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ELECTROFORESIS
ÍNDICE
DEFINICIÓN DE ELECTROFORESIS

   es un método de laboratorio en el que se
    utiliza una corriente eléctrica controlada
    con la finalidad de separar biomoleculas
    según su tamaño y carga eléctrica a
    través de una matriz gelatinosa.
APLICACIÓN EN BIOQUÍMICA

   se aplica en el campo de la Bioquímica a la
    separación de compuestos que poseen
    grupos ionizables (aminoácidos, péptidos, pr
    oteínas, ácidos nucleídos) teniendo en
    cuenta que la carga neta de estas sustancias
    depende del pH del medio en que se
    encuentren. Si la molécula tiene carga
    positiva migrará hacia el cátodo y si tiene
    carga negativa, hacia el ánodo.
MÉTODOS ELECTROFORÉTICOS ZONALES

   Son los más comunes, dada su alta
    aplicabilidad en diferentes campos. Son
    útiles para lograr la separación de
    mezclas complejas. Se aplican pequeñas
    cantidades de la disolución de proteínas a
    un soporte sólido, que se impregna con
    una solución tampón.
TIPOS DE ELECTROFORESIS

   En la electroforesis hay distintos tipos de
    electroforesis
ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA

   Los geles de poliacrilamida se forman
    por polimerización de la acrilamida por
    acción de un agente entrecruzado, es
    químicamente    inerte,   de    propiedades
    uniformes, capaz de ser preparado de forma
    rápida y reproducible. Forma, además, geles
    transparentes         con        estabilidad
    mecánica, insolubles en agua, relativamente
    no iónicos y que permiten buena
    visualización de las bandas durante un
    tiempo prolongado.
ELECTROFORESIS EN GELES DE GRADIENTES

     El uso de geles de poliacrilamida que
    tienen un gradiente creciente de
    concentración    de    archilamida    +
    bisacrilamida, y en consecuencia un
    gradiente decreciente en el tamaño del
    poro, pueden tener ventajas sobre los
    geles de concentraciones uniformes de
    acrilamida.
ELECTROFORESIS EN GELES DE AGAROSA
   La agarosa es un polisacárido (originalmente
    obtenido de algas, como el agar-agar, pero de
    composición homogénea), cuyas disoluciones
    (típicamente de 0.5 a 2 %) poseen la propiedad de
    permanecer liquidas por encima de 50 grados C y
    formar un gel, semisólido al enfriarse. Este gel
    esta constituido por una matriz o trama
    tridimensional de fibras poliméricas embebida en
    gran cantidad de medio líquido, que retarda el
    paso de las moléculas, se usa usualmente para
    separar moléculas grandes de alrededor 20.000
    nucleótidos.
ELECTROFORESIS CAPILAR
   La electroforesis capilar se basa en los
    mismos      principios   de    las    técnicas
    electroforéticas convencionales, pero utiliza
    condiciones y tecnología distinta que nos
    permiten obtener una serie de ventajas al
    respecto, Esta separación de péptidos
    realizada sobre un capilar de silica fundida a
    potenciales elevados 20 a 30 Kv en un
    campo de 400 a 500 v/cm refrigerados por
    aire.
ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL
   La electroforesis bidimensional se basa
    en separar las proteínas en una mezcla
    según sus dos propiedades
    moleculares, una en cada dimensión. El
    procedimiento más usado se basa en la
    separación en una primera dimensión
    mediante isoelectroenfoque y la segunda
    dimensión según peso molecular
    mediante electroforesis en poliacrilamida.
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Electroforesis

  • 3. DEFINICIÓN DE ELECTROFORESIS  es un método de laboratorio en el que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoleculas según su tamaño y carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa.
  • 4. APLICACIÓN EN BIOQUÍMICA  se aplica en el campo de la Bioquímica a la separación de compuestos que poseen grupos ionizables (aminoácidos, péptidos, pr oteínas, ácidos nucleídos) teniendo en cuenta que la carga neta de estas sustancias depende del pH del medio en que se encuentren. Si la molécula tiene carga positiva migrará hacia el cátodo y si tiene carga negativa, hacia el ánodo.
  • 5. MÉTODOS ELECTROFORÉTICOS ZONALES  Son los más comunes, dada su alta aplicabilidad en diferentes campos. Son útiles para lograr la separación de mezclas complejas. Se aplican pequeñas cantidades de la disolución de proteínas a un soporte sólido, que se impregna con una solución tampón.
  • 6. TIPOS DE ELECTROFORESIS  En la electroforesis hay distintos tipos de electroforesis
  • 7. ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA  Los geles de poliacrilamida se forman por polimerización de la acrilamida por acción de un agente entrecruzado, es químicamente inerte, de propiedades uniformes, capaz de ser preparado de forma rápida y reproducible. Forma, además, geles transparentes con estabilidad mecánica, insolubles en agua, relativamente no iónicos y que permiten buena visualización de las bandas durante un tiempo prolongado.
  • 8. ELECTROFORESIS EN GELES DE GRADIENTES  El uso de geles de poliacrilamida que tienen un gradiente creciente de concentración de archilamida + bisacrilamida, y en consecuencia un gradiente decreciente en el tamaño del poro, pueden tener ventajas sobre los geles de concentraciones uniformes de acrilamida.
  • 9. ELECTROFORESIS EN GELES DE AGAROSA  La agarosa es un polisacárido (originalmente obtenido de algas, como el agar-agar, pero de composición homogénea), cuyas disoluciones (típicamente de 0.5 a 2 %) poseen la propiedad de permanecer liquidas por encima de 50 grados C y formar un gel, semisólido al enfriarse. Este gel esta constituido por una matriz o trama tridimensional de fibras poliméricas embebida en gran cantidad de medio líquido, que retarda el paso de las moléculas, se usa usualmente para separar moléculas grandes de alrededor 20.000 nucleótidos.
  • 10. ELECTROFORESIS CAPILAR  La electroforesis capilar se basa en los mismos principios de las técnicas electroforéticas convencionales, pero utiliza condiciones y tecnología distinta que nos permiten obtener una serie de ventajas al respecto, Esta separación de péptidos realizada sobre un capilar de silica fundida a potenciales elevados 20 a 30 Kv en un campo de 400 a 500 v/cm refrigerados por aire.
  • 11. ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL  La electroforesis bidimensional se basa en separar las proteínas en una mezcla según sus dos propiedades moleculares, una en cada dimensión. El procedimiento más usado se basa en la separación en una primera dimensión mediante isoelectroenfoque y la segunda dimensión según peso molecular mediante electroforesis en poliacrilamida.