y homogeneidad de la muestra • Economía • Bioética
  • 42. • Desventajas • Técnicas sensibles • Cantidad y coste • Inestabilidad • Desdinfericiación e identificación de las células • Validez del modelo in vitro
  • 44. ¿Que es una vacuna?
  • 45. • Una vacuna es cualquier preparación cuya función es la de generar del organismo inmunidad frente a una determinada enfermedad, estimulándolo para que produzca anticuerpos que luego actuarán protegiéndolo frente a futuras infecciones ¿Que es una vacunación? Fuente: https://www.sanitas.es/sanitas/seguros/es/particulares/biblioteca-de-salud/prevencion-salud/importancia-vacunas/index.html
  • 46. Las vacunas reducen las incidencias de enfermedades altamente transmisibles
  • 47. Las vacunas reducen las incidencias de enfermedades altamente transmisibles
  • 48. El Programa de Erradicación de la Viruela (1966-1980) • La OMS celebra el 40° aniversario de la erradicación de la viruela
  • 49. Consecuencias de campañas anti-vacunas • La pobreza y conflictos sociales en las regiones africana, así como el avance de los movimiento anti-vacunas en los países desarrollados han provocado que esta enfermedad genere brotes cada vez mas grades en el mundo.
  • 50. Desarrollo de las vacunas en el tiempo Tifoidea 1884 105 años 1989 Polio Sarampión Rotavirus 1908 47 años 1955 1953 42 años 1995 1973 26 años 1998 SARS-Cov-2 2019 1 año 2020
  • 51. Desarrollo de una vacuna: pre-clínica • Uso de información previa de los pandemias anteriores Cultivos celulares Modelos animales 5 – 10 años 6 – 9 meses SARS-Cov-2 Otras vacunas
  • 52. Desarrollo de una vacuna: etapa clínica Otras vacunas SARS-Cov-2
  • 53. VACUNAS CREADAS A PARTIR DE CEPAS CELULARES HUMANAS ALGO DE HISTORIA desde finales del siglo XIX, cuando se establecieron las granjas de vacunas para recolectar virus de viruela vacuna por medio de terneros a lo largo de la primera mitad del siglo XX, la mayoría de las vacunas seguirían creándose con la ayuda de los animales, ya fuera cultivando patógenos en animales vivos o utilizando células animales A mediados del siglo XX, las vacunas de la Polio fueron hechas con células de mono y se descubrió que contenían un virus llamado SV40, o virus símico 40 (afortunadamente, se descubrió que el virus no era nocivo para los humanos).
  • 54. cuando la creación de las vacunas se realiza empleando productos animales, y no animales vivos se puede alterar o incluso suspender el desarrollo de la vacuna si disminuyen los productos animales las vacunas contra la influenza se pueden producir con más rapidez a partir de cultivos celulares, a diferencia del uso de huevos de pollo embrionados. es más sencillo disponer de cultivos celulares que de huevos de pollo. Al usar cultivos y líneas celulares, los investigadores pueden cultivar patógenos humanos, como virus, en un tipo de célula en particular, y así atenuarlos o debilitarlos Una manera de adaptar los virus para usarlos en las vacunas es alterándolos, para que no puedan crecer correctamente en el cuerpo humano
  • 55. VACUNAS CREADAS A PARTIR DE CEPAS CELULARES HUMANAS La primera vacuna creada a partir de cepas celulares humanas fue la de la rubéola, cuyo descubridor fue Stanley Plotkin del Instituto Wistar de Filadelfia Después de un aborto de este tipo, se enviaba el feto al laboratorio que Plotkin había designado para investigar la rubéola. Al realizar exámenes al riñón del feto, Plotkin encontró y aisló el virus de la rubéola Por separado, Leonard Hayflick (quien trabajaba en el Instituto Wistar en esa época) desarrolló una cepa celular usando las células del pulmón de un feto abortado. Muchos virus, se desarrollaban bien en la cepa celular resultante. Finalmente, la cepa recibió el nombre de WI-38.
