Este documento describe las características de las candidiasis, una infección micótica causada principalmente por especies del género Candida. Puede manifestarse de forma aguda, subaguda o crónica en diversos órganos y sistemas. Los principales agentes etiológicos son Candida albicans, C. glabrata, C. tropicalis y C. krusei. El diagnóstico requiere la identificación correcta de la especie de Candida a través de técnicas microbiológicas.

1. Es una infección micótica primaria o secundaria causada por miembros del género
Candida.
Las manifestaciones clínicas pueden ser aguda, subaguda o crónica a episódica.
Participación puede estar localizado en la boca, garganta, piel, cuero cabelludo, la
vagina, los dedos, las uñas, los bronquios, pulmones, o el tracto gastrointestinal, o
convertirse en sistémica como en la septicemia, endocarditis y meningitis.
Distribución: En todo el mundo.
Agentes etiológicos: Candida albicans, C. glabrata, C. tropicalis, C. krusei. C.
parapsilosis, C. guilliermondii y C. pseudotropicalis.
Todos están en todas partes y se producen de forma natural en los seres humanos.

2. Cutaneas:
Localizadaas: grandes pliegues, interdigitales y uñas
Difusas: amplias superficiales
Profundas: granulomas candidiasicos
Mucocutaneas:
Mucosa oral: muguet, queilitis, glositis
Mucosa genital: vaginitis, balanitis
Mucosa digestiva: esofagitis, enteritis
Mucosa respiratoria: bronquial , pulmonar
Candidiasis mucocutanea cronica

3. Localizadas
Sistema nervioso central
Endocarditis
Tracto urinario
Artritis y osteitis
Peritoneo, higado, bazo y vesicula biliar
Diseminadas
Candidiasis diseminada cronica o hepatoesplenica
Candidiasis diseminada aguda

4. CUANDO DEBE SER CONSIDERADA UNA
LEVADURA PRODUCTORA DE UNA MICOSIS
Se debe establecer si la levadura aislada está causando infección,
esta colonizando o es sola una contaminación.
Es necesario una correlación entre el examen directo y el
aislamiento de la levadura.
C. neoformans. Tinta china positiva o recuperada de cultivo es
significativo.
C. albicans aisladas de esputos o de orina (chorro del medio), rara
vez patógena.
En pacientes inmunosuprimidos las levaduras aisladas de sitios
estériles es indicativo de infección diseminada con probable
fungemía

5. El diagnóstico se refuerza si en el examen directo o
coloraciones se observan pseudohifas (p/micelio) o
blastosporas (b/conidias) aisladas o gemantes.
Hemocultivos positivos (25-50%) pueden indicar:
Candidemia transitoria debida a colonización de
catéteres.
Candidemia profunda o una invasiva
Hemocultivos negativos no descarta fungemia

6. Aumento de pacientes imunocomprometidos
Mayor utilizacion de procedimientos medicos invasivos
Mayor uso de fluconazol
Sobrevida de pacientes críticos
Mejoramiento de recursos diagnósticos

7. RICHARDS et al.
(EUA)
1993
1o S. coag. neg.
2º Enterobacterias
3o S. aureus
4o Candida sp
5o Enterococcus sp.
6º Outras
Variáveis
AUTOR
Ano
AGENTES
Séries
VINCENT et al.
(EUROPA)
1995
1ºEnterobacterias
2o S. aureus
3o P. aeruginosa
4o S. coag. neg.
5o Candida sp.
6o Outras
PFALLER et al.
(EUA)
1999
1o S. coag. neg.
2o S. aureus
3o Enterococcus sp
4o Candida sp
5o Outras

8. Leucemia ag
Transplantes
Quemados
Cirugia GI
Prematuros
Alto riesgo
Total - admisiones
Factor de riesgo
Antibioticos 1.7
Cateter IV 7.2
Colonizacion
Candida 10.4
Hemodialisis 10.4
Óbito p/
candidíasis
Óbito p/
enfermeda
de base
Candidemia
Candidemia hospitalaria
Indicadores de gravedad
Wenzel. Clin Infect Dis 1995;20:1531-4.
Sobreviven

9. Etiologia de la candidemia:
relevancia de las espécies “no-
albicans”

10. Europa (170)
53
21
12
6
4
1
3
Espécie
C. albicans
C. parapsilosis
C. glabrata
C. tropicalis
C. guilliermondii
C. krusei
Candida spp
USA (203)
56
6
19
7
1
2
6
Canadá (61)
53
23
11
8
--
2
3

