Este documento presenta información sobre técnicas de preparación e histológicas y tinciones utilizadas para visualizar tejidos al microscopio. Explica los pasos de la técnica de parafina como fijación, deshidratación, inclusión, corte e hidratación. Luego describe diversas tinciones como hematoxilina-eosina, tricrómica, argéntica y de Gram; y su uso para visualizar estructuras como núcleos, fibras y bacterias. Finalmente aplica estas técnicas a la histología

1. República Bolivariana de Venezuela
Ministerio del Poder Popular Para la Educación
Universitaria
Universidad Nacional Experimental Rómulo Gallegos
Área Ciencias de la Salud - Medicina
Núcleo Calabozo
Catedra: Histología y Embriología
Bachiller:
Salinas Edmary
Hernández Glennys
Cordones Génesis
Porras Pierina
Bolívar Eva
Porras Paulina
Primer año Sección
6
Facilitador:
Dra. María
Pérez.
Técnicas de Preparación y
Tinciones Histológicas

2. TECNICAS DE
PREPARACIÓN
Es un conjunto de pasos a seguir para la
obtención de preparados histológicos
aptos para su estudio mediante el
microscopio óptico.

3. 1. Obtención de la
muestra
2. Fijación
3. Deshidratación
4. Aclaración
5. Inclusión de parafina
6. Preparación de Taco
7. Corte
8. Colocación sobre el
portaobjeto
9. Desparafinización
10.Hidratación
11.Coloración (Tinción)
PROCEDIMIENT
OS:

4. Biopsia
Autopsi
a
Necropsia
Paso de la técnica de parafina que
consiste en utilizar agentes
fijadores en la muestra biológica, a
fin de detener el proceso
postmorten (autolisis) para
conservar de manera íntegra la
estructura de la muestra.
Tipos de fijación
Físicos:
1. Por ebullición
2. Por congelación
Temperaturas --190° a
-70°
Químicos:
1. Se usan soluciones
simples como
Alcoholes y Formol al
10%
2. Compuestos: Líquido
de Bouin, Zenker y
Helly
Después la fijación
el tejido debe
lavarse

5. Se coloca muestras de
alcoholes crecientes
para eliminar el agua
que contenga
Son solventes que
producen transparencia
en los tejidos, además de
solubilizar la parafina.
XILOL,TOLUOL,ACETONA,
BENCENO.
La parafina es una
mezcla de
hidrocarburos
saturados que tienen
diferentes puntos de
fusión
Se corta un trozo de
parafina que contiene la
muestra en forma de
pirámide truncada, para
que quede sobre su
base menor.

6. Se realiza
mediante el uso
del microtomo.
Efectuados los cortes se
colocan en agua tibia para
que se extiendan y luego
se recogen con un pincel y
se los extienden en el
portaobjetos y se dejan
secar para su posterior
coloración.
Se debe extraer
toda la parafina
del tejido y
aclararlo
Nuevamente. Se
utiliza xilol.
se debe hidratar el tejido ya
que la mayoría de los
colorantes son de base
acuosa. Para ello se coloca
el portaobjeto en soluciones
de etanol de
concentraciones
decrecientes

7. Es un completo complejo físico-
químico que les confiere color a los
tejidos durante tiempos prolongados.
Se clasifican en:
1. · Básicos: por ejemplo, azul de
metileno, hematoxilina.
2. · Ácidos: donde la molécula de sal
que colorea es el ácido como por
ej. La eosina
3. · Neutros: donde las dos partes
de la solución salina proporcionan
color ej. El eosinato de azul de
metileno.

8. Para preparar los
preparados por tiempo
prolongado. Se
sumerge el preparado
en soluciones de etanol
de graduación
crecientes
Se utiliza xilol o
benzol, y sirve para
diluir la resina
adhesiva
Utilizada para pegar
el cubre objeto.
se cubre el corte con
un delgado vidrio (el
cubreobjeto) que se
adhiere con resina
(bálsamo de Canadá) y
permite su uso
prolongado.

9. COLORANTES
Son sustancias químicas que le van a dar color a otros cuerpos
de manera selectiva
Ácidos BÁSICOS NEUTROS
Carga negativa
(aniónicos)
Eosina
Fucsina acida
Acido pícrico
Acido azoico y diazoico
Carga positiva
(catiónicos)
Hematoxilina
Azul de metileno
Azul de toluidina
Carga positiva
y negativa
Son sales en las que tanto la
parte básica
como la parte ácida
proporcionan color.
Por ejemplo, el eosinato de
azul de metileno

11. TINCION USO
HABITUAL
CELULA TIPICA ERITROCITOS FIBRAS DE
COLAGENO
TINCIONES
ESPECIFICAS
NUCLEO CITOPLASMA
HEMATOXILI
NA
Tinción
general con
la eosina
Azul

12. TINCION USO
HABITUAL
CELULA TIPICA ERITROCITOS FIBRAS DE
COLAGENO
TINCIONES
ESPECIFICAS
NUCLEO CITOPLASMA
EOSINA Tinción
general con
la
hematoxilina
Rosa Rojo
anaranjado
Rosas

