Electroforesis capilar
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Una breve presentación en powerpoint a cerca de la electroforesis capilar, el funcionamiento del analizador capillarys 2 flex piercing y su utilidad en el diagnostico diferencial de diferentes patologías mediante la interpretación de proteinogramas. A brief powerpoint presentation about capillary electrophoresis, the operation of the capillarys 2 flex piercing analyzer and its usefulness in the differential diagnosis of different pathologies through the interpretation of proteinograms.
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- 9. Zona 𝜶1 globulinas ↓ Insuficiencia hepatocelular, malnutrición… ↓ Deficiencia congenita de 𝜶1-antitripsina ↑ Aumento de proteínas de fase aguda
- 10. Zona 𝜶2 globulinas 2B Diferente fenotipos de haptoglobina 2B Presencia de ApoB 2B Presencia de cadenas ligeras ↓ Insuficiencia hepatocelular, malnutrición… ↓ Hemolisis intravascular ↑ Síndrome inflamatorio ↑ Síndrome nefrótico
- 11. Zona 𝜷 globulinas ↓ Insuficiencia hepatocelular, malnutrición… ↓ Consumo de C3 ↑ Causas no monoclonales: hipetransferrinemia, obstrucción biliar (C3) e hiper IgA policlonal (cirrosis alcohólica) ↑ Causas monoclonales: IgA/IgG, IgM en EW, cadenas ligeras kappa o lambda (mieloma de cadenas ligeras)
- 12. Zona 𝜸 globulinas ↓ Hipogammaglobulinemia: del recién nacido, total/parcial inmunodeficiencia, secundaria y mieloma de cadenas ligeras ↑ Hipergammaglobulinemia: policlonal, monoclonal u oligoclonal
- 13. Muchas gracias
Notas del editor
- o Electroforesis: Cuando una mezcla de moléculas ionizadas son colocadas en un campo eléctrico, estas experimentan una fuerza de atracción hacia el polo que posee carga opuesta, así, las moléculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el cátodo (el polo negativo) y aquellas cargadas negativamente se desplazaran hacia el ánodo (el polo positivo). o Fue empleado por primera vez por A.Tiselius en 1937. o El movimiento de las moléculas esta gobernado también por dos fuerzas adicionales: la fricción con el solvente dificultará este movimiento originando una fuerza que se opone y por otro lado las moléculas tienen que moverse en forma aleatoria o movimiento browniano debido a que poseen energía cinética propia denominado difusión. o La energía cinética de las moléculas aumenta con la temperatura, por ello a mayor temperatura mayor difusión.
- Dos son los factores que causan la movilidad de los solutos: 1. Movilidad electroforética: Específica para cada analito Dependiente de la relación carga/tamaño Los cationes migran hacia el cátodo, los aniones al ánodo y los compuestos neutros no se ven afectados por el campo eléctrico. 2. Flujo electroendosmótico (FEO): Mueve el disolvente desde el polo positivo al negativo actuando como una bomba. Su causa es la doble capa eléctrica que se produce en el interfaz entre sílice y disolución. El capilar esta cargado negativamente en su superficie, atrayendo a los iones positivos del disolvente. •La EC se realiza en capilares hechos de sílice fundido. •Los grupos silanol (SiO-) cargados negativamente presentes en este material dan origen a una carga negativa en la superficie del capilar y es responsable del FEO. •Esta carga negativa atrae las especies catiónicas del tampón y la capa iónica que se va formando tiene una densidad de carga positiva que va decreciendo al aumentar la distancia a la pared del capilar. •La aplicación de un campo eléctrico produce un potencial zeta que tiene como resultado el movimiento de estos cationes unidos mas debilmente hacia el cátodo, y como están hidratados se llevan el agua tras de sí.
- Los sistemas de Sebia utilizan el principio de le electroforesis capilar en solución libre. Las moléculas cargadas son separadas en función de su movilidad electroforética a un pH específico en un tampón alcalino. La separación se realiza según el pH del electrolito y el flujo electroendosmótico. Cada muestra es diluida en un tampón de dilución y los capilares se llenan con el tampón de separación; las muestras son luego inyectadas por aspiración en el extremo anódico del capilar. Después se realiza la separación de proteínas a voltaje elevado; la detección directa y cuantificación de las diferentes fracciones de proteínas se realiza a una longitud de onda específica en el extremo catódico del capilar. Después del análisis, los capilares son lavados inmediatamente con una solución de lavado y luego se vuelven a llenar con tampón para preparar el análisis de las muestras siguientes.
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