11. • Espécies Número (%)
C. albicans 43 (42)
C. parapsilosis 22 (21,3)
C. tropicalis 25 (24,2)
C. glabrata 8 (7,7)
Outras 5 (4,8)

12. Predomina en candidiasis genital, oral y cutánea
(>90%).
En candidemias y enfermedad invasora continúa
siendo la causa más frecuente, pero se ha
observado una disminución del 7%-10% (1997-
2005) en su prevalencia.
También se ha notado disminución de acuerdo con
el incremento en la edad, después de la
exposición a los azoles y en las UCI

13. Se ha incrementado desde 1993, su frecuencia como
causa de candidemia en Norte América.
Se ubica como la segunda especie más frecuente.
La cataloga como un importante oportunista emergente
con gran potencial para desarrollar resistencia a los
antimicóticos, especialmente al fluconazol.
Se la asocia a pacientes mayores de 60 años,
trasplantados de órganos sólidos o con cáncer.
La profilaxis con fluconazol es un factor predisponente.
En latinoamerica esta especie tiene una baja incidencia
(4-6%).

14. Está conformado por tres especies: C. parapsilosis, C. orthopsilosis y C.
metapsilosis.
El complejo es considerado patógeno exógeno y se encuentra como
colonizador transitorio de piel-uñas y, ocasionalmente, de mucosas.
Se asocia a infecciones adquiridas a través de las manos y de los
ambientes hospitalarios e, igualmente, también con nutrición parenteral,
cirugías recientes que requieran catéteres intravenosos y uso de
caspofungina en pacientes con trasplante de células madre.
En Latinoamérica esta especie está distribuida en todos los rangos de
edad, incluyendo neonatos, grupo que es el más frecuentemente
afectado por esta especie en Norteamérica y otras regiones del mundo

15. Es considerada una causa importante de candidiasis invasora en
pacientes con cáncer, especialmente con leucemia, neutropenia
y en trasplante de células madre.
Se ha observado disminución de candidemias por esta especie
con el uso profiláctico de fluconazol en pacientes con cáncer.
Esta especie disminuyó como agente de las candidemias en
Norteamérica del 10%-12% en los años noventa a 7%-8% en el
año 2000.
En América Latina y Asia, su incidencia en candidemia es mayor
del 15%.

16. Es una especie considerada emergente debido al uso profiláctico con
fluconazol
Está asociada a pacientes con neutropenia.
La colonización por esta especie es un predictor de candidemia.
Se trata de un microorganismo multidrogo-resistente debido a que tiene
una resistencia intrínseca al fluconazol,
Tiene una susceptibilidad disminuida a la anfotericina y la fluocitosina que
está además, asociada a alta mortalidad (80%-40%)

17. Genero Candida: mas de 163 espécies - 15 patógenas
Relevancia epidemiológica
Diversidad de susceptibilidad los antifúngicos
Base para definicion de la terapeutica
Necesidad de identificacion correcta y rápida
Importancia de la definicion de la
espécie

18. Para un diagnóstico correcto es necesario seleccionar,
obtener y enviar la muestra adecuada.
Existen condiciones importantes para tener en cuenta, como
sigue: las muestras deben ser recolectadas asépticamente en
frasco estéril con tapa rosca y se deben enviar al laboratorio
a la menor brevedad posible.
Su recolección y transporte varían de acuerdo con el
espécimen y sitio de la infección.
Además, cada espécimen debe estar bien rotulado, debe ir
acompañado de los datos del paciente (nombre completo,
sexo, edad) y datos clínicos (factores de riesgo, tratamiento
con antibióticos o antimicóticos, sospecha clínica), examen
solicitado y nombre, dirección y otra información de contacto
del médico que lo solicita

19. Los aislamientos de Candida spp.
provenientes de sitios corporales no
estériles (orina, secreciones respiratorias)
presentan dificultades en su valoración
pues no permiten establecer un diagnóstico
de candidiasis invasora y aun los cultivos
cuantitativos no logran diferenciar entre
colonización e infección; no obstante,
tienen importancia como factor de riesgo.

