Cromatografía y potenciómetro ¿Qué es la cromatografía? es la técnica para separar componentes de una mezcla, y su posterior análisis basados en que las distintas sustancias que forman los componentes de una mezcla se dejan arrastrar a diferentes velocidades sobre un soporte. el soporte puede ser papel, un gas, otro líquido, etc. ¿Para qué se utiliza la Cromatografía? Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. ¿Por qué se separan los componentes? Dejamos que se mueva la mezcla por un soporte y los componentes se separan por que se mueven a diferentes velocidades, debido a las diferentes fuerzas de adsorción que ejerce el soporte sobre cada elemento TIPOS DE CROMATOGRAFIA PLANA EN PAPEL es un proceso donde el absorbente o fase estacionaria lo constituye un papel de filtro y la fase móvil la constituye el disolvente. Una vez corrido el disolvente se retira el papel y se deja secar, se trata con un reactivo químico con el fin de poder revelar las manchas. EN CAPA FINA La técnica es similar a la cromatografía en papel, a excepción que en este caso el análisis se realizará en una placa de plástic0, aluminio o vidrio cubierta de una capa de sustancia absorbente como alúmina o gel de sílice. Cromatografía en columna la fase estacionaria la forma un sólido poroso, el cual queda soportado en el interior de una columna generalmente fabricada en plástico o vidrio. La fase móvil se encuentra formada por la solución que lentamente va atravesando la fase estacionaria. La solución que sale al final de la columna se reemplaza constantemente por una nueva solución que se suministra desde un contenedor por la parte superior de la columna. TIPOS DE CROMATOGRAFIA EN COLUMNA Por intercambio iónico: Se trata de una cromatografía en columna que utiliza una fase estacionaria con sustancias con componentes con carga eléctrica. Se utiliza para separar compuestos cargados, incluyendo aminoácidos, péptidos y proteínas. La fase estacionaria es normalmente una resina de intercambio iónico que contiene grupos funcionales cargados que interaccionan con grupos cargados de signo opuesto del compuesto que se quiere retener. Puede ser: Intercambiador de iones cargado positivamente (intercambiador de aniones), que interacciona con aniones Intercambiador  de iones cargado negativamente (intercambiador  de cationes), que interacciona con cationes. TIPOS DE CROMATOGRAFIA EN COLUMNA la fase estacionaria es un material poroso, que retine a las moléculas en función de su tamaño. En ocasiones se denomina también cromatografía sobre geles o de permeabilidad en geles (GPC). TIPOS DE CROMATOGRAFIA EN COLUMNA Cromatografía de afinidad: La Cromatografía de Afinidad permite la separación de mezclas proteicas por su afinidad o capa

1. CROMATOGRAFÍA Y
POTENCIÓMETRO Andrea León
Juana Cuadrado
Sharo Maestre
Katherin Buelvas

2. ¿QUÉ ES LA
CROMATOGRAFÍA?
• es la técnica para separar
componentes de una mezcla, y su
posterior análisis basados en que las
distintas sustancias que forman los
componentes de una mezcla se dejan
arrastrar a diferentes velocidades
sobre un soporte. el soporte puede
ser papel, un gas, otro líquido, etc.

3. ¿PARA QUÉ SE UTILIZA LA
CROMATOGRAFÍA?
Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de
retención selectiva, cuyo objetivo es separar los
distintos componentes de una mezcla, permitiendo
identificar y determinar las cantidades de dichos
componentes.

4. Fases de la cromatografía
Fase móvil
Consiste en un liquido o gas
que es arrastrado a través de
la fase estacionaria
Fase estacionaria
Consiste en un solido o un liquido
fijado a un solido por donde el
cual pasa la fase móvil

6. ¿POR QUÉ SE SEPARAN LOS
COMPONENTES?
• Dejamos que se mueva la mezcla por un
soporte y los componentes se separan por que
se mueven a diferentes velocidades, debido a
las diferentes fuerzas de adsorción que ejerce
el soporte sobre cada elemento

7. TIPOS DE CROMATOGRAFÍA
Cromatografí
a
Plana
Papel
Capa fina
Columna
Intercambio
iónico
Por exclusión
molecular
Por afinidad

8. TIPOS DE CROMATOGRAFIA
PLANAEN PAPEL
EN CAPA FINA
es un proceso donde el
absorbente o fase estacionaria
lo constituye un papel de filtro y
la fase móvil la constituye el
disolvente. Una vez corrido el
disolvente se retira el papel y se
deja secar, se trata con un
reactivo químico con el fin de
poder revelar las manchas. La técnica es similar a la
cromatografía en papel, a
excepción que en este caso el
análisis se realizará en una placa
de plástic0, aluminio o vidrio
cubierta de una capa de
sustancia absorbente como
alúmina o gel de sílice.

9. CROMATOGRAFÍA EN
COLUMNA
la fase estacionaria la forma un sólido poroso, el
cual queda soportado en el interior de una
columna generalmente fabricada en plástico o
vidrio.
La fase móvil se encuentra formada por la
solución que lentamente va atravesando la fase
estacionaria. La solución que sale al final de la
columna se reemplaza constantemente por una
nueva solución que se suministra desde un
contenedor por la parte superior de la columna.

10. TIPOS DE CROMATOGRAFIA EN
COLUMNA
Por intercambio iónico:
Se trata de una cromatografía en columna que utiliza una fase
estacionaria con sustancias con componentes con carga eléctrica. Se
utiliza para separar compuestos cargados, incluyendo aminoácidos,
péptidos y proteínas. La fase estacionaria es normalmente una
resina de intercambio iónico que contiene grupos funcionales
cargados que interaccionan con grupos cargados de signo opuesto
del compuesto que se quiere retener. Puede ser:
• Intercambiador de iones cargado positivamente (intercambiador
de aniones), que interacciona con aniones
• Intercambiador de iones cargado negativamente
(intercambiador de cationes), que interacciona con cationes.

11. TIPOS DE CROMATOGRAFIA EN
COLUMNA• Por exclusión molecular:
la fase estacionaria es un material poroso,
que retine a las moléculas en función de su
tamaño. En ocasiones se denomina también
cromatografía sobre geles o de
permeabilidad en geles (GPC).

12. TIPOS DE CROMATOGRAFIA EN
COLUMNA
• Cromatografía de afinidad:
La Cromatografía de Afinidad permite la
separación de mezclas proteicas por su
afinidad o capacidad de unión a un
determinado ligando.

13. POTENCIÓMETRO

14. INTRODUCCIÓN
El “pH” de una sustancia
refleja su grado de acidez o
de basicidad. La escala de
pH se numera de cero a 14.
El valor de pH indica si una
solución es ácida (pH por
debajo de 7), neutra (pH=7)
o básica (pH por encima de
7).

15. ¿QUE ES EL POTENCIÓMETRO?
• Los potenciómetros o pH metros, son
instrumentos eléctricos que se
utilizan para medir el pH de una
disolución, por estar diseñados para
determinar las concentraciones de
iones hidronios que posea, lo que
permite conocer con precisión su
grado de acidez o basicidad.

16. • La determinación de pH consiste en medir el
potencial que se desarrolla a través de una fina
membrana de vidrio que separa dos soluciones
con diferente concentración de protones. En
consecuencia se conoce muy bien la
sensibilidad y la selectividad de las membranas
de vidrio delante el pH.

17. COMO FUNCIONA
1. Los electrodos tiene una punta en forma de bola que tiene pequeños poros por
los cuales son sensibles los átomos de hidrogeno que se encuentran disueltos en
la sustancia que queremos analizar.
2. El electrodo de vidrio es relativamente inmune a las interferencias del color,
turbidez, material coloidal, cloro libre, oxidante y reductor.
3. La medida se afecta cuando la superficie de la membrana de vidrio está sucia
con grasa o material orgánico insoluble en agua.
4. Los electrodos tienen que ser enjuagados con agua destilada entre muestras. No
se tienen que secar con un trapo, porque se podrían cargar electrostáticamente.
5. Luego se deben colocar suavemente sobre un papel, sin pelusa, para quitar el
exceso de agua.
6. Como los electrodos de vidrio de pH mesuran la concentración de
H+ relativa a sus referencias, tienen que ser calibrados
periódicamente para asegurar la precisión. Por eso se utilizan buffers de
calibraje

18. TÉCNICA DE USO
1. Se procederá a medir el pH una vez calibrado el aparato
2. Llenar un vaso de precipitado con la muestra de agua hasta la marca de 50 ml.
(aproximadamente).
3. Pulsar el botón ON/OFF para encender el aparato.
4. Sumergir el electrodo unos 2 cm en el vaso y mover suavemente.
5. Esperar a que la lectura del pH se estabilice.
6. Una vez estabilizada la lectura que aparece en la pantalla del aparato, podemos mantener la
lectura en la pantalla apretando el botón HOLD/CON.
7. Anotar el valor que aparece en pantalla.
8. Para volver a realizar otra medición, pulsar otra vez HOLD/CON.
9. Lavar el electrodo con el frasco lavador, vertiendo el agua del lavado en un cristalizador.
10. Secar con un pañuelo de papel cuidadosamente.
11. Volver a realizar una nueva medida repitiendo los pasos desde el 4 al 10.