María Ángeles Baridon: Métodos de extracción y purificación de ácidos nucleicosBiocientificaSA
Presentación de María de los Ángeles Baridon: "Métodos de extracción y purificación de ácidos nucleicos" en el Curso Básico y Taller de PCR en Tiempo Real. HIGA Rossi La Plata, 22 y 23 de Noviembre, 2012.
Organiza: Laboratorio de Virología y Biología Molecular
H.I.G.A. R. Rossi - La Plata.
Auspicia: Servicio de Docencia e Investigación - HIGA Rossi La Plata y Comunidad Vita - Biocientífica S.A.
Una breve presentación en powerpoint a cerca de la electroforesis capilar, el funcionamiento del analizador capillarys 2 flex piercing y su utilidad en el diagnostico diferencial de diferentes patologías mediante la interpretación de proteinogramas.
A brief powerpoint presentation about capillary electrophoresis, the operation of the capillarys 2 flex piercing analyzer and its usefulness in the differential diagnosis of different pathologies through the interpretation of proteinograms.
María Ángeles Baridon: Métodos de extracción y purificación de ácidos nucleicosBiocientificaSA
Presentación de María de los Ángeles Baridon: "Métodos de extracción y purificación de ácidos nucleicos" en el Curso Básico y Taller de PCR en Tiempo Real. HIGA Rossi La Plata, 22 y 23 de Noviembre, 2012.
Organiza: Laboratorio de Virología y Biología Molecular
H.I.G.A. R. Rossi - La Plata.
Auspicia: Servicio de Docencia e Investigación - HIGA Rossi La Plata y Comunidad Vita - Biocientífica S.A.
Una breve presentación en powerpoint a cerca de la electroforesis capilar, el funcionamiento del analizador capillarys 2 flex piercing y su utilidad en el diagnostico diferencial de diferentes patologías mediante la interpretación de proteinogramas.
A brief powerpoint presentation about capillary electrophoresis, the operation of the capillarys 2 flex piercing analyzer and its usefulness in the differential diagnosis of different pathologies through the interpretation of proteinograms.
Tema01 QUÍMICA DE LA MATERIA VIVA Y SU ESTUDIO 2º BATmartinaposidonia
La materia viva-Bioelementos y principios inmediatos-Enlaces químicos y su importancia en biología-Estudio de la materia viva-Microscopía Óptica- Microscopía electrónica
descripción detallada sobre ureteroscopio la historia mas relevannte , el avance tecnológico , el tipo de técnicas , el manejo , tipo de complicaciones Procedimiento durante el cual se usa un ureteroscopio para observar el interior del uréter (tubo que conecta la vejiga con el riñón) y la pelvis renal (parte del riñón donde se acumula la orina y se dirige hacia el uréter). El ureteroscopio es un instrumento delgado en forma de tubo con una luz y una lente para observar. En ocasiones también tiene una herramienta para extraer tejido que se observa al microscopio para determinar si hay signos de enfermedad. Durante el procedimiento, se hace pasar el ureteroscopio a través de la uretra hacia la vejiga, y luego por el uréter hasta la pelvis renal. La uroteroscopia se usa para encontrar cáncer o bultos anormales en el uréter o la pelvis renal, y para tratar cálculos en los riñones o en el uréter.Una ureteroscopia es un procedimiento en el que se usa un ureteroscopio (instrumento delgado en forma de tubo con una luz y una lente para observar) para ver el interior del uréter y la pelvis renal, y verificar si hay áreas anormales. El ureteroscopio se inserta a través de la uretra hacia la vejiga, el uréter y la pelvis renal.Una vez que esté bajo los efectos de la anestesia, el médico introduce un instrumento similar a un telescopio, llamado ureteroscopio, a través de la abertura de las vías urinarias y hacia la vejiga; esto significa que no se realizan cortes quirúrgicos ni incisiones. El médico usa el endoscopio para analizar las vías urinarias, incluidos los riñones, los uréteres y la vejiga, y luego localiza el cálculo renal y lo rompe usando energía láser o retira el cálculo con un dispositivo similar a una cesta.Náuseas y vómitos ocasionales.
