El documento explica cómo diferenciar bacterias Gram positivas de Gram negativas a través de la tinción de Gram. El procedimiento involucra extender la muestra, fijarla, teñirla con cristal violeta y lugol, decolorarla con alcohol, y contrateñirla con safranina para que las bacterias Gram positivas se vean violetas y las Gram negativas se vean rosadas bajo el microscopio.

1. TINCION DE GRAM
DRA. ANDREA BETANCOURT ZAMBRANA

2. OBJETIVO
-Aprender a diferenciar una bacteria Gram positiva de una
Gram negativa.
-Comprender el fundamento de la tinción de Gram.

3. FUNDAMENTO
Los fundamentos de la técnica se basan en las diferencias entre las paredes celulares
de las bacterias gram positivas y gram negativas.

4. MATERIALES
Reactivos:

5. MATERIALES
Portaobjetos

6. MATERIALES
Mechero

7. MATERIALES
Soporte

8. PROCEDIMIENTO
Se procede a extender la
muestra que se desea teñir,
se deja secar durante 20
minutos.
1

9. PROCEDIMIENTO
Fijar la muestra2

10. PROCEDIMIENTO
Aplicar el cristal violeta,
durante 1 minuto.
Lavar con abundante agua.
3

11. PROCEDIMIENTO
Aplicar lugol,
durante 1 minuto.
Lavar con abundante agua.
4

12. PROCEDIMIENTO
Aplicar alcohol/acetona
hasta que deje de decolorar.
Lavar con abundante agua.
5

13. PROCEDIMIENTO
Aplicar safranina,
durante 1 minuto
Lavar con abundante agua.
6
DEJAR SECAR

14. RESULTADOS
Observar al microscopio
con el lente de
inmersión, las bacterias
Gram positivas se
observaran de color
violeta y las Gram
negativas de color
rosado.

15. RESUMEN