Guías para el desarrollo de prácticas de laboratorio de Biología en programas de formación ambiental.

1. EL EFECTO DEL pH Y LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA EN TEJIDOS VEGETALES Y ANIMALES
1. Autor
Juan Carlos Valdelamar Villegas
Biólogo. Esp. Estadística Aplicada.
2. Generalidades
La viabilidad de algunos procesos que se dan al interior de las células animales y
vegetales, en algunos casos puede verse afectada por los cambios que se
presentan en el entorno que las rodea; algunas de estas alteraciones pueden
presentarse sobre el funcionamiento enzimático en los tejidos, el cual puede verse
alterado por cambios en variables como la temperatura y el pH, que ocasionan la
desnaturalización o cambios en sus estructura molecular y la consecuente perdida
de su funcionalidad.
El conocimiento de aspectos como el anterior es de gran importancia para los
interesados en los estudios del área ambiental, ya que este les permitirá de mejor
medida comprender las implicaciones para el funcionamiento de los sistemas
biológicos, que puede tener cualquier proceso de planificación en el que se
puedan alterar los valores de algunas de las de variables ambientales como la
temperatura y el pH.
3. Objetivo de la práctica
Determinar el efecto de la temperatura y el pH, sobre la actividad de las
enzimas presentes en algunos tejidos vegetales y animales, luego de someterlos a
cambios en las condiciones de temperatura y pH del medio.
4. Marco teórico
Las enzimas, están constituidas por un conjunto de proteínas, que se
producen como resultado de la traducción de un conjunto de genes (Schnek
y Massarini, 2008). Su función es la de servir como catalizadores
biológicos, permitiendo la aceleración de las reacciones químicas que se
llevan en los seres vivos, sin experimentar alteración alguna, hecho por el cual
puede actuar mas de una vez.

2. Las enzimas aceleran la reacción, hasta que se alcanza un equilibrio,
incrementando la eficiencia de las reacciones en mas de un millón de veces la
velocidad, a cuando esta s están ausentes; sin embargo el funcionamiento de
estas proteínas puede verse afectado de manera negativa por cambios en los
valores algunas variables del medio, como la concentración de algunos iones,
el pH y la temperatura entre otras, ya los altos valores de algunas de estas
variables pueden desnaturalizar estas proteínas, induciendo la perdida de su
funcionalidad; sin embargo algunas enzimas no solo pueden ver afectado su
accionar ante la presencia de la variables antes mencionadas, sino también
por la presencia de otras moléculas denominadas como inhibidoras, que
pueden ejercer un efecto reversible o en el peor de los casos irreversible (Murray,
2010).
Las situaciones antes descritas tienen un efecto significativos en el funcionamiento
de los organismos, ya que el fallo de muchos de estos procesos bioquímicos
puede conducir a su deceso.
5. Metodología
5.1 Materiales, equipos y/ o reactivos
• Porción (20 - 50g), de Hígado de res
• Porción (20 - 50g), de Riñón de res
• Papa
• Cebolla
• Equipo de disección
• Cuatro tubos de ensayo
• Gradilla para tubos de ensayo
• Peróxido de hidrógeno al 3%
• Vinagre de frutas (pH que oscile entre 4 y 5)
• Estufa o plancha calentadora
• Pipeta
5.2 Procedimientos
1. Tomar cuatro tubos de ensayos y colocar en cada uno de ellos
una porción de los tejidos no cocidos. Agregue 5 ml de peróxido de
hidrogeno al 3% (como se muestra en la figura 1), observe los
resultados y anote sus apreciaciones.

3. Figura 1. Esquema representativo del procedimiento empleado para la
presente práctica.
2. Lavar los tubos antes mencionados.
3. Colocar en el agua en ebullición del beaker, porciones del mismo
tamaño de cada uno de los tejidos. Dejar hervir durante 15 minutos.
4. Sacar los tejidos y dejar reposar unos 15 minutos aproximadamente.
5. Colocar una muestra de tejido en cada tubo de ensayo, y adicionar 5
ml de peróxido de hidrogeno al 3 %; observe los resultados y anote sus
apreciaciones.
6. Lavar los tubos nuevamente
7. Coloque nuevas muestras de tejido en cuatro cajas de petri, y
adicione vinagre, hasta cubrirlas en su totalidad; mantenerlas
inmersas durante unos 20 minutos aproximadamente.
8. Retire las muestras de las caja de petri y ponga a escurrir en
papel absorbente; posteriormente coloque cada una de las muestras en
los tubos de ensayo y adicione 5 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %;
observe los resultados y anote sus apreciaciones.
5.3 Precauciones o riesgos de la práctica
Se debe tener especial cuidado durante la manipulación del bisturí y las tijeras, por
que se pueden generar lesiones en la piel, así como al momento de realizar la
cocción de los materiales, para evitar quemarse la piel. Durante la manipulación
del peróxido de Hidrógeno debe evitar ser salpicado, para evitar la decoloración de
su ropa.

4. 6. Condiciones para la realización de la práctica
La practica debe realizarse en lugar bien ventilado, con buena disponibilidad
lumínica, a una temperatura que oscile entre los 25 y 28 ºC.
7. Situaciones problémicas
• Realice un cuadro comparativo, en el que compare los resultados de cada
experimento.
• Responda:
¿Cual tejido mostró mayor actividad?
¿Cual mostró menor actividad catalaza?
¿De qué manera afectó cada una de las variables analizadas el
funcionamiento de la enzima catalaza?
¿Químicamente hablando, que fue lo que sucedió con la enzima
catalaza cuando fue sometida a cambios de las variables
analizadas? (Justifique su respuesta con soportes bibliográficos)
¿ Qué conclusiones puede deducir usted de aquellos
elementos bioquímicos, constituyentes de los organismos vivos,
cuando se presentan alteraciones en los valores de algunas
variables ambientales? (explique su respuesta).
8. Resultados y conclusiones de la práctica
El estudiante debe presentar informe de laboratorio en el modelo sugerido.
PORTADA
TABLA DE CONTENIDO
1. INTRODUCCIÓN
2. OBJETIVOS
2.1 General
2.2 Específicos
3. MARCO TEÓRICO
4. EQUIPOS MATERIALES Y REACTIVOS

5. 5. METODOLOGÍA
6. MODELO DE CALCULOS
7. DATOS Y RESULTADOS
8. ANALISIS DE RESULTADOS
9. CUESTIONARIO
10. CONCLUSIONES
12. RECOMENDACIONES
11. BIBLIOGRAFÍA
9. Referencias bibliográficas
Murray R. 2010. Harper Bioquímica. 28° edición en Español. Ed. McGraw Hill.
700p.
Schnek Adriana y Massarini Alicia. 2008. Curtis. Biología. 7ª Edición. Ed.
Panamericana. 1160p.