Dolor en los riñones, el abdomen, la espalda y a los lados del cuerpo en las primeras 24 a 48 horas. Pain may increase when you urinate. Tome los medicamentos según lo prescriba el médico.
Sangre en la orina. El color puede variar de rosa claro a rojizo y, a veces incluso puede tener un tono marrón, pero usted debería ser capaz de ver a través de ella
. (Los medicamentos que alivian la sensación de ardor durante la orina a veces pueden hacer que su color cambie a naranja o azul). Si el sangrado aumenta considerablemente, llame a su médico de inmediato o acuda al servicio de urgencias para que lo examinen.
Una sensación de saciedad y una constante necesidad de orinar (tenesmo vesical y polaquiuria).
Una sensación de quemazón al orinar o moverse.
Espasmos musculares en la vejiga.Desde la aplicación del primer cistoscopio
en 1876 por Max Nitze hasta la actualidad, los
avances en la tecnología óptica, las mejoras técnicas
y los nuevos diseños de endoscopios han permitido
la visualización completa del árbol urinario. Aunque
se atribuye a Young en 1912 la primera exploración
endoscópica del uréter (2), esta no fue realizada ru-
tinariamente hasta 1977-79 por Goodman (3) y por
Lyon (4). Las técnicas iniciales de Lyon
Presentació de Álvaro Baena i Cristina Real, infermers d'urgències de Badalona Serveis Assistencials, a la Jornada de celebració del Dia Internacional de les Infermeres, celebrada a Badalona el 14 de maig de 2024.
Presentació de Isaac Sánchez Figueras, Yolanda Gómez Otero, Mª Carmen Domingo González, Jessica Carles Sanz i Mireia Macho Segura, infermers i infermeres de Badalona Serveis Assistencials, a la Jornada de celebració del Dia Internacional de les Infermeres, celebrada a Badalona el 14 de maig de 2024.
En el marco de la Sexta Cumbre Ministerial Mundial sobre Seguridad del Paciente celebrada en Santiago de Chile en el mes de abril de 2024 se ha dado a conocer la primera Carta de Derechos de Seguridad de Paciente, a nivel mundial, a iniciativa de la Organización Mundial de la Salud (OMS).
Los objetivos del nuevo documento pasan por los siguientes aspectos clave: afirmar la seguridad del paciente como un derecho fundamental del paciente, para todos, en todas partes; identificar los derechos clave de seguridad del paciente que los trabajadores de salud y los líderes sanitarios deben defender para planificar, diseñar y prestar servicios de salud seguros; promover una cultura de seguridad, equidad, transparencia y rendición de cuentas dentro de los sistemas de salud; empoderar a los pacientes para que participen activamente en su propia atención como socios y para hacer valer su derecho a una atención segura; apoyar el desarrollo e implementación de políticas, procedimientos y mejores prácticas que fortalezcan la seguridad del paciente; y reconocer la seguridad del paciente como un componente integral del derecho a la salud; proporcionar orientación sobre la interacción entre el paciente y el sistema de salud en todo el espectro de servicios de salud, incluidos los cuidados de promoción, protección, prevención, curación, rehabilitación y paliativos; reconocer la importancia de involucrar y empoderar a las familias y los cuidadores en los procesos de atención médica y los sistemas de salud a nivel nacional, subnacional y comunitario.
Y ello porque la seguridad del paciente responde al primer principio fundamental de la atención sanitaria: “No hacer daño” (Primum non nocere). Y esto enlaza con la importancia de la prevención cuaternaria, pues cabe no olvidar que uno de los principales agentes de daño somos los propios profesionales sanitarios, por lo que hay que prevenirse del exceso de diagnóstico, tratamiento y prevención sanitaria.
