Este documento describe la terapia con anticuerpos monoclonales, incluyendo su desarrollo por César Milstein y Georges Köhler en 1975. Explica cómo se producen anticuerpos monoclonales a través de la fusión de linfocitos B con células tumorales, y los tipos de anticuerpos monoclonales como murinos, quiméricos y humanizados. También resume algunos anticuerpos monoclonales terapéuticos como rituximab, cetuximab e infliximab y sus usos para tratar diferentes tipos de cáncer

1. Universidad de Guayaquil .
Cátedra de Biologia Molecular .
Tema :
TERAPIA GENETICA
ANTICUERPOS MONOCLONALES
Drs. Jonathan Ortega Jorge Barrezueta Lorena
Sandoya , Norma Castro , Daiana Galan .
Medicina Interna .

2. TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES
Este científico argentino fue Premio Nobel de Fisiología y
Medicina, nació el 8 de octubre de 1927 en la ciudad de
Bahía Blanca (Argentina), donde permaneció hasta
1945, cuando se trasladó a la ciudad capital para
estudiar en la Universidad de Buenos Aires.

3. Estando en Cambridge (INLATERRA) a los 36
años, formó parte del Laboratorio de Biología
Molecular y trabajó en el estudio de las
inmunoglobulinas.
TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES
Junto a G. Kölher desarrolló una técnica
para crear anticuerpos con idéntica
estructura química, que denominó
anticuerpos monoclonales

4. TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES
Los anticuerpos o inmunoglobulinas (Ig) son un tipo de proteínas
denominadas glicoproteínas.
Funcionan como la parte específica del denominado complejo receptor
de células B (BCR) reconociendo al antígeno a nivel de la membrana
del linfocito B, y como moléculas circulantes secretadas por las
células plasmáticas procedentes de la activación, proliferación y
diferenciación de células B.

5. TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES
1. Región Fab
2. Región Fc
3. Cadena pesada con un dominio
variable (VH) seguido por un dominio
constante (CH1), una región bisagra, y
dos más constantes, los dominios
(CH2 y CH3).
4. Cadena ligera con un dominio
variable (VL) y uno constante (CL)
5. Lugar de unión al antígeno
(PARATOPO)
6. Regiones bisagra.

6. TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES

7. TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES
IMPORTANCIA DE LA INVESTIGACIÓN GALARDONADA:
El sistema inmunitario es extraordinariamente complejo y preciso en su
defensa del organismo.
Los anticuerpos monoclonales son sustancias idénticas, producidas por
el cruce de un linfocito B y una célula tumoral.
Este cruce se denomina HIBRIDOMA y genera indefinidamente
anticuerpos, los cuales son de GRAN TRASCENDENCIA EN LA
TERAPÉUTICA.

8. TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES

9. PRINCIPALES TECNOLOGÍAS DE PRODUCCIÓN Y MEJORA DE
ANTICUERPOSMONOCLONALES.
TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES

10. El MEDIO SELECTIVO HAT CONTIENE:
AMINOPTERINA COMO INHIBIDOR DE LA SÍNTESIS DE NOVO PURINAS
Hipoxantina y timidina para enriquecer el cultivo.
(solo las células del hibridoma pueden usar HG PRT producir purinas a partir
de Hipoxantina y timidina) .
 En presencia de aminopterina SÓLO PODRÁN SOBREVIVIR AQUELLAS
CÉLULAS QUE EXPRESAN HG PRT((hipoxantil-guanil-fosforribosil-
transferasa).
 COMO LOS HIBRIDOMAS; las células de mieloma morirán (son HG PRT -) y
las células plasmáticas de bazo no se desarrollan en cultivo (no son inmortales)
TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES

11. 1) Inmunización de ratones con Ag soluble disuelto en adyuvante
incompleto de Freund por vía intraperitoneal o
intramuscular, administrando finalmente una dosis de recuerdo de Ag
no emulsionado por vía intravenosa, 3 días antes de la fusión.
2) Fusión: se realiza 3 días después de la dosis de recuerdo del
Ag, momento de máxima presencia de blastos en el bazo. Como agente
fusionante se usa el polietilenglicol (PEG).
3) Selección de los híbridos linfocito-mieloma en medio HAT.
TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES

12. 4) Cultivo de hibridomas en un medio que favorezca la división celular y la
producción y secreción de Ac (RPMI 1640). El cultivo se realiza en placa de 96
pocillos a 37ºC, en estufa con un 5% de CO2.
 5) Monitorización de la producción de Ac: la detección de Ac específicos
en el medio de cultivo donde crecen los hibridomas es el punto más
importante. Las técnicas deben ser de alta sensibilidad, capaces de
detectar mgr/ml y rápidas para descartar cultivos inútiles. EL MÉTODO
MÁS UTILIZADO ES EL ELISA.
 6) Clonado: los cultivos que dan reacción positiva específica deben ser
clonados lo más rápidamente posible para lograr el establecimiento de
clones productores de Ac. El método más utilizado es la dilución en medio
líquido o método de la dilución límite. Consiste en realizar diluciones de la
población original para obtener cultivos que contengan una sola célula
capaz de originar el clon correspondiente.
TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES

13. 7) Producción de Ac monoclonales en grandes
cantidades. Se puede realizar:
· “In vivo”: se inocula intraperitonealmente en ratones
histocompatibles con la línea celular y se obtiene el líquido
ascítico del animal , en el que se pueden obtener
concentraciones de Ac de mgr/ml.
· “In vitro”: realizar cultivos celulares de los híbridos a
gran escala, obteniéndose concentraciones de mgr/ml en
los sobrenadantes.
TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES

14. TIPOS DE ANTICUERPOS MONOCLONALES
ANTICUERPOS MURINOS:
El 100% del anticuerpo procede del ratón.
Por este motivo las aplicaciones terapéuticas de
estos anticuerpos se han visto limitadas.
El sistema inmune humano reconoce estos
anticuerpos como extraños y genera sus
propios anticuerpos frente a ellos.
TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES
sufijo "-momab"

15. ANTICUERPOS QUIMÉRICOS:
En este tipo de anticuerpos las regiones
variables proceden de ratón y las
regiones constantes son humanas.
Están construidos gracias a técnicas de
ingeniería genética.
Con esta estrategia se consiguió reducir la
respuesta inmune que se producía frente a
los anticuerpos murinos.
TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES
RATÓN-HUMANO CON EL
SUFIJO "-XIMAB"

16. ANTICUERPOS HUMANIZADOS:
En estos anticuerpos solamente las
regiones CDR de las partes variables
de los anticuerpos proceden de ratón
siendo el resto del anticuerpo de origen
humano.
TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES
HUMANIZADOS, CON EL SUFIJO "-ZUMAB"

17. Anticuerpos humanos:
Estos anticuerpos son en su totalidad
de origen humano, reduciendo así el
riesgo de producir una respuesta
inmune.
TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES
HUMANOS "-MUMAB"

18.  Hasta el desarrollo de los anticuerpos monoclonales en el
año 1975, el uso de los anticuerpos en diagnóstico y/o
TERAPIA se centraba únicamente en la utilización de
sueros inmunes convencionales.
 Una mezcla de anticuerpos producidos por ,DISTINTOS
CLONES DE LINFOCITOS B, por lo que se , denominaba
anticuerpos policlonales , reconocen en mayor o menor
medida el antígeno pero con distinta especificidad y
afinidad cada uno de ellos.
TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES

19. TERAPÉUTICAS ONCOLÓGICAS QUE UTILIZAN ANTICUERPOS
MONOCLONALES.
EL RITUXIMAB SE UNE ESPECÍFICAMENTE AL
ANTÍGENO CD20, UNA FOSFOPROTEÍNA
TRANSMEMBRANARIA NO GLUCOSILADA QUE
SE EXPRESA EN LOS LINFOCITOS PRE-B Y B
MADUROS. ESTE ANTÍGENO SE EXPRESA EN
MÁS DEL 95 % DE LOS LINFOMAS NO-
HODGKINS (LNH) DE LINFOCITOS B.