13. Páncreas
Hematoxilina Eosina
Hematoxilina:
Colorante básico (Basófila)
Azul Violeta o Intenso: Núcleo celular,
Ribosomas, RER.
Eosina:
colorante acido (Acidofilo)
Rosa o rosa rojizo
citoplasma, fibras de colágeno
CARGA
+
CARGA
-

14. PANCREAS
Tiene unas celulitas que se llaman células acinares que
tienen como características una acidófila y basófila

15. MORADO VIOLETA AZUL
CELULAS CEBADAS
Se utiliza para cortes muy delgados
Muchas
cargas
es decir, es capaz de dar color
diferente a diferentes
estructuras
Carga -
Histamina
Heparina
Núcleo
citoplasma

16. Azul: mielina (conjunto de
proteínas que recubren los
nervios del SN
MORADO: Otras células o
fibras sin mielina
Se utiliza para evidenciar la mielina
que recubre los nervios

17. TINCION USO
HABITUAL
CELULA TIPICA ERITROCITOS FIBRAS DE
COLAGENO
TINCIONES
ESPECIFICAS
NUCLEO CITOPLASMA
TRICROMICA
AZÁN DE
HEIDENHAIN
En la
distinción
entre células
y matriz
extracelular
Purpura
Rojizo
Rosa Rojo Azul Fibras
musculares:
Rojo
Cartílago y
Matriz Ósea:
Azul Oscuro
Pulmón teñidas con azán de heidenhain. En la imagen de pulmón se puede observar como hay núcleos teñidos
con diferente coloración, desde rojo oscuro a gris pálido, pasando por el naranja.
AZÁN DE HEIDENHAIN

18. Muestra de tejido de una lengua
teñida con colorante TRICRÓMICO DE
MASSON
Tricrómico de
Masson
• Núcleo: Morado/ Café
• Fibras musculares: Rojo
• Fibras de Colágena: Azul
Se utilizaparadiferenciarmúsculoy tejidoconectivo
(colágeno)

19. LENGUA
ESÓFAGO

20. TINCION USO
HABITUAL
CELULA TIPICA ERITROCITOS FIBRAS DE
COLAGENO
TINCIONES
ESPECIFICAS
NUCLEO CITOPLASMA
Tricomica de
Gormori
Tejidos
conjuntivos y
muscular
Azul
grisaceo
Rojo Rojo Verde

21. TINCION USO
HABITUAL
CELULA TIPICA ERITROCIT
OS
FIBRAS DE
COLAGENO
TINCIONES
ESPECIFICAS
NUCLEO CITOPLASM
A
TRICROMI
CA DE
MALLORY
TEJIDO
CONJUNTIV
O
ROJO ROJO
CLARO
ANARANJAD
O
AZUL
OSCURO
Queratina (naranja)
Cartílago (Azul)
Matriz Ósea(Azul
oscuro)
Fibras musculare
(ROJO)
TRICROMICA DE
MALLORY

23. • FROTIS SANGUINEOS
• MEDULA OSEA
POLICROMÁTIC
A
Se obtienen mediante la mezcla de
colorantes básicos (azul de
metileno), que se tiñen de color
azul, y colorantes ácidos (eosina),
que se tiñen de color rojo.

24. TINCION USO
HABITUAL
CELULA TIPICA ERITROCITOS FIBRAS DE
COLAGENO
TINCIONES
ESPECIFICAS
NUCLEO CITOPLASMA
Elastica de
Weigert
Fibras
elásticas
Negro
Azulado
- - - Fibras
elásticas,
negro
azulado
ELASTICA DE WEIGERT

25. TINCION USO HABITUAL CELULA TIPICA TINCIONES
ESPECIFICAS
NUCLEO CITOPLASMA
Tinción
Argéntica
Fibras
Reticulares y
fibras nerviosas
- - Fibras
reticulares:
Negro parduzco
Fibras
nerviosas:
Negro

26. TINCION USO
HABITUAL
CELULA TIPICA ERITROCITO
S
FIBRAS DE
COLAGENO
TINCIONES ESPECIFICAS
NUCLEO CITOPLASM
A
ORCEIN
A
Fibras
Elásticas
Purpura
Azulado
Rojo
brillante
Rosa
Rojizo
Fibras Elásticas (Pardo
Oscuro)
Gránulos de mastocitos
Orceína

27. TINCION DE GRAM
Diagnóstico
de
enfermedad
es
bacterianas
La tinción de Gram es de color púrpura. Cuando la tinción se combina con la bacteria en una
muestra, las bacterias pueden seguir de color púrpura o volverse rosadas o rojas. Si se
mantienen púrpura, son grampositivas. Si se vuelven rosadas o rojas, son gramnegativas.

28. HISTOLOGÍA DEL SISTEMA
UROGENITAL

29. CÁPSULA: COMPUESTA POR
TEJIDO CONECTIVO COLÁGENO
DENSO.
SENO RENAL: OCUPADO POR
TEJIDO CONECTIVO LAXO, CON
ADIPOCITOS, ABUNDANTES.
CORTEZA: LA CUAL
NATURALMENTE PRESENTA UN
COLOR ROJO OSCURO Y
GRANULADO.
8 PIRÁMIDES RENALES:
PRESENTAN UN ESTRIADO
CARACTERÍSTICO DESDE LA
BASE HASTA LA PAPILA.
MÉDULA TIENE EL DOBLE DE
ESPESOR COMPUESTA POR
ESTRUCTURAS MÁS CLARAS
RIÑON

30. No hay una tinción
específica que se utilice en
el sistema excretor en
particular. Sin embargo, en
algunos casos, se pueden
utilizar tinciones generales
como la tinción de
hematoxilina-eosina para
visualizar los tejidos y
células del sistema
excretor. También se
pueden utilizar tinciones
específicas para marcar
ciertas estructuras, como la
tinción de PAS (ácido
periódico de Schiff) para
TINCIÓN DE SISTEMA
EXCRETOR

31. CAPA MUCOSA: REVESTIDA
POR EL EPITELIO DE
TRANSICIÓN (UROTELIO).
EPITELIO DE TRANSICIÓN
ESTRATIFICADO.
LÁMINA PROPIA:
COMPUESTA DE TEJIDO
CONECTIVO DE COLÁGENO
DENSO.
MUSCULAR: CAPA
LONGITUDINAL INTERNA,
CIRCULAR MEDIA Y
LONGITUDINAL EXTERNA.
COMPUESTO POR CELULAS
MUSCULARES LISAS
VEJIGA URINARIA

32. OVARIO

33. RECUBIERTO POR EL
MESOTELIO.
RODEADO POR UNA GRUESA
CÁPSULA DE TEJIDO
CONECTIVO TÚNICA
ALBUGINEA
CÉLULAS DE LEYDIG:
FUNCIÓN ENDOCRINA
COMPUESTA DE CÉLULAS
EPITELOIDES.
TÚBULOS SEMINEFROS:
RODEADA POR UNA
MEMBRANA BASAL GRUESA Y
POR 3-4 CAPAS DE CÉLULAS
APLANADAS CONTRACTILES
DENOMINADAS CÉLULAS
MIOIDES.
TÚBULOS REVESTIDOS POR
TESTÍCULO

34. VAGINA
EPITELIO ESTRATIFICADO
PLANO CON TRES ZONAS:
PROFUNDA O MEMBRANA
BASAL CÉLULAS CILÍNDRICAS,
INTERMEDIA CÉLULAS
APLANADAS O NAVICULARES
Y EXTERNA VARIAS CAPAS
APLANADAS.
MUCOSA: FORMA
ABUNDANTES PLIEGUES
TRANSCERSALES (PLIEGUES DE
LA VAGINA)
LÁMINA PROPIA: TEJIDO
CONECTIVO LAXO CELULAR
MUSCULAR MÚSCULO LISO
ADVENTICIA: TEJIDO
CONECTIVO LAXO QUE

35. SE COMPONE DE TEJIDO
CAVERNOSO O ERÉCTIL.
CUERPO CAVERNOSO:
RODEADO POR UNA GRUESA
CÁPSULA DE TEJIDO
CONECTIVO DENSO (TÚNICA
ALBUGINEA)
ESTA SE FUSIONA PARA FORMA
EL TABIQUE MEDIO DEL PENE.
DENTRO DE ESTA SE
ENCUENTRA UN SISTEMA
ESPONJOSO DE CAVIDADES
( LAS CAVERNAS REVESTIDAS
POR EL ENDOTELIO)
CUERPO ESPONJOSO RODEADO
POR LA TÚNICA ALBUGINEA.
Y LAS VEZ TAMBIÉN SE PUEDE
OBSERVAR LA URETRA.
PENE

36. 1. Pombal, M. M. P. M. M. Á. (s. f.-b). Tipos celulares. Mastocito. Atlas de Histología Vegetal y Animal.
https://mmegias.webs.uvigo.es/8-tipos-celulares/mastocito.php
2. Laguna, M., DDS. (2023, 30 octubre). Cómo examinar los cortes histológicos. Kenhub.
https://www.kenhub.com/es/library/estrategias-de-aprendizaje/como-examinar-los-cortes-histologicos
3. T. NERVIOSO. (2023, 4 julio). ATLAS DE HISTOLOGÍA. https://itshistology.com/t-nervioso/
Referencias bibliográficas
4. Pombal, M. M. P. M. M. Á. (s. f.). Técnicas histológicas. 1. Introducción. Atlas de Histología Vegetal y animal.
https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/1-introduccion.php
5. Langman - Sadler TW Embriología Médica- Langman Edición 14ª Ed. Wolters Kluwers. 2019.
6. Geneser F, Brüel A, et al. Geneser Histología. Edición: 4ª Ed. Panamericana. 2015.
7. Junqueira LC, Carneiro J. Histología Básica Texto y Atlas. Edición: 12ª Ed. Panamericana. 2015.
8. Kuhnel, W. Atlas Color de Citología e Histología. 11ª Ed. Ed. Panamericana. 2005.