Este documento presenta los procedimientos y materiales para evaluar la calidad de un jarabe de citrato de piperazina mediante ensayos fisicoquímicos y microbiológicos. Se detallan nueve pruebas para analizar las características organolépticas, pH, densidad, solubilidad, valoración, espectrofotometría, potencial redox, grados Brix e índice de refracción, y presencia de E. coli. El objetivo es comprobar si el fármaco cumple con los parámetros estable

1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA
SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TECNOLOGÍA FARMACÉUTICA
NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.9.01-2
NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
EVALUACIÓN DE CALIDAD DE FORMAS FARMACÉUTICAS
LÍQUIDAS
1. DATOS INFORMÁTIVOS
NOMBRE: Pether Andrés León Borbor.
CARRERA: Bioquímica y Farmacia.
CICLO/NIVEL: 9no semestre “A”.
FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 18 de diciembre del 2019.
DOCENTE RESPONSABLE: Dr. Carlos Alberto García González.
2. FUNDAMENTACIÓN:
El citrato de Piperazina es una materia prima farmacéutica de importación, el
cual se utiliza en la preparación del jarabe de Piperazina para su uso como
antihelmíntico (Pérez & García, 1998).
La piperazina se puede sintetizar mediante la reacción entre etanolamina y
amoníaco a alta presión sobre un catalizador en presencia de hidrógeno. Se
obtiene una mezcla de etilenaminas —entre ellas piperazina—, además de
agua. Las etilenaminas son separadas entre sí por destilación (Pérez &
Gardey, 2009).
La piperazina también puede obtenerse a partir de dicloruro de etileno,
haciendo reaccionar este producto con un exceso de amoníaco a alta presión
y a temperatura moderada. La solución resultante de hidrocloruro de
etilenamina se neutraliza con sosa cáustica para formar piperazina y otras
etilenaminas, que posteriormente se aíslan por destilación. El cloruro de
sodio se forma como subproducto (ECURED, 2011).
El citrato de piperazina contiene no menos del 98,0 por ciento y no más del
equivalente al 101,0 por ciento de bis (2- hidroxi-propano-1,2,3-tricarboxilato)
de tripiperazina, calculado con respecto a la sustancia anhidra. Contiene
agua en cantidad variable (española, 2002).

2. 3. RESULTADOS DE APRENDIZAJE
Desarrolla métodos analíticos, micro analíticos, biológicos, físicos y químicos
en el control de calidad de las formas farmacéuticas; Realiza la evaluación
de calidad del Citrato de Piperazina en una forma farmacéutica liquida
(jarabe), basándose en ensayos de diferentes farmacopeas.
4. OBJETIVOS:
4.1Comprobar si el fármaco cumple con los parámetros referenciales
establecidos en las farmacopeas analizando y comparando los
resultados.
5. EQUIPOS, MATERIALES E INSUMOS:
a) Características organolépticas
MATERIALES MEDICAMENTO
 Tubos de ensayo
 Gradilla
 Guantes
 Mascarilla
 Gorro
 Zapatones
 Bata de laboratorio
 Citrato de Piperazina (comercial,
genérico, elaborado)
b) pH
MATERIALES SUSTANCIAS EQUIPO MEDICAMENTO
 Vaso de
precipitaci
ón
 Varilla de
vidrio
 Probeta
 Pipeta
 Otros
 Guantes
 Gorro
 Zapatones
 Bata de
laboratorio
 Agua
destilada
 pH-metro  Jarabe de
citrato de
Piperazina
c) Densidad

3. MATERIALES SUSTANCIAS EQUIPO MEDICAMENTO
 Vaso de
precipitaci
ón
 Picnómetr
o
 Otros
 Guantes
 Mascarilla
 Gorro
 Zapatones
 Bata de
laboratori
o
 Agua
destilada
 Balanza
Analítica
 Jarabe de
citrato de
Piperazina
d) Solubilidad
MATERIALES SUSTANCIAS/
REACTIVOS
MUESTRA
 Vaso de
precipitación.
 1 Probeta pequeña
 Pipeta.
 9 tubos de ensayo
 Gradilla
 Guantes, mascarilla,
gorro, zapatones y
bata de laboratorio.
 Agua destilada
 Formol
 Alcohol potable
 Jarabe citrato de
Piperazina (comercial,
genérico y elaborado por
la PPF)
e) Valoración
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS/
REACTIVOS
MEDICAMEN
TO
 Vaso de
precipitación
 Bureta
 Soporte
Universal
 Agitador
 Guantes,
mascarilla,
gorro,
zapatones y
bata de
laboratorio.
 Baño
María
 Ácido Acético
Glacial.
 Cristal
violeta.
 Ácido
Perclórico a
0.1N
 Jarabe
de
Piperazina
Comercial
f) Espectrofotometría

4. MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS/
REACTIVOS
MEDICAMENTO
 Vaso de
precipitación
 Pipetas
 Balón 50ml
 Guantes
 Mascarilla
 Gorro
 zapatones
 Bata de
laboratorio
 Balanza
analítica
 Espectrofot
ómetro
 Agua
desioniza
da
 Hidróxido
de sodio
2.5N
 Acetona
 Nitroferro
cianuro
de sodio
 Jarabe de
citrato de
piperazina
g) ORP (POTENCIAL OXIDO-REDUCCIÓN)
MATERIALES EQUIPOS MUESTRA
 Guantes.
 Mascarilla.
 Gorro.
 Zapatones.
 Bata de laboratorio
 Vaso de
precipitación.
 ORP.  Citrato de
piperazina(jarabe
)
 Agua destilada.
 Agua
desionizada.
h) GRADOS BRIX-INDICE DCDE REFRACCION-GLUCOSA
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS/
REACTIVOS
MEDICAMENTO
 Tubos de
ensayo (5)
 Gotero
 Varilla de
vidrio
 Toallas
absorbentes
 Mascarilla
 Gorro
 zapatones
 Bata de
laboratorio
 Refractómet
ro
 Agua
destilada
 Alcohol
 Jarabe de
citrato de
piperazina
i) Análisis Microbiológico
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS/
REACTIVOS
MEDICAMENT
O

5. ✓ Asa
✓ Caja Petri
✓ Guantes
✓ Mascarilla
✓ Gorro
✓ Zapatones
✓ Bata de
laboratorio
✓ Incubadora ✓ Agar
MacConkey
✓ Jarabe
de
citrato
de
piperazi
na
Nota: previo al procedimiento de la práctica se debe informar de los
procedimientos y equipo de seguridad, así como los requisitos de seguridad y
salud que se encuentran en la nube de la cátedra
https://drive.google.com/drive/folders/1jr4cejLxvuISCd3zpdg01YcCTYvc8NS8
6. PROCEDIMIENTO:
a) Características Organolépticas
1. Se tomó los frascos de Jarabe de Piperazina para realizar la
caracterización.
2. Se observó la coloración de los medicamentos, su olor, sabor, y su textura.
3. Luego se procedió a realizar la comparación de las diferentes marcas de
jarabe de piperazina.
b) pH
1. Agregamos una cierta cantidad de muestra (jarabe de citrato de
piperazina), en un vaso de precipitación y luego medimos el pH, con el
respectivo pH-metro.
2. Verificar si cumple con los parámetros establecidos
c) Densidad
Muestra # 1 Piperazina NIF Genérico
1. Pesamos el picnómetro vacío en la balanza.
2. Luego llenamos el picnómetro con agua destilada hasta enrasar y pesar.
3. Procedemos a llenar el picnómetro con la muestra (jarabe del citrato de
piperazina) hasta enrasar y pesar.
4. Calcular mediante la densidad mediante la fórmula por el método del
picnometria.

6. Muestra # 2 ANKILOTOFIS Citrato de Piperazina
1. Pesamos el picnómetro vacío en la balanza.
2. Luego llenamos el picnómetro con agua destilada hasta enrasar y pesar.
3. Procedemos a llenar el picnómetro con la muestra (jarabe del citrato de
piperazina) hasta enrasar y pesar.
4. Calcular mediante la densidad mediante la fórmula por el método del
picnometria.
Muestra # 3 Citrato de Piperazina PPF
1. Pesamos el picnómetro vacío en la balanza.
2. Luego llenamos el picnómetro con agua destilada hasta enrasar y pesar.
3. Procedemos a llenar el picnómetro con la muestra (jarabe del citrato de
piperazina) hasta enrasar y pesar.
4. Calcular mediante la densidad mediante la fórmula por el método del
picnometria.
d) Solubilidad
1. Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área
donde se la realizara y así mismo tener los materiales limpios y secos que
se emplearan en la práctica.
2. Rotular 3 tubos de ensayo con el nombre de las sustancias que se va a
realizar el ensayo: agua, alcohol y formol.
3. Colocar aproximadamente 2ml de alcohol, agua y formol respectivamente
en los tubos previamente rotulados.
4. Agregar 2ml de muestra en cada solvente correspondiente.
5. Agitar por 5 minutos aproximadamente, observar la solubilidad del
fármaco y reportar.
e) Valoración 1 y 2
1. Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área
donde se la realizara la práctica y así mismo tener los materiales limpios
y secos que se emplearán en la práctica.