Compartimos el documento abajo, estos son los 10 derechos fundamentales de seguridad del paciente descritos en la Carta:
1. Atención oportuna, eficaz y adecuada
2. Procesos y prácticas seguras de atención de salud
3. Trabajadores de salud calificados y competentes
4. Productos médicos seguros y su uso seguro y racional
5. Instalaciones de atención médica seguras y protegidas
6. Dignidad, respeto, no discriminación, privacidad y confidencialidad
7. Información, educación y toma de decisiones apoyada
8. Acceder a registros médicos
9. Ser escuchado y resolución justa
10. Compromiso del paciente y la familia
Que así sea. Y el compromiso pase del escrito a la realidad.
Presentación utilizada en la conferencia impartida en el X Congreso Nacional de Médicos y Médicas Jubiladas, bajo el título: "Edadismo: afectos y efectos. Por un pacto intergeneracional".
2. ESQUEMA
1- TECNICAS ELECTROFORÉTICAS
• Fundamento físico-químico
• Ventajas
• Factores que afectan a la electroforesis
• Tipos de electroforesis
2- WESTERN BLOT
3- SHOUTHERN BLOT
4- NORTHEN BLOT
6. FUNDAMENTO FISICO-QUIMICO
Las biomoléculas se separan en función de:
- Carga electrica
- Tamaño y forma
• A mayor carga, mayor movilidad
• A mayor tamaño, menor movilidad
• A mayor viscosidad del medio, menor movilidad
U Movilidad electroforérica.
Velocidad de la particular por
unidad de campo
7. VENTAJAS DE LA TÉCNICA
• Sensibilidad
• Elevado poder de resolución
• Versatilidad
• Posibilidad de separar mezclas complejas
• Aporta potente criterio de pureza
• Posibilidad de determinar otros parámetros: Pm, pI, nºde
cadenas polipeptídicas
8. FACTORES QUE AFECTAN A LA ELECTROFORESIS
CAMPO ELECTRICO / FUENTE DE ALIMENTACIÓN
•Diferencia de potencial entre los electrodos (Voltios)
•Intensidad de corriente (Amperios) [Ley de Ohm(V = i x R)]
•Resistencia (Ohmios)
•Temperatura (efecto Joule)
MUESTRA
• Carga, forma y tamaño de la molécula
TAMPÓN
• Fuerza iónica, pH
9. FACTORES QUE AFECTAN A LA ELECTROFORESIS
SOPORTE
• NO RESTRICTIVO
Permite el paso de la muestra. No supone un impedimento para la misma.
Proteinas.
La muestra se separa en función de la densidad de carga (relación masa y carga)
• RESTRICTIVO
Por su composición ofrecen un impedimento al paso de las muestras.
En condiciones generals, la separación dependerá de la forma, tamaño y carga
10. TIPOS DE ELECTROFORESIS
1. ELECTROFORESIS DE ACIDOS NUCLEICOS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS
2.A. NO DESNATURALIZANTE
2.B. DESNATURALIZANTE
B.1. ISOELECTROENFOQUE
B.2. BIDIMENSIONAL
11. TIPOS DE ELECTROFORESIS
1. ELECTROFORESIS DE ACIDOS NUCLEICOS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS
2.A. NO DESNATURALIZANTE
2.B. DESNATURALIZANTE
B.1. ISOELECTROENFOQUE
B.2. BIDIMENSIONAL
12. TIPOS DE ELECTROFORESIS
1. ELECTROFORESIS DE ACIDOS NUCLEICOS
Separar, identificar y purificar moléculas o
fragmentos de DNA o RNA
MIGRACIÓN
• ÁNODO (+)
• Relación carga-masa igual
• Tamaño y forma
Soportes restrictivos Agarosa disuelta en un buffer
Agarosa Tamaño
poros
Mejor separación
fragmentos grandes
13. TIPOS DE ELECTROFORESIS
1. ELECTROFORESIS DE ACIDOS NUCLEICOS
Separar, identificar y purificar moléculas o
fragmentos de DNA o RNA
MIGRACIÓN
• ÁNODO (+)
• Relación carga-masa igual
• Tamaño y forma
Soportes restrictivos
DETECCIÓN
Bromuro de etidio.
