Este documento describe el método analítico de electroforesis, en el cual las biomoléculas se separan dependiendo de factores como la carga, estructura y masa mediante la aplicación de un campo eléctrico. Explica cómo la electroforesis en gel de poliacrilamida permite separar moléculas basándose en su tamaño y carga, y los pasos para formar el gel de poliacrilamida y optimizar la migración electroforética variando parámetros como la concentración de acrilamida y bis-acrilamida.

1. Electroforesis
• Método analítico semipreparativo, en el que se separan biomoléculas
en dependencia de distintos factores como carga, estructura y masa
con la implementación de un campo eléctrico.
Inhibidor de la tripsina pancreática bovina BPTI

2. Fundamento teórico
Fricción
Atracción
electrostática
Difusión no
homogénea (𝐸𝑐)
Anchura de frente
en aumento

3. Polímero de
alto PM
Reduce
difusión de
partículas
Migración
mas lenta
Aumento de
campo
eléctrico
Gel de poliacrilamida
Inerte No iónico
Apropiada
visualización
de bandas
Variación de
tamaño de
poro

4. Dependencia de migración
Carga
PM
Estructura
3D
Información
aportada
Cadenas
peptídicas
PM
Punto
Isoelect.
Propiedades
Acido-base
𝑉 =
𝑞𝐸
𝑓
En su P.I la proteína
no migra

5. Formación del gel de poliacrilamida
Formador
de
radicales
libres
Catalizador
Inhibición de
polimerización
por oxigeno y/o
pH bajo.

6. Concentraciones de acrilamida y bis-acrilamida
%T Conc. de acrilamida
Determina longitud
del polímero
%C
Conc. de bis-
acrilamida
Determina grado de
entrecruzamiento
%𝑇𝛼
1
𝑇𝑎𝑚𝑎ñ𝑜 𝑑𝑒 𝑝𝑜𝑟𝑜
% de
precursores
Densidad
Elasticidad
Resistencia
Tamaño de
poro

7. Sistemas tampón
𝑚 =
1
𝐹𝐼
Atmosfera iónica
m= mayor velocidad de
migración
m= Alto desprendimiento
de calor

9. Determinación de PM y uso de SDS
Desnaturalizador de proteínas.
Formación de complejo SDS-proteína