Trabajo realizado por los alumnos Agustina Matavós, María Ethel Irrera, Alejandro Chagaray, María Vistoria Pastor y Julio Galarza para la asignatura Química Orgánica I del Profesorado en Química del Inst Sup del Prof Joaquin V González. Agosto 2013
1. Química Orgánica I
Cromatografía
• Chagaray, Alejandro
• Galarza, Julio
• Irrera, María Etel
• Matavós, Agustina
• Pastor, María Victoria
2. Objetivos:
•Comprender el fundamento y las aplicaciones de las diferentes técnicas
cromatográficas.
•Separar una mezcla de colorantes por cromatografía en columna.
•Identificar cada uno de los colorantes por cromatografía analítica en placa
delgada (TLC).
+
3. Paso 1: Elección de la fase móvil
En este paso, se decide cuál será la fase móvil adecuada para la separación de los
componentes de la solución.
Procedimiento
Preparamos los capilares para la siembra
El disolvente elegido debe ser uno en que los componentes de la mezcla
presenten un Rf medio en torno a 0.3-0,5.
Rf= Distancia recorrida por el compuesto / Distancia recorrida por el disolvente
4. 1. Diclorometano
2. Metanol
3. Diclorometano:metanol 3:1
4. Diclorometano:metanol 30:1
Se nos dio cuatro posibles eluyentes:
- Realizamos la siembra en
una placa de sílica gel con la
mezcla de colorantes
- Luego ponemos la placas en contacto con las
FMs y observamos en cual los colorantes
recorrieron una mayor distancia
6. Se observó que en la placa 1, 2 y 4, el azul de metileno no corrió.
Pero en el 3, corrieron los dos compuestos, el rojo de metilo mas
que el azul.
La mezcla de eluyentes, diclorometano y metanol 3:1, es el
disolvente adecuado
Rf= 0,4
7. Paso 2: Armado de la columna cromatográfica
1. Se coloca en un pie universal una columna cromatográfica, o en nuestro
caso una bureta.
8. 2. Se coloca algodón en la base, y por encima de este, la fase fija, en
nuestro caso, silica gel.
9. 3. Se coloca la fase móvil, hasta que sobrepase a la estacionaria.
10. 4. Se realiza la siembra. Se colocaron 0.5 ml de la solución en la fase
estacionaria y se la tapa con un algodón. Y comienza la elusión.
11. 5. Cada tanto, se agrega eluyente, para que no se seque la
fase estacionaria y facilitar la corrida de los compuestos.
12. 6. Se recogen en un mismo recipiente las fracciones que tengan el
mismo contenido.
13. Verificación con testigos puros
Sembramos en dos placas cada una de las sustancias obtenida en un costado de la
misma, en el otro con la sustancia testigo pura y en el medio una mezcla de la
obtenida con la pura. Utilizando la misma fase móvil constatamos que corrían de la
misma manera.
14. Conclusiones
• Por medio de la cromatografía en columna se
logro separar la mezcla de dos colorantes.
• Se pudo concluir que los colorantes eran azul
de metileno y rojo de metilo ya que las
muestras corrieron igual que los testigos.