Determinación de bilirrubina, Procedimiento y calculos de la determinación de la bilirrubina en sangre.

1. SEP DGETI SEMS
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de servicios N° 107
TUXTEPEC OAXACA.
NOMBRE DEL ALUMNO: ÁUREA AÍDA AGUILAR FELIPE
CATEDRÁTICO: I.B.Q. MARIA DE JESUS ROBLES ORTEGA
SUBMÓDULO PROFESIONAL: APLICAR TECNICAS DE VALORACION METABOLICAS
PRACTICA:
DETERMINACION CUANTITATIVA
DE BILLIRRUBINA EN SUERO
SEMESTRE: 6° GRUPO: “AL”
FECHA DE ENTREGA: ____ DE __________________ DEL 201_
CALIFICACIÓN Y OBSERVACIONES: ____________________________________

2. INTRODUCCION
La bilirrubina se convierte en azobilirrubina mediante el ácido sulfanílico diazotado
midiéndose fotométricamente. De las dos fracciones presentes en suero, Bilirrubin-
glucurónido y bilirrubina libre ligada a la albúmina, sólo la primera reacciona en medio
acuoso (bilirrubina directa) precisando la segunda la solubilización con cafeína para que
reaccione (bilirrubina indirecta). En la determinación de la bilirrubina indirecta se determina
también la directa, correspondiendo el resultado a la bilirrubina total.
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de bilirrubina presente
en la muestra ensayada.
SIGNIFICADO CLÍNICO
La bilirrubina se origina por la degradación de la hemoglobina.
Es transportada del bazo al hígado y se excreta en la bilis.
La hiperbilirrubinemia es el resultado de un incremento de la bilirrubina en plasma. Causas
más probables de la hiperbilirrubinemia:
Bilirrubina Total: Aumento de la hemólisis, alteraciones genéticas, anemia neonatal,
alteraciones eritropoyéticas, presencia de drogas.
Bilirrubina Directa: Colestasis hepática, alteraciones genéticas y alteraciones hepáticas.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de
laboratorio.
PROCEDIMIENTO
1. Extraer 5ml de sangre sin anticoagulante
2. centrifugar a 2500 r.p.m. durante 5 min.
3. Separar el suero en un nuevo tubo debidamente rotulado y llevar a centrifugar
a 2500 r.p.m. por 3 minutos.
4. Observar si hay un botón eritrocitario, si lo hay, vaciar el suero a otro tubo ya
rotulado, sin desprender el botón, y obtenernos suero libre de células.
5. Pipetear en tubos los siguientes volúmenes.
Blanco (B) Billirrubina Total Blanco (B) Billirrubina
Directa
Reactivo 1 - - 3.0ml 3.0ml
Reactivo 2 3.0ml 3.0ml - -
Reactivo 3 - 100µl - 100 µl
Muestra
p/calibrador
200 µl 200 µl 200 µl
6. Mezclar e incubar exactamente 5 minutos a 15-25°C
7. Leer la absorbancias a 555nm

3. INTERPRETACION
Reactivos 1 y 2: incoloros
Reactivo con suero:
CALCULOS
Calcule los resultados usando la siguiente ecuación:
Con factor:
(Ab muestra – Ab Blanco Muestra) x *factor = mg/dl Billirrubina muestra
*Factor = concentración del calibrador r
Ab calibrador – Ab Blanco calibrador
* Factor teórico:
Billirrubina (T) = 19.1
Billirrubina (D)= 14

4. SEP DGETI SEMS
Tuxtepec, OAX.
APLICAR TÉCNICAS DE VALORACIÓN METABOLICAS
PRÁCTICA
DETERMINACION CUANTITATIVA
DE BILLIRRUBINA EN SUERO
NOMBRE DEL PACIENTE:AGUILAR FELIPE AUREA AIDA
SEXO:F EDAD:19 AÑOS FECHA:15/04/11 HORA:9:40AM
REPORTE
RESULTADOS:
______________________
OBSERVACIONES:
___________________________________________________________________________________________
_______________________________
ANALISTA:
AUREA AIDA AGUILAR FELIPE 6°“AL”
FIRMA
VALORES DE REFERENCIA
En suero
Billirrubina Total: Hasta 1,1
mg/dL ≅18.81 μmol/L
Billirrubina Directa: Hasta
0,25 ≅mg/dL 4.275 μmol/L

5. CONCLUSIÓN
Aprendimos a realizar en esta sesión la determinación de bilirrubinas total y directa, es
muy importante saber que valores contenemos. Hay patologías en las cuales su
diagnostico se determina por medio de esta prueba.
También el objetivo se cumplió de capacitar al alumno para la determinación de
esta prueba, teniendo en cuenta informe teórico que en cualquier circunstancia de
Altos niveles de concentración de la Billirrubinase le conoce como hiperbilirrubinemia
y esto a su vez se conoce como ictericia. Los niveles normales de ictericia son de
aproximadamente 1mg/dL. Cuando estos niveles suben entre 2 y 3 mg/dL, entonces
hay detección clínica de ictericia.