Agente intercalante fluorescente
19. TIPOS DE ELECTROFORESIS
1. ELECTROFORESIS DE ACIDOS NUCLEICOS
MARCADOR DE PESO MOLECULAR
(PM)
ESTIMACIÓN DE PM
20. TIPOS DE ELECTROFORESIS
1. ELECTROFORESIS DE ACIDOS NUCLEICOS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS
2.A. NO DESNATURALIZANTE
2.B. DESNATURALIZANTE
B.1. ISOELECTROENFOQUE
B.2. BIDIMENSIONAL
21. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
• La acrilamida polimeriza por la
acción del TEMED y el PSA
(persulfatoamónico)
• La metilen-bis-acrilamida forma
enlaces cruzados entre los
polímeros de acrilamida
• En conjunto se forma una especie
de malla cuyo diámetro de poro
viene determinado por la
concentración de acrila-mida/bis-
acrilamida (%)
24. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
Uniformidad del
gel
Conformación de la
proteína
Gel
uniforme
Gel
discontinuo
NO
Desnaturalizante
Desnaturalizante
25. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
Uniformidad del
gel
Conformación de la
proteína
Gel uniforme Gel discontinuo
NO
Desnaturalizante
Desnaturalizante
NO
Desnaturalizante
Desnaturalizante
26. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
GEL DISCONTINUO
GEL “STACKING”(EMPAQUETADOR)
•Menor concentración de
acrilamida
•Tamaño de poro
Función: Acumular las proteínas a la
entrada del gel separador para que
salgan al mismo tiempo
GEL “RUNNING”(SEPARADOR)
•Mayor concentración de acrilamida
•Tamaño de poro menor
Función: separar las proteínas
STACKING
RUNNING
27. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
Las proteinas se pueden separar por: Tamaño, forma y carga eléctrica
La mayoría de las proteínas
estarán cargadas negativamente
29. TIPOS DE ELECTROFORESIS
1. ELECTROFORESIS DE ACIDOS NUCLEICOS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS
2.2.A. NO DESNATURALIZANTE
2.2.B. DESNATURALIZANTE
B.1. ISOELECTROENFOQUE
B.2. BIDIMENSIONAL
30. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
CONDICIONES NO DESNATURALIZANTES
31. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
CONDICIONES NO DESNATURALIZANTES
A igual tamaño
migra más la de
mayor carga
A igual carga
migra más la de
menor tamaño
32. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
CONDICIONES NO DESNATURALIZANTES
80KDa 40KDa
34. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
CONDICIONES NO DESNATURALIZANTES
VENTAJAS
• Separa proteínas en estado nativo
• Las proteínas siguen siendo funcionales
• Permite separar complejos proteicos o proteínas multiméricas como una
unidad
• Excelente herramienta para detectar cualquier proceso que altere la carga o la
conformación de una proteína
INCONVENIENTES
• Muchas proteínas no migran por no tener carga neta o por poseer carga neta
positiva
• El proceso de separación es muy lento debido a la debilidad de la carga neta
de las proteínas
• El proceso de separación no sólo estáafectado por el tamaño sino también por
la forma de la proteína
35. TIPOS DE ELECTROFORESIS
1. ELECTROFORESIS DE ACIDOS NUCLEICOS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS
2.A. NO DESNATURALIZANTE
2.B. DESNATURALIZANTE
B.1. ISOELECTROENFOQUE
B.2. BIDIMENSIONAL
36. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
CONDICIONES DESNATURALIZANTES: SDS-PAGE
Las proteínas pierden su conformación nativa
1. Se emplean AGENTES DESNATURALIZANTES (urea, detergentes), el SDS
(sodiumdodecylsulfate) es el de mayor uso
2. Se emplea un AGENTE REDUCTOR de puentes –s–s– generalmente β-
mercaptoetanol o DTT (ditiotreitol)
¿QUE CONSEGUIMOS CON ESTO?