  • 56. • el virus se desarrollaba mal a una temperatura corporal normal (Plotkin eligió el criterio de la baja temperatura después de pruebas previas con atenuación de poliovirus). Plotkin cultivó el virus de la rubéola aislado en células de WI-38 mantenidas a 86 °F (30 °C) • A finales de la década de 1960 surgieron inquietudes sobre la vacuna, creada con una línea celular humana, y su posible contaminación con otros patógenos, aunque estas inquietudes no parecían tener pruebas documentadas como respaldo. • la vacuna de Plotkin obtuvo autorización oficial en Estados Unidos en 1979, y reemplazó al componente de la vacuna contra la rubéola que se había utilizado anteriormente en la vacuna conjugada MMR
  • 57.
  • 58. Son varias las vacunas que se utilizan para la inmunización del hombre pero se les puede clasificar en tres tipos las obtenidas del tejido nervioso de animales adultos ovejas cabras y conejos o animales recién nacidos conejos ratas ratones las obtenidas de tejidos de ave embriones de pato las preparadas en cultivos celulares sepas de células diploides humanas y cultivos celulares de animales
  • 59. VACUNAS ACTUALES QUE SE CREAN EMPLEANDO CEPAS CELULARES HUMANAS Se han utilizado dos cepas celulares humanas principales para crear algunas vacunas disponibles actualmente, y en cada caso con las células fetales originales, obtenidas en la década de 1960 Las siguientes vacunas se crearon con las cepas celulares WI-38 o MRC-5 Vacunas contra la hepatitis A Vacuna contra la rubéola Vacuna contra la varicela Vacuna contra el herpes (zóster) Vacuna oral contra el adenovirus tipo 4 y tipo 7 Vacuna contra la rabia
  • 60. una alta pero finita capacidad de multiplicación in vitro. capacidad de multiplicarse indefinidamente in vitro, manteniendo sus características intactas y sin sufrir alteraciones con los sucesivos pases. Ser susceptible de ser escalada para producción industrial en biorreactores. Demostrarse segura, libre de otros patógenos UNA LINEA CELULAR PARA PRODUCIR VACUNAS DEBE: Poder ser infectada con el virus de interés Crecimiento rápido
  • 61. para que una cepa puede utilizarse en la producción del virus ha de satisfacer requisitos básicos 1. las cepas se debe de comportar de manera uniforme cuando es inoculan determinado sustratos celulares y suscitar una respuesta satisfactoria cuando se inocula animales de laboratorio 2.la cepa ha de ser neutralizada por el suero antirrábico 3.la cepa ha de haber sido purificada en placas en sustratos celulares aceptados Y deberán ser registrados en condiciones experimentales específicos 4.es preciso que la composicion antigenica del virus de siembra quede bien caracterizado mediante un juego de anticuerpos monoclonales.
  • 62. ESTUDIO DE EFECTIVIDAD DE LA VACUNA CONTRA ROTAVIRUS EN EL SALVADOR (RESULTADO PRELIMINARES)
  • 63. ROTAVIRUS • Se transmiten por vía fecal-oral & fomites. P.V.R. Sobreviven al entorno ácido del estómago después de una comida. • La replicación vírica se lleva acabo tras la absorción en las células epiteliales en el intestino delgado. • I. rotavirus impide absorción de agua, provocando diarrea líquida. NSP4 • Perdida excesiva de líquidos y electrolitos puede generar una deshidratación grave, e incluso la muerte. • Durante la enfermedad se eliminan hasta 10°10 partículas víricas por gramo de heces por lo que se fomenta su diseminación. • Causan principalmente gastroenteritis. • Periodo de incubación de diarrea asociada a rotavirus es de 48 horas. • Síntomas principales son: vómitos, diarrea, fiebre y deshidratación. • Generalmente es de resolución espontanea y sin secuelas. • Transmisión Vía oral-fecal: comida, agua, superficies • Epidémico en Hogares infantiles • Incubación de 2 días • En países estacionales se dan picos epidémicos en Noviembre y Abril • Síntomas: Incluye diarrea acuosa, Vómito, Fiebre alta, Síntomas respiratorios, Deshidratación
  • 64. Población : Menores de cinco años : Área Geográfica: Densidad poblacional: Departamentos: Municipios Red de Hospitales: Unidades de Salud 6 millones de habitantes 500,000 21,000 km ² 273 /km ² 14 262 30 76 30 376
  • 65. TENDENCIA DE LAS DIARREAS EN MENORES DE CINCO AÑOS EN EL SALVADOR
  • 66. BROTE DE DIARREA EN EL 2005
  • 67. ROTAVIRUS EN EL SALVADOR Estudios 1985, se describe circulación (Navarro E.) 2000‐2002, un brote, vigilancia y estimaciones de la enfermedad (Guardado J) 2004‐2005, Epidemiología, características clínicas, carga y costos de la enfermedad rotaviral (Flores C) 2006, Implementación de Vigilancia centinela de rotavirus
  • 68. OBJETIVOS DE LA VIGILANCIA Conocer la epidemiología de las diarreas por rotavirus Disponer de datos para evaluar la carga de morbilidad y mortalidad de la enfermedad Aplicar medidas de control necesarias Evaluar el impacto de la vacuna
  • 69. VIGILANCIA CENTINELA DE ROTAVIRUS, EL SALVADOR 2006‐2008 Toma de muestra a paciente hospitalizado que cumpla definición de caso sospechoso Periodo de muestreo: todo el año Numero de muestras: de acuerdo a cumplimiento de definición de caso
  • 70. 2006: ESTABLECIMIENTO DE VIGILANCIA CENTINELA
  • 71. COMPORTAMIENTO DE LOS INGRESOS POR DIARREA EN < DE CINCO AÑOS ATENDIDOS EN SITIOS CENTINELAS, EL SALVADOR, 2006 - 2009
  • 72.
  • 73.  Introducción de la vacuna el 1 Octubre2006  Se adquirieron 160,000 dosis de vacunas  Inversion U$2,000,000 Introduccion de Vacuna contra Rotavirus
  • 74. Métodos Estudio de casos y controles 3 controles por caso Periodo del estudio: enero 2007 a junio de 2009 Utilización de escala de Vesikari para evaluación de severidad de la enfermedad Regresión logística Efectividad e impacto de la vacuna monovalente de rotavirus en El Salvador
  • 75. Hospitalizaciones por diarrea y casos positivos a rotavirus en los 7 hospitales centinelas, El Salvador, enero - abril 2006 - 2009
  • 76.
  • 77. Resultados 323 controles y 969 casos Efectividad de 2 dosis de vacuna en un 76% (IC 95% 64-84%) Escala de Vesikari Efectividad en el 73% (IC 95% 56-84) en casos de diarrea con score ≥ 11 puntos Efectividad en el 83% (IC 95% 52-94) en casos de diarrea con score ≥ 15 puntos Se identifico G1P[8] en el 92%
  • 78. Conclusiones Alta efectividad de la vacuna monovalente de rotavirus Disminución de hospitalización de casos severos No registro de muertes asociados a rotavirus en los últimos 2 años
  • 79. Controversias Tratamientos contra el covid-19: ¿usan células y tejidos de fetos abortados? Especialista en salud pública dice que ciertas líneas celulares derivadas de fetos abortados han sido utilizadas en la elaboración de anticuerpos y vacunas . un coctel de anticuerpos monoclonales llamado REGN-COV2, fabricado por la compañía farmacéutica estadounidense Regeneron. En medio de todo esto, los grupos religiosos y contra el aborto en Estados Unidos y Canadá han argumentado razones éticas para rechazar el uso de ciertas vacunas que están en pleno desarrollo por ser fabricadas con derivados de células de fetos
  • 80. Uso de células del riñón de un embrión abortado • Todo empezó a inicios de la década de los setenta en Leiden, Holanda, cuando el laboratorio del científico Alex Vander -eb buscaba producir una línea de células que pudiesen ser usadas en la fabricación de proteínas. • Después de 293 experimentos • La letra H viene de la palabra humano, la E de embrionario, la K de la palabra para riñón en inglés, kidney. Y 293 viene de la numeración de los experimentos de Graham. • HEK 293 significa entonces “células fetales de riñón humano logradas en el experimento 293”.