20. Criterios morfológicos:
Macroscópicos:
morfología de la colonia
Microscópicos:
Presentación de las levaduras (Blastoconidias, artrosporas
y de pseudomicelios)
Producción de Clamidosporas (Bilis Agar, Agar harina de
maiz)
Tubo germinal

21. •Método clássico
•Métodos comerciales
Métodos disponíbles

23. En medio líquido: Formación de sedimento, anillo o película.
En medio sólido:
Textura: cremosa, mucosa.
Color: blanco a beige; con pigmento carotenoide , naranja a rojo
(Rhodotorula sp., Sporobolomyces sp.), sin pigmento carotenoide
(Metschnikowia pulcherrima).
Superficie : lisa, rugosa, cerebriforme, etc.
Con filamentos o pseudofilamentos :
in vitro : en función del medio utilizado.
in vivo : Cándida spp. (de saprófito a patógeno).
Pseudofilamentos :
los brotes se alargan y producen cadenas ramificadas, sin separación.
Filamentos verdaderos : el brote crece continuamente.

25. Examen microscópico directo
fresco

26. Examen microscópico directo
fresco

27. Examen microscópico directo
fresco

29. Artrosporas: Esporas formadas por ciertos tipos
levaduras con filamentos verdaderos. Trichosporon.
Clamidosporas: C. albicans, esporas grandes, redondas, de
pared gruesa.
Balistosporas: Sporobolomyces esporas producidas de una
protuberancia de la célula madre, son expulsados a gran
distancia.

30. Colonia
Rugosa Mucoide Anaranjada
Blanca/Biege
Cremosa
Seca
Achatada
Macromorfologia en SGA
Candida Trichosporon
Geotrichum
C. rugosa
Cryptococcus Rhodotorula C. krusei

31. Aspecto del cultivo en ágar Sabouraud-dextrose

32. Tubo germinativo
C. albicans: Formacion de tubo germinativo en blastoconídios expuestos a
suero humano o animal, luego de 2-3 h de incubacion a 37oC

33. Tubo germinativo
Negativo Positivo
Outras espécies de
levedura
C. albicans
C. Dubliniensis
Crece a 42ºC

34. Microcultivo
Técnica de cultivo en lamina o placa de Petri sobre medio
ágar-harina de maiz con Tween 80
Estímula la formacion de pseudohifas a baja tension de O2
Visualizacion de: artroconídios, blastoconídios,
clamidoconídios, pseudohifas e hifas verdaderas
Presencia y disposicion entre 48 a 96 horas de incubacion

35. Microcultivo

36. Examen microscópico directo
Hemocultivo
Giemsa

37. Examen microscópico de
colonias levaduriformes

38. Cryptococcus sp
Saccharomyces cerevisiae
Pichia membranifaciens Candida globosa

39. Saccharomyces cerevisiae
Examen microscópico de
colonias levaduriformes

40. Candida krusei
Examen microscópico de
colonias levaduriformes

41. Trichosporon spp
Trichosporon cutaneum
Blasto-artroconidios
Examen microscópico de
colonias levaduriformes

42. Examen microscópico de
colonias levaduriformes

43. 25ºC por
2 a 7 días
 en agar harina de maíz - Tween 80
 agar arroz - Tween 80
Microcultivo ( Dalmau, 1929 ) Estudio micromorfológico de levaduras

50. Pseudohifas + Blastoconídios
Sin clamidoconídios Con clamidoconídios
Otras espécies de
levadura
C. albicans
C. dubliniensis
Microcultivo:

51. Pseudohifas, blastoconídios, Clamidoconídios
C. albicans
C. dubliniensis

52. 
Termotolerancia (42 - 45oC)
C. albicans (+) C. dubliniensis (-)
Caldo NaCl hipertonico
C. albicans (+) C. dubliniensis (-)
C. albicans C. dubliniensis
Alves SH, Milan EP et al, Diagn Microbiol Infect Dis, 43:85-86, 2002.

55. Pseudohifas
Blastoconídios
Sin clamidoconidios
Candida spp
Pruebas bioquímicas
Microcultivo:

56. Blastoconídios sin pseudohifas o c/
pseudohifas rudimentares

57. Microcultivo: ausencia de pseudohifa
Sin cápsula y urease (-) Con cápsula y urease (+)
C/ ascosporas S/ ascosporas
Cryptococcus
Rhodotorula
Candida glabrata
Pichia
Hansenula
Saccharomyces

58. Busqueda de cápsula
Cryptococcus spp

59. Produccion de ureasa
Uréa de Christensen  lectura
de 24-48h
Interpretacion:
Trichosporon spp  variáble
Cryptococcus spp  positivo
Candida spp  negativo (exceto
C. lipolytica e eventualmente C.
krusei)

60. Reproduccion sexuada
Estruturas de reproduccion sexuada = ascosporos
Medios que estimulan la produccion de ascosporos
V8: 7-10 dias
Ágar extrato de malte,
ágar acetato de sódio
Inoculacion de levadura en medio de cultivo apropriado
Frotis de cultivo teñido por la técnica de ácido-
resistencia visualizacion de los ascos que se colorean de
verde
Generos: Saccharomyces, Pichia, Hansenula, etc.