7. 2. Se procede a colocar 1ml de jarabe de Citrato de Piperazina en un vaso
de precipitación.
3. Se pone la muestra en baño María para que se evapore hasta sequedad.
4. Luego colocar 10 ml de ácido acético glacial a la muestra añadiendo 1
gota de cristal violeta.
5. Agitar y titular con solución de ácido perclórico a 0.1N hasta punto final de
coloración azul.
f) Espectrofotometría
1. Disolver 500 mg de citrato de piperazina en 10ml de agua
2. Agregar 1 ml de hidróxido de sodio 2.5N
3. Agregar 1 ml de acetona
4. Agregar 1 ml de nitroferricianuro de sodio
5. Mezclar y dejar en reposo durante 10 minutos
6. Determinar la absorbancia a 520nm o 600nm usando un blanco
7. Y luego realizar el mismo procedimiento, pero con la muestra
g) ORP (potencial oxido-reducción)
1. Conectar el equipo a la energía para poder realizar el test de Oxido-
reducción.
2. Calibrar el equipo de potencial Redox, con agua desionizada.
3. Colocar el electrón del ORP en agua desionizada para obtener un valor
referente durante unos minutos, para observar la estabilidad.
4. Sumergir el electrón del ORP en agua destilada, para obtener valores
estables y así poder, realizar un marco de referencia.
5. Sumergir el electrón del ORP en la primera muestra de Citrato de
Piperazina, hasta que nos salga un valor estable, y anotar sus valores.
6. Lavar el electrón primero con agua destilada, luego con agua desionizada
para que se neutralice y así poder realizar el procedimiento 5 en cada
muestra faltante.
7. Realizar una segunda verificación de los datos dados por el equipo de
ORP, para asegurar que los resultados sean correctos.
h) GRADOS BRIX-INDICE DCDE REFRACCION-GLUCOSA

8. 1. Haciendo el uso del refractómetro, se procede a efectuar la medición
agregando al prisma una pequeña cantidad de jarabe de muestra
utilizando una pipeta.
2. Operando el dispositivo se selecciona el método que se desea emplear
(grados brix-índice de refracción-glucosa).
3. Luego se procede a tomar las mediciones obtenidas.
4. Después de cada medición se retira la muestra del prisma haciendo uso
de algodón y a continuación se limpia con un poco de agua.
i) Análisis Microbiológico
Aislamiento de E. coli.
✓ Con un asa, hacer un aislamiento a partir de caldo lactosado, a agar MacCon-
key. Incubar a 35ºC por 24 horas.
✓ Las colonias de coliformes en agar MacConkey son de color rojo ladrillo,
eventualmente rodeadas de zonas de bilis precipitada.
✓ Si no hay colonias típicas, la muestra cumple los requisitos en cuanto a ausencia
de coliformes.
✓ Si hay colonias típicas, trasplante una de estas colonias a agar eosina-azul de
metileno-lactosa, según Levine. Incubar a 35ºC por 24-48 horas. Las colonias de
E. coli en este medio, se caracterizan por dar color negro azulado al trasluz y
brillo metálico dorado verdoso a la luz incidente.
✓ Transferir las colonias típicas del agar eosina-azul de metileno-lactosa (agar
Levine), a agar nutritivo inclinado y a agar TSI. Incubar a 35ºC por 24 horas.
✓ Los cultivos típicos de E. coli en agar TSI presentan el bisel amarillo, sin
oscurecimiento y con formación de gas.
✓ Hacer una coloración de Gram: E. coli es un bacilo Gram negativo no esporulado.
✓ Confirmar la presencia de E. coli por medio de pruebas bioquímicas adicionales
como por ejemplo el Test del IMViC, o utilizando sistemas miniaturizados tales
como API MicroID.
7. RESULTADOS ESPERADOS
a) Características Organolépticas

9. CARACTERISTICAS ORGANOLEPTICAS
FORMA
FARMACEUTICA
OLOR COLOR SABOR TEXTURA
JARABE DE PP
(PREPARADO EN
LABORATORIO)
Dulzón Transparente Dulce Ligeramente
viscoso
JARABE DE PP
(COMERCIAL)
Dulzón Verde Dulce Ligeramente
viscoso
JARABE DE PP
(GENERICO)
Dulzón Rosa Dulce Ligeramente
viscos
b) Ph
Muestra Resultado
Piperazina NF Genérico pH 5,44 a 20,3º
Piperazina Yerbaten pH 5,05 a 20,3º
Piperazina UTMACH pH 5,45 a 20,3º
Según la Farmacopea Española Segunda Edición los parámetros de pH
establecidos son de 5 – 6, con lo que los análisis realizados a los 3 jarabes
cumplen con los parámetros establecidos.
c) Densidad
DENSIDAD JARABE DE CITRATO DE PIPERAZINA
Tipos de Jarabe de
Piperazina
Densidad por
Picnometría
Especificación 1,1 g
(Farmacopea Española)
1 Jarabe de laboratorio
Utmach
1,256g/ml No cumple
2 Jarabe Genérico 1,145g/ml Cumple
3 Jarabe Comercial 1,149g/ml Cumple
Datos:

10.  Peso de Picnómetro Vacío: 17,3475g
 Peso de Picnómetro con Agua: 27,2230g
 Peso de Picnómetro con Jarabe 1: 29,7474g
 Peso de Picnómetro con Jarabe 2: 28,6588g
 Peso de Picnómetro con Jarabe 3: 28,7164g
Formula de Densidad por Picnometría.
𝑴𝟑 − 𝑴𝟏
𝑴𝟐 − 𝑴𝟏
M1: Picnómetro Vacío
M2: Pacómetro con Agua Destilada
M3: picnómetro con Muestra
 Jarabe de Laboratorio Utmach
𝑴𝟑 − 𝑴𝟏
𝑴𝟐 − 𝑴𝟏
29,7474g − 17,3475g
27,2230g − 17,3475g
1,256g/ml
 Jarabe Genérico
𝑴𝟑 − 𝑴𝟏
𝑴𝟐 − 𝑴𝟏
28,6588g − 17,3475g
27,2230g − 17,3475g
1,145 g/ml
 Jarabe Comercial
𝑴𝟑 − 𝑴𝟏
𝑴𝟐 − 𝑴𝟏
28,7164g − 17,3475g
27,2230g − 17,3475g
1,149 g/ml
d) Solubilidad
JARABE CITRATO DE PIPERAZINA GENÉRICO 60 ml
SOLUBILIDAD
SOLVENTES FACILMENTE LIGERAMENTE CASI SOLUBLE INSOLUBLE
AGUA Si cumple No cumple No cumple No cumple

11. ALCOHOL No cumple No cumple Si cumple No cumple
FORMOL Si cumple No cumple No cumple No cumple
JARABE CITRATO DE PIPERAZINA COMERCIAL
Nature,
s Garden 120 ml
SOLUBILIDAD
SOLVENTES FACILMENTE LIGERAMENTE CASI SOLUBLE INSOLUBLE
AGUA Si cumple No cumple No cumple No cumple
ALCOHOL No cumple No cumple Si cumple No cumple
FORMOL Si cumple No cumple No cumple No cumple
JARABE CITRATO DE PIPERAZINA ELABORADO EN LA PLANTA PILOTO DE FARMACIA
120 ml
SOLUBILIDAD
SOLVENTES FACILMENTE LIGERAMENTE CASI SOLUBLE INSOLUBLE
AGUA Si cumple No cumple No cumple No cumple
ALCOHOL No cumple No cumple Si cumple No cumple
FORMOL Si cumple No cumple No cumple No cumple
e) Valoración
Preparación de HClO4 a 0,1 N
70g HClO4 100 g P.A
100.45 g HClO4 x
X= 143,5 g HClO4
143,5 g HClO4 1000 ml
X 50 ml
X= 7,175 g HClO4

12. 7.175 g HClO4 2N
X 0,1 N
X= 0,35875 g HClO4
V= m/d = 0,3875/1,67
V= 0,215 ml
Cantidad Trabajada
100 ml de Jarabe de citrato de Piperazina 11.0 g P.A
1 ml Jarabe de citrato de Piperazina x
X= 0,11 g P.A
0, 11 g x 1000 mg/1 = 110 mg
Consumo Teorico
1 ml HClO4 10,71 mg P.A
X 110 mg P.A
X= 10,27 HClO4 ml
Porcentaje Teorico
1 ml HClO4 0.1M 10,71 mg P.A
10,27 ml HClO4 x
X=109,9 mg P.A
110mg P.A 100%
109,9 mg P.A x
X=99,9%
Consumo Real
1M 2N
X 0,1 N
X= 0,05 M
9,.8 ml HClO4 0.1 N
X 0.05M
X= 4,9 ml HClO4 0,05M

13. 4,9 ml HClO4 0,05 M
X 0,1 N
X= 9,8 ml HClO4 0,1 M
9,8 ml HClO4 0,1 M = 1.0125 9,9 ml HClO4 0,1M
Porcentaje Real
1 ml HClO4 0,1 M 10,71 mg P-A
9,9 ml HClO4 x
X=106,029 mg P.A
110mg P.A 100%
106,029 mg P.A x
X=96,39%
El valor total de P.A. que contiene un jarabe de citrato de piperazina analizado
fue de 106.029mg obteniéndose un porcentaje de 96.39% lo que no está dentro
de los rