esterilización de materiales y medios de cultivo

1. ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS
BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL
Practica de laboratorio de microbiología
Practica No 1 esterilización de materiales y medios de cultivo
Nombre: david samaniego
Código: 2623
OBJETIVOS
 Conocer los principios generales de la preparación y técnicas de
esterilización de diversos materiales y medios de cultivo de uso común en
microbiología.
 Conocer el efecto de las condiciones de asepsia en el control de la
contaminación microbiana en el laboratorio.
 Establecer la forma en la cual se deben utilizar los materiales de
laboratorio
 Implementar los distintos tipos de cultivos que vamos a utilizar a lo largo
de la asignatura
ESPECÍFICOS
INTRODUCCION
La esterilización se define como la destrucción completa de todos los
microorganismos presentes incluyendo las formas vegetativas y las esporas.
Para lograr la destrucción de las bacterias, existen diferentes medios como son:
la acción de los agentes químicos y antibióticos.
Los principales métodos de esterilización empleados en el laboratorio de
microbiología son:
Calor húmedo, seco, y filtración para los líquidos sin olvidar que cuando se
requiere una esterilización mas completa se efectúa esta usando gas (oxido de
etileno) y el área de trabajo se expone a los rayos ultravioleta.
Los microorganismos estudiados en el laboratorio por lo regular son heterótrofos,
ya que requieren de compuestos complejos como fuentes de carbono y
nitrógeno.
Los microorganismos como otros seres vivos son susceptibles a los cambios de
temperatura a medida que se han podido a adaptar a estos cambios.
MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS
Materiales

2. 3 tubos de cultivo con tapa
6 cajas Petri desechables
3 Erlenmeyer de 250 ml
3 pipetas de 5 ml
1 probeta de 250 ml
1 parilla de calentamiento o reverbero
1 gradilla
1 mechero de alcohol
Papel manila o aluminio para envolver
Algodón y gasa
Autoclave
Balanzas
Incubadora
Refrigerador
Medios y reactivos
Caldo soya tripticasa (CTS)
Agar soya tripticasa (AST)
Agar macConkey
Agar luria-bertani
RESUMEN DE LA PRACTICA
En la práctica aprendimos los distintos métodos de empaquetado para los
materiales que vamos a utilizar tanto el empaquetado de las cajas Petri como de
los Erlenmeyer las pipetas y para empaquetar las cajas Petri debemos de utilizar
papel periódico y empaquetarlos de manera similar a un regalo procurando que
el papel cubra toca la caja y este bien adherido el papel a la caja Petri luego lo
aseguramos con cinta de papel o masqui para el empaquetado de las pipetas
debemos empezar por la punta y en el extremo o pues debemos de hacerle un
tapón de algodón luego doblamos un estreno del papel y ponemos la pileta a 45
grados enrollamos el papel protegiendo bien la punta, el papel siempre debe de
tocar la pipeta.
Para la preparación de medios de cultivo
En la actualidad la mayoría de los medios de cultivos vienen ya procesados solo
es cuestión de pesar la cantidad necesario para nuestro cultivo y agregamos
agua destilada según indique el fabricante en el caso del agar luria bertían lo
tuvimos que hacer nosotros mismo con las especificaciones que nos

3. proporcionaron en la práctica adaptándolas a nuestras necesidades ya que en la
práctica se lo Asia para un litro de agua y nosotros lo asimos para 1.50 ml con
una sencilla regla de tres supimos que cantidad de los componentes teníamos
que utilizar una vez hechos los medios de cultivo procedimos a realizar los
tapones estos se los ase con algodón y gasas procurando que no estén
demasiado flojos y tampoco mui apretados lo recubrimos con papel aluminio y
luego los etiquetamos con cinta de papel antes de utilizar los medios de cultivo
se los debe llevar a esterilizar en nuestro caso usamos un autoclave a 121
grados centígrados a una atmosfera de presión durante treinta minutos hay que
recordar que el proceso dura más de 30 minutos ya que el autoclave primero
debe de calentarse y luego antes de utilizarlos debemos dejar que se enfrié a
temperatura ambiente para poder utilizarlos de manera correcta
CUESTIONARIO
¿Qué características de un material o sustancia se requieren conocer para elegir
el método adecuado de esterilización?
dependiendo de su textura, porosidad, y otras características propias de cada
material. Algunos materiales como el hule, necesitan poco tiempo, mientras otros
como el metal quirúrgico necesitan más. Los siguientes datos han sido tomados
para una temperatura de esterilización
• Guantes de Caucho (Hule) 15 minutos
• Sondas (base tejida) 15 minutos
• Sondas (látex) 15 minutos
• Frascos de Vidrio, Cristalería en General 20 minutos
• Agua en frascos 20 minutos
• Jeringas de Vidrio 20 minutos
• Bandeja 30 minutos
• Equipo de transfusión 30 minutos
• Paquetes de maternidad 30 minutos
• Ropa 30 minutos
• Torundas 30 minutos
• Paquete quirúrgico 45 minutos
• Instrumental de acero inoxidable 45 minutos
2 describa el tipo de contaminantes microbianos que se encuentran con mayor
frecuencia en las cajas Petri ¿Cómo explican estos resultados?
3¿Cuáles son las tres pinsapares recomendaciones del uso del autoclave?