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“AÑO DEL FORTALECIMIENTODE LA SOBERANIA NACIONAL”
INFORMEN° 002-2022-JCCH-ITS-DAC
DE : Livia hoyos Sagastegui,Mayra Rivas
Natalia Sánchez, María alejo, Betsy
Carmona
PARA : T.L JUAN JOSE HUAMAN COLLAZOS
ASUNTO : TRABAJODE LA TINCIÓNDE ZIELH-
NEELSENEN LABORATORIO
FECHA : Lima- comas 20 de mayo de 2022
I. ANTECEDENTES:
En 1883, El agente etiológico de la tuberculosis fue descrito por: HEINRICH
HERMAN ROBERT KOCH, basándose en la característica de las micobacterias,
desarrollo una de las primeras tinciones utilizando azul de metileno seguido de la
tinción de BISMARCK. Sin embargo, fueron los trabajos de paúl Ehrlich los que
definieron la resistencia a la coloración por alcohol-ácidos las últimas
modificaciones ala tinción fueron realizadas por los científicos alemanes FRANZ
ZIEHL Y KARL ADOLF NEELSEN.
II. FUNDAMENTO:
Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos (ácidos
micólicos) que tiene la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido,
después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-
alcohol resistentes. Las micobacterias como tuberculosis se caracterizan por sus
propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Nielsen
requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que
contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una
nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede
salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energía de las
moléculas del colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las
bacterias que resisten la decoloración son de color rojo y las que no, se ven de
color azul ya que se utiliza (azul de metileno) como tinción de contraste. Esta muy
influenciado con la enfermedad de tuberculosis.
MATERIALES USADOS PARA LA TINCION
Reactivos:
Fucsina fenicada
Alcohol/hcl
Azul de metileno
Agua destilada
Otros:
Frasco estéril
Portaobjetos
Mechero
EPP
Campo estéril
Paleta baja lengua
Aceite de inversión
METODOLOGIA DE EXTENDIDO
Primero obtener 1ml de esputo del
paciente en un frasco estéril.
Desengrasar la lámina porta objeto
con alcohol de 70 y dejar secar a
temperatura ambiente
Flamear la lámina ,pasando por el
mechero tres veces
Tener lista las paletas
Obtener una cantidad de muestra del
frasco con esputo
Hacer el extendido en la lamina
Dejar secar la lámina a temperatura
ambiente
Aplicamos la fucsina fenicada y
cubrimos toda la muestra
Calentar suavemente hasta que inicie
vapor, por debajo de la laminas
durante 5 minutos
Dejar enfriar y Luego enjuagamos con
agua destilada
Cubra con alcohol acido por 1 minuto
o mas si es necesario
Luego lave suavemente con agua
destilada
Cubrimos la muestra con azul de
metileno por 2 minuto
Lave suavemente con agua destilada
Dejamos secar la lamina
Aplicamos aceite de inversión ala
muestra para poder visualizar mejor
OBSERVACION
El extendido no fue realizado de manera homogénea, por lo tanto, no se pudo
teñir la muestra.
No se pudo observar bacterias.
III. CONCLUSION:
La tinción de Ziehl-Neelsen es la técnica comúnmente usada en el diagnostico
rutinario de tuberculosis.es una técnica rápida, fácil y de bajo costo, lo que permite
que pueda realizar en casi cualquier laboratorio clínico. Esta tinción permite
diferenciar a las bacterias en dos grupos: aquellas que son capaces de resistir la
coloración con alcohol-acido y aquellos que no lo son.

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  • 1. “AÑO DEL FORTALECIMIENTODE LA SOBERANIA NACIONAL” INFORMEN° 002-2022-JCCH-ITS-DAC DE : Livia hoyos Sagastegui,Mayra Rivas Natalia Sánchez, María alejo, Betsy Carmona PARA : T.L JUAN JOSE HUAMAN COLLAZOS ASUNTO : TRABAJODE LA TINCIÓNDE ZIELH- NEELSENEN LABORATORIO FECHA : Lima- comas 20 de mayo de 2022 I. ANTECEDENTES: En 1883, El agente etiológico de la tuberculosis fue descrito por: HEINRICH HERMAN ROBERT KOCH, basándose en la característica de las micobacterias, desarrollo una de las primeras tinciones utilizando azul de metileno seguido de la tinción de BISMARCK. Sin embargo, fueron los trabajos de paúl Ehrlich los que definieron la resistencia a la coloración por alcohol-ácidos las últimas modificaciones ala tinción fueron realizadas por los científicos alemanes FRANZ ZIEHL Y KARL ADOLF NEELSEN. II. FUNDAMENTO: Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos) que tiene la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido- alcohol resistentes. Las micobacterias como tuberculosis se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Nielsen
  • 2. requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energía de las moléculas del colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloración son de color rojo y las que no, se ven de color azul ya que se utiliza (azul de metileno) como tinción de contraste. Esta muy influenciado con la enfermedad de tuberculosis. MATERIALES USADOS PARA LA TINCION Reactivos: Fucsina fenicada Alcohol/hcl Azul de metileno Agua destilada Otros: Frasco estéril Portaobjetos Mechero EPP Campo estéril Paleta baja lengua Aceite de inversión
  • 3. METODOLOGIA DE EXTENDIDO Primero obtener 1ml de esputo del paciente en un frasco estéril. Desengrasar la lámina porta objeto con alcohol de 70 y dejar secar a temperatura ambiente Flamear la lámina ,pasando por el mechero tres veces Tener lista las paletas Obtener una cantidad de muestra del frasco con esputo Hacer el extendido en la lamina Dejar secar la lámina a temperatura ambiente
  • 4. Aplicamos la fucsina fenicada y cubrimos toda la muestra Calentar suavemente hasta que inicie vapor, por debajo de la laminas durante 5 minutos Dejar enfriar y Luego enjuagamos con agua destilada Cubra con alcohol acido por 1 minuto o mas si es necesario Luego lave suavemente con agua destilada
  • 5. Cubrimos la muestra con azul de metileno por 2 minuto Lave suavemente con agua destilada Dejamos secar la lamina Aplicamos aceite de inversión ala muestra para poder visualizar mejor
  • 6. OBSERVACION El extendido no fue realizado de manera homogénea, por lo tanto, no se pudo teñir la muestra. No se pudo observar bacterias. III. CONCLUSION: La tinción de Ziehl-Neelsen es la técnica comúnmente usada en el diagnostico rutinario de tuberculosis.es una técnica rápida, fácil y de bajo costo, lo que permite que pueda realizar en casi cualquier laboratorio clínico. Esta tinción permite diferenciar a las bacterias en dos grupos: aquellas que son capaces de resistir la coloración con alcohol-acido y aquellos que no lo son.