37. La cantidad de SDS unido a la proteína es proporcional a su tamaño, de tal
forma que la relación carga/tamaño entre todas las proteínas va a ser
aprox. la misma
TIPOS DE ELECTROFORESIS
¿QUE CONSEGUIMOS CON ESTO?
CONDICIONES DESNATURALIZANTES: SDS-PAGE
El β-mercaptoetanol va a “romper” los enlaces –S–S– tanto inter-como
intramoleculares mediante una reacción redox. (El β-mercaptoetanol reduce
los puentes disulfuro)
DTT
38. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
CONDICIONES DESNATURALIZANTES: SDS-PAGE
80KDa 40KDa
39. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
CONDICIONES DESNATURALIZANTES: SDS-PAGE
60KDa
40KDa
20KDa
80KDa 40KDa
40. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
NO
DESNATURALIZANTE
DESNATURALIZANTE
SDS-PAGE
41. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
VENTAJAS
•Separación rápida de las proteínas
•La separación no depende de la forma de la proteína nativa
•Se puede estimar el peso molecular de las proteínas
•Aunque desnaturalizadas, las proteínas pueden usarse para la fabricación de
anticuerpos (en la mayoría de los casos)
INCONVENIENTES
•Las proteínas separadas están desnaturalizadas por tanto no son funcionales
CONDICIONES DESNATURALIZANTES: SDS-PAGE
PARA LA DETERMINACIÓN DEL PESO MOLECULAR:
1. Necesitamos un marker
2. Necesitamos normalizar
43. TIPOS DE ELECTROFORESIS
1. ELECTROFORESIS DE ACIDOS NUCLEICOS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS
2.A. NO DESNATURALIZANTE
2.B. DESNATURALIZANTE
B.1. ISOELECTROENFOQUE
B.2. BIDIMENSIONAL
44. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. ISOLELECTROENFOQUE
Las proteínas se separan por:
PUNTO ISOELÉCTRICO
Las proteínas se moverán de acorde
con su carga neta hacia el ánodo o el
cátodo hasta que alcancen un valor
de pH = pI donde su carga neta es
neutra (y ya no se mueven)
45. TIPOS DE ELECTROFORESIS
1. ELECTROFORESIS DE ACIDOS NUCLEICOS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS
2.A. NO DESNATURALIZANTE
2.B. DESNATURALIZANTE
B.1. ISOELECTROENFOQUE
B.2. BIDIMENSIONAL
46. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. BIDIMENSIONAL
• Técnica de alta resolución cuyo objetivo es la separación de mezclas de proteínas
altamente complejas
•La base de su elevado poder de resolución está precisamente en la
bidimensionalidad, es decir, en que las proteínas son separadas secuencialmente
por dos criterios físicos
•Debido a su elevada resolución, ha sido una técnica ampliamente utilizada en la
confección de mapas de referencia, es decir, en la disección de la composición
proteica de un determinado orgánulo o tipo celular (metabolómica)
47. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. BIDIMENSIONAL
En realidad son dos
proteinas con identico
peso molecular o punto
isoeléctrico!
SOLUCION:
Electroforesis Bidimensional
53. WESTERN BLOT
La MEMBRANA de NITROCELULOSA
se puede teñir a su vez con un
colorante (ROJO PONCEAU) que
pone de manifiesto el total de
proteínas que se han transferido
desde el gel
59. TIPOS DE ELECTROFORESIS
2. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS. GELES POLIACRILAMIDA
GEL UNIFORME
Concentración de poliacrilamida
uniforme
Función: separar las proteínas:
Tamaño y densidad de carga
Ventajas:
• Rápido
• Sencillo
• Puede estudiarse la funcionalidad
de las proteínas separadas
Desventajas:
•Menor resolución