20. TERAPÉUTICAS ONCOLÓGICAS QUE UTILIZAN ANTICUERPOS
MONOCLONALES.

21. El cetuximab se une al antígeno llamado EGFR
(receptor del factor de crecimiento
epidérmico) y lo bloquea.
Como consecuencia la célula tumoral no
recibe los mensajes bioquímicos que estimulan
su propagación y el crecimiento del tumor se
enlentece.
TERAPÉUTICAS ONCOLÓGICAS QUE UTILIZAN ANTICUERPOS
MONOCLONALES.

22. TERAPÉUTICAS ONCOLÓGICAS QUE UTILIZAN ANTICUERPOS
MONOCLONALES.
Se utiliza para el tratamiento del cáncer de colon y otros tipos de
canceres de células escamosas que afectan a la cabeza y el cuello, como
algunos tumores de la boca o la laringe.

23. ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS
I N H I B I D O R E S D E L A G L U P R O T E I N A I I B / I I I A
A B C I X I M A B
Impide la unión del fibrinógeno y de
otros factores en el endotelio.

24. EJEMPLO CLINICO : INHIBIDORES DE LA GLUPROTEINA IIB/IIIA ABCIXIMAB

25. USOS CLINICOS DE IGPIIB/IIIA
Abciximab.
• Se ha demostrado eficacia en pacientes con:
• Síndrome coronario agudo (SCA) sin elevación del
segmento ST de alto riesgo manejados con ICP
precoz.
• SCA con elevación del segmento ST (SCACEST)
manejados con angioplastia primaria.
• Efecto adverso
Hemorragias, sobre todo de tipo mucocutáneo
o en el lugar de la punción arterial del cateterismo.

26. ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS .- OMALIZUMAB
 La inmunoglobulina E (IgE) fue
descubierta en 1967 y reconocida
como un mediador fundamental en la
alergia.
 El omalizumab es un anticuerpo
monoclonal humanizado que reconoce
a la IgE como molécula diana
uniéndose a su fracción constante
(Fc).
 Por su acción es capaz de limitar el
desencadenamiento de la respuesta
alérgica mediada por los anticuerpos
IgE.

27. • ASMA GRAVE
• POLIPOSIS NASAL
• ENFERMEDADES DE LA VÍA
AÉREA ASOCIADAS A
ASPERGILLUS FUMIGATUS
• URTICARIAS CRÓNICAS
ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS
.- OMALIZUMAB

28. ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS .-
ECULIZUMAB
La hemoglobinuria paroxística nocturna es
una enfermedad clonal adquirida
caracterizada por hemólisis mediada por
complemento, insuficiencia medular y
enfermedad tromboembólica.
El eculizumab es un anticuerpo monoclonal
dirigido contra la fracción C5 del
complemento, que bloquea la formación del
componente citolítico de este.

29. ANTICUERPOS MONOCLONALES TERAPEUTICOS
.- ECULIZUMAB

30. ANTICUERPOS MONOCLONALES
TERAPEUTICOS INFLIXIMAB
Infliximab se une y neutraliza el factor
de necrosis tumoral de tipo alfa (TNFa
), llegando a interrumpir la cascada
secuencial de activación de las vias
inflamatorias intervenidas por esta
citoquina
Por lo tanto, disminuye el efecto del
factor de necrosis tumoral , que es una
citocina que producen diversas células de
nuestro cuerpo y que aumenta los
síntomas inflamatorios.

31. ANTICUERPOS MONOCLONALES
TERAPEUTICOS INFLIXIMAB

33. TERAPIA GENETICA ANTICUERPOS MONOCLONALES