61. Artroconídios

62. Artroconídios
C/ blastoconídios
y ureasa (+)
S/ blastoconídios
y ureasa (-)
GeotrichumTrichosporon
Microcultivo:

63. Esquema de Identificacion
Leveduras
Crescimento rápido no estimulado por lipídios
Colonias alaranjadas
Malassezia spp.
Crescimento lento estimulado por lipídios
Colonias blancas
Rhodotorula spp. Blastoconídios Artroconídios
Ascosporas (-)
Cápsula (+)
Ascosporas (+)
Urease (+) Urease (-)
Cápsula (-)
Leveduras sexuadas
Saccharomyces spp.
Pichia spp.
Candida spp.
Identificação baseada em
Assimilação
Fermentação
Cryptococcus spp
Trichosporon spp. Geotrichum spp.

64. Caracteres bioquímicos
Permite la diferenciaccion el nível de espécie
Características metabólicas inherentes a cada
espécie de levadura
Cryptococcus
Rhodotorula
Trichosporon Geotrichum Sacharomyces
Pichia
HansenulaCandida

65. Asimilacion de carbohidratos (Auxanograma)
Capacidad de asimilar determinado carbohidrato como
única fuente de carbono para mantener la viabilidad celular
Medio sólido sin fuentes de carbono, con inóculo a ser
testado
Adicionarse el azúcar que se desea testar  15 azúcares
Despues incubacion (24 - 72h), la presencia de crecimento
visíble (turvidez) indica asimilacion (+)

66. Capacidad de utilizar determinado
azúcar para producion de energia
en baja tension de O2 con
producion de etanol y gás (CO2)
Medio basal líquido conteniendo
solucion de un azúcar + inóculo  6
azúcares
Visualizacion de la formacion de
CO2 en tubos de Durham invertidos
 Lectura: 24h - 14 dias

67. Asimilacion de nitrogeno
Algunas levaduras poseen capacidad de asimilar nitrogeno
inorganico a forma de nitrato (lectura: 24-48h)
Medio sólido basal conteniendo fuente de C, mas sin fuente
de N + inóculo
Agreguese nitrato de potássio en el campo y peptona (control
positivo) en otro campo - presencia de crecimiento visíble
(turbidez) indica asimilacion (+)

68. Identificacion de las principales levaduras de interes clínico
Ph=pseudo-hifa; Gli=glicose; Sac=sacarose; Gal=D-galactose; Raf=rafnose; Xil=D-xilose;
Cel=celobiose; Tre=trealose; Dul=dulcitol; Mal=maltose; V=variáble
-
-
+
+
+
+
Mal
-+-----+pseudohifas
(-)
C.glabrata
-------+
pseudohifas/
blastoc.
alongados
C. krusei
++++++++
pseudohifas
finas
Blastocon.
C. guilliermondii
-+-+-+++
pseudohifas
curvas/
células
gigantes
C. parapsilosis
-+V+-+++
pseudohifas/Bl
astoc en
cadenas
C. tropicalis
-+-+-+V+Clamidocon.C. albicans
DulTreCelXilRafGalSacGli
Assimilacion
MorfologiaLevaduras

69. Limitaciones del método clásico
Técnica laboriosa
Consumo de tiempo
Requiere profesional experimentado

70. Requisitos
• Padronizados
• Simples
• Rápidos
• Fácil lectura e
interpretacion
• Bibliografía
• C0sto-beneficio
Métodos comerciales
Objetivos
• Facilitar el trabajo
de laboratório
• Ampliar el
espectro de
diagnóstico
• Mejorar el
diagnóstico
• Identificacion
precoz
• Apoyar al clínico

71. Crecimiento en CHROMAgar
Candida :
C. albicans (verde)
C. tropicalis (azul)
C. krusei (rosa y rugosa)
C. parapsilosis (rosácea-lisa)
Prototheca wickerhamii (crema)
CHROMAgar Candida

73. 1.Enzimáticos
Medios cromogénicos:
CHROMagar Candida®
Cromogen Albicans ®
Candida ID ®
Albicans ID2 ®
CandiSelect ®
Fluoroplate Candida ®
Agar SDCA-MUAG ®

