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TINCIÓN DE GRAM
  DEFINICIÓN   FUNDAMENTO



   PASOS         TÉCNICA



                       Page 1
TINCIÓN DE GRAM: DEFINICIÓN

La tinción de Gram es una tinción diferencial
muy utilizada en Bacteriología para observar
bacterias en muestras clínicas.
Debe su nombre a Christian Gram (1984)
 Morfología bacteriana
 Diferenciación bacteriana

  Menú
Principal
                                  Page 2
TINCIÓN DE GRAM: FUNDAMENTO


El fundamento de la tinción de Gram se basa
en las diferencias de la pared celular de las
bacterias Grampositivas y Gramnegativas.




  Menú
Principal
                                 Page 3
TINCIÓN DE GRAM: FUNDAMENTO


La pared celular de las Bacterias Gram positivas
posee una gruesa capa de peptidoglicano
(retiene el complejo colorante-mordiente)y dos
clases de ácido teicoico



  Munú
Principal
                                    Page 4
TINCIÓN DE GRAM: FUNDAMENTO




  Menú
Principal
                        Page 5
TINCIÓN DE GRAM: FUNDAMENTO


La pared celular de las bacterias Gram negativas
tiene una capa de peptidoglucano más fina
(facilita la salida del complejo colorante-
mordiente)



  Menú
Principal
                                   Page 6
TINCIÓN DE GRAM: PASOS




  Menú
Principal
                         Page 7
TINCIÓN DE GRAM: PASOS



El cristal violeta penetra en todas las células
bacterianas a través de la pared bacteriana




  Menú
Principal
                                    Page 8
TINCIÓN DE GRAM: PASOS


El lugol actúa como mordiente haciendo que el
cristal violeta se fije con mayor intensidad a la
pared de la célula bacteriana.
El I2 entra en las células y forma un complejo
insoluble en solución acuosa con el cristal violeta.


     Menú
   Principal
                                       Page 9
TINCIÓN DE GRAM: PASOS

La mezcla de alcohol-acetona que se agrega,
sirve para realizar la decoloración, ya que en
la misma es soluble el complejo I2-cristal
violeta.
Los organismos Gram positivos no se
decoloran, mientras que los Gram negativos sí
lo hacen.
  Menú
Principal
                                  Page 10
TINCIÓN DE GRAM: PASOS

Para poner de manifiesto las células Gram
negativas se utiliza una coloración de
contraste. Habitualmente es un colorante de
color rojo, como la safranina o la fucsina.
Después de la coloración de contraste las
células Gram negativas son rojas, mientras que
las Gram positivas permanecen azules.

  Menú
Principal
                                  Page 11
TINCIÓN DE GRAM: TÉCNICA
   Realizar un frotis fino.
   Dejar secar.
   Fijar con metanol.
   Añadir Violeta de Genciana (1 minuto)
   Lavar con agua.
   Añadir Lugol
   Lavar con agua
   Decolorar con alcohol-acetona
   Lavar con agua
   Añadir colorante de contraste (1 minuto)
   Lavar con agua
   Dejar secar


  Menú
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                                               Page 12

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Tinción de gram

  • 1. TINCIÓN DE GRAM DEFINICIÓN FUNDAMENTO PASOS TÉCNICA Page 1
  • 2. TINCIÓN DE GRAM: DEFINICIÓN La tinción de Gram es una tinción diferencial muy utilizada en Bacteriología para observar bacterias en muestras clínicas. Debe su nombre a Christian Gram (1984)  Morfología bacteriana  Diferenciación bacteriana Menú Principal Page 2
  • 3. TINCIÓN DE GRAM: FUNDAMENTO El fundamento de la tinción de Gram se basa en las diferencias de la pared celular de las bacterias Grampositivas y Gramnegativas. Menú Principal Page 3
  • 4. TINCIÓN DE GRAM: FUNDAMENTO La pared celular de las Bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglicano (retiene el complejo colorante-mordiente)y dos clases de ácido teicoico Munú Principal Page 4
  • 5. TINCIÓN DE GRAM: FUNDAMENTO Menú Principal Page 5
  • 6. TINCIÓN DE GRAM: FUNDAMENTO La pared celular de las bacterias Gram negativas tiene una capa de peptidoglucano más fina (facilita la salida del complejo colorante- mordiente) Menú Principal Page 6
  • 7. TINCIÓN DE GRAM: PASOS Menú Principal Page 7
  • 8. TINCIÓN DE GRAM: PASOS El cristal violeta penetra en todas las células bacterianas a través de la pared bacteriana Menú Principal Page 8
  • 9. TINCIÓN DE GRAM: PASOS El lugol actúa como mordiente haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta. Menú Principal Page 9
  • 10. TINCIÓN DE GRAM: PASOS La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloración, ya que en la misma es soluble el complejo I2-cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos sí lo hacen. Menú Principal Page 10
  • 11. TINCIÓN DE GRAM: PASOS Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen azules. Menú Principal Page 11
  • 12. TINCIÓN DE GRAM: TÉCNICA  Realizar un frotis fino.  Dejar secar.  Fijar con metanol.  Añadir Violeta de Genciana (1 minuto)  Lavar con agua.  Añadir Lugol  Lavar con agua  Decolorar con alcohol-acetona  Lavar con agua  Añadir colorante de contraste (1 minuto)  Lavar con agua  Dejar secar Menú Principal Page 12