  • 81. Células de la retina de un feto abortado • Tomaron estas líneas celulares sin el permiso de la paciente Henrietta Lacks en los años cincuenta. • Otra línea celular, llamada PER.C6, derivada de células de la retina de un feto abortado a mediados de la década de los ochenta en el mismo laboratorio del Dr. Van der Eb, está siendo usada en el desarrollo de la vacuna del laboratorio Johnson & Johnson. • Esas líneas celulares no son células madre, ni células fetales, ni embrionarias; son células epiteliales inmortales que tienen casi 50 años de vida.
  • 82. contra COVID-19? • ¿se trata de muertes causadas realmente por las vacunas? • ¿Pueden tener efectos secundarios mortales? • ¿son las vacunas la solución contra el coronavirus, o representan un problema más? • ¿Son todas las vacunas peligrosas para la salud?
  • 83. DW verifica: ¿hubo muertes por vacunas contra COVID-19? • Sin embargo, un sondeo de la Universidad de Erfurt, en Alemania, muestra que solo un 56 por ciento de los encuestados están dispuestos a vacunarse. Y un 44 por ciento es más bien escéptico al respecto. • Alemania, Francia, España e Italia se unieron este lunes (15.03.2021) a una lista creciente de países que han suspendido el uso de esta vacuna. La Agencia Europea del Medicamento (EMA) ha identificado hasta el momento una treintena de casos de trombosis tras una dosis de la vacuna de AstraZeneca.
  • 84. ¿Hubo alguna muerte por las vacunas? En esta verificación de datos de DW, hasta el 15 de marzo de 2021, analizamos informes de ocho países: • el rastreador global de vacunas de Bloomberg informaba que se han administrado más de 330 millones de vacunas contra el coronavirus en más de 120 países, unos ocho millones de dosis por día. • Alemania: ¿"Muertos tras vacunarse contra el coronavirus"?
  • 85. Controversia por muertes en Alemania…. • EL PEI es la autoridad nacional alemana responsable de la aprobación de vacunas y de seguridad en biomedicina. Los fallecidos tenían 84 años en promedio, y el deceso se produjo en un lapso de una hora y 19 días luego de la vacunación……. informó el PEI en un estudio que incluía los casos de fallecimiento luego de una vacunación hasta el 31 de enero de 2021. • "De seguro, no se trata de un gran número de fallecimientos, y por eso también se puede decir que esas muertes no tienen nada que ver con la vacuna”, añadió.
  • 86. • En otro caso de tres personas muertas en Colonia, Alemania, la Fiscalía está investigando qué sucedió. Luego de recibir la vacuna contra COVID-19, tres personas de la tercera edad fallecieron. Los tres sufrían de enfermedades previas graves, según detalló Markus Rothschild, director del Centro de Medicina Legal de Colonia. • El fiscal general Ulrich Bremer dijo a DW que "no hay sospechas ni contra los médicos ni contra el personal de salud”, y que todavía se están elaborando los protocolos de obducción, así como el informe de los peritos médicos. Controversia por muertes en Alemania….
  • 87. Austria: ¿"Enfermera muere luego de ser vacunada contra el coronavirus"? • Dos casos saltaron a los titulares en Austria: la muerte de una enfermera de 49 años como consecuencia de una coagulopatía y el deceso de otra mujer luego de recibir la vacuna, debido a una embolia pulmonar. • El PRAC continúa investigando problemas potenciales con el lote vacunado en Austria y revisando los sucesos tromboembólicos (30 en 5 millones de vacunados en la UE, según datos registrados hasta el 10 de marzo) y las condiciones asociadas a estos.
  • 88. España: ¿"Al menos siete muertos luego de recibir vacuna de Pfizer"? • Medios españoles informaron que en una residencia para ancianos de España fallecieron nueve personas luego de recibir la primera dosis del preparado de BioNTech/Pfizer. Todos los fallecidos sufrían de afecciones preexistentes. Bélgica: ¿"14 muertes tras la vacunación contra el coronavirus"?  En Bélgica, la Agencia Federal de Medicamentos y Productos Sanitarios (FAMHP) informó que 14 personas murieron tras ser vacunadas contra el coronavirus. Sin embargo, no se estableció una causalidad. Todos los pacientes tenían más de 70 años, cinco de ellos más de 90,informó el Brussels Times. No se revelaron más detalles sobre los fallecidos.
  • 89. • El informe del 4 de febrero de 2021 decía: "Hasta la fecha, no se ha establecido un vínculo causal formal con la vacuna contra COVID- 19". Bélgica utiliza actualmente las vacunas contra el coronavirus de BioNTech/Pfizer y de Moderna. Las autoridades belgas no explicaron qué vacunas se usaron en el caso de los 14 fallecidos. • En promedio, mueren 45 personas cada día en hogares de ancianos noruegos o en otras instalaciones similares de este país. Por lo tanto, esas muertes, que ocurren cerca del momento de la vacunación, eran de esperar, pero no implican una relación causal con la vacuna ". Bélgica: ¿"14 muertes tras la vacunación contra el coronavirus"?
  • 90. • En la evaluación de estos casos, un artículo en la revista médica de la Asociación Médica Británica citó al director médico de la Agencia Noruega de Medicamentos, Steinar Madsen: "No existe un vínculo definitivo entre estas muertes y la vacuna". En lugar de eso, explica Madsen, "los efectos secundarios comunes de las vacunas, que en pacientes más jóvenes y con buena salud no son peligrosos, y tampoco inusuales, en personas de más edad pueden empeorar las afecciones ya existentes”. • Si se investiga en detalle, el propio NVIC afirma que sus datos provienen del Sistema de Notificación de Eventos Adversos a las Vacunas (VAERS) del Gobierno de Estados Unidos, que establece explícitamente que "cualquier persona puede enviar un informe al VAERS, incluidos padres y pacientes" y que "los informes del VAERS por sí solos no pueden usarse para determinar si una vacuna causó un evento adverso o enfermedad, o contribuyó con estos".
  • 91. • Además, el VAERS anima a los productores de vacunas a reportar problemas de salud relevantes, "independientemente de si creen que la vacuna fue la responsable, o no". Asimismo, el VAERS advierte que sus datos "no pueden ser interpretados o utilizados para sacar conclusiones sobre la existencia, la gravedad, la frecuencia o porcentajes de problemas vinculados con vacunas", los cuales "deben ser interpretados en el contexto de otras informaciones científicas".
  • 92. Perú: ¿"Voluntaria para ensayos de vacuna murió de neumonía por COVID- 19"? • La Universidad Cayetano Heredia, que estaba realizando un estudio sobre la vacuna china Sinopharm, tuvo que suspender un estudio local en Perú, después de que una participante murió de una neumonía relacionada con COVID-19, informó la agencia Reuters.  Mientras tanto, el número de muertes después de una vacunación contra el coronavirus en Corea del Sur aumentó a 15 ( hasta el 12 de marzo). Corea del Sur: ¿"Tan pronto como comienzan las vacunas, hay muertes"?
  • 93. Para concluir sobre las vacunas No se introducen en nuestro ADN ni lo modifican No nos causan la Cov-2 Si nos protegen de la Cov-2
  • 94. Para concluir sobre las vacunas
  • 95. • "Por ahora, hemos llegado a la conclusión de que no es posible establecer ninguna conexión entre los efectos secundarios después de la vacunación y la muerte de los ocho pacientes", y aun la invewstigacion no se a terminado. • Nota: Esta publicación se actualizó por última vez el 12.03.2021.