74. Métodos
Vantajas
 Rapidez en la identificacion de espécie o
espécies mas freduentes en la rutina
 Posibilidad de aislamiento en cultivos mixtos
 Facilidad de lectura y simplicidad de
procedimiento
Limitaciones
 Especificidad (variáble conforme o método)
 Costo (kit e leitura UV)
 Necessidad de identificacion de espécies no
albicans

75.  Galerias API:
ID 32C
API 20C AUX
 RapID Yeast Plus
System
 Auxacolor
 Fungifast I Twin
 Candifast
Métodos manuales de
identificacion:
J Med Microbiol,50:1105-10,2001; Med Mycol,37(2):11-7,1999;
J Clin Pathol,52(4):271-3,1999

76. ID32C
Métodos Manuais

77. AUXACOLOR®
C.Neg GLU MAL. SAC. GAL. LAC. RAF. INO.
CEL. TRE. ADO. MEL. XYL. ARA. ACT. POX.

78. Pruebas adicionales
Microcultivo
Cápsula
Pigmentação

79.  Sistemas semi-automáticos:
 API 20C AUX®
 Galería ID 32C®
 Sistema Vitek ®

80. Asimilación de azúcares ID 32C (API)

81. Microscan
WalkAway - 40
WalkAway - 96
Vitek YBC
Vitek 2 ID-YST
Clin Microbiol Rev, 5(3):302-27,1992; JCM,34(10):2408-
10,1996; JCM,36(5):1197-200,1998; J Clin Pathol,52(4):271-
3,1999; JCM,37(6):1967-70,1999
Métodos automatizados de
identificacion

82. • Sistemas automáticos:
• Sistema Vitek 2 ID-YST Sistem
® (Identificación y sensibilidad)
• Sistema Biolog YT Microplate®
• Rapid Yeast Identification Panel
Micro Scan®

83. Vitek

84. VITEK YBC system (bio Mérieux.Vitek)

85.  Pruebas Rápidas
RapID Yeast Plus
System®Fongiscreen 4H®

86.  Criterios Inmunológicos:
Bichro-latex albicans® Krusei-color®

87. Cuidados en la utilizacion de sistemas comerciales
manuales y automatizados para la identificacion de
levaduras
Evaluar costo x benefício antes de adotar el
método comercial
Evaluar la correlacion del sistema comercial con el
método clásico
Guardar los kits a temperatura adequada,
respetando su plazo de validez
Realizar adecuado mantenimiento del equipo
Familiarizarse com los procedimientos y patrones
de lectura

88. Cuidados en la utilizacion de sistemas comerciales
manuales y automatizados para la identificacion de
leveduras
Certificarse sobre cuales espécies son identificadas por cada
método
Cuidado para obtener inóculos puros e viábles
Utilizar siempre microcultivo y otros testes adicionales.
Realizar control de calidad con organismos controle.
Conocer las espécies problema.

89. SUCEPTIBILIDAD
ANTIFUNGICA
METODO DE DIFUSION EN AGAR CON
LECTURA AUTOMATIZADA

90. Presionar el hisopo contra el
borde interno del tubo para
remover el exceso de líquido
antes de inocular
Asegurese de usar hisopos de
algodón y no de dacrón.

91. Después de 15 mínutos de haber ajustado el inoculo cubrir el agar
completamente con el hisopo en 3 diferentes direcciones. No
presione el hisopo sobre el agar.

92. Deje desaparecer la humedad de la superficie del
agar antes de colocar los discos. Asegurese que cada
disco quede firme sobre el agar. Use un dispensador
de discos si es posible.

93. Incube los placas por 18 horas a 35°C. El crecimiento sobre el agar
debe ser uniforme, formando una capa confluente. Para C neoformans
incubación por 72 horas.

95. TECNOLOGIA
Sistema lector de placas mediante análisis digital
de imagen
Cámara
Tarjeta de Vídeo
Computador
BIOMIC®

96. Como realizar y leer pruebas de
difusión en Agar con BIOMIC®

97.  Método M27-A de los NCCLS
 Método propuesto por el EUCAST
 Métodos alternativos y comercializados
◦ Sensititre YeastOne
◦ Etest
◦ Fungitest
◦ Difusión de disco

100. No hay tecnología y no hay máquina que substituyan
al conocimiento, la experiencia y la sensibilidad
del ser humano.
Solo él es capaz de interpretar, analizar y juzgar
correctamente.
Armando Fonseca
Presidente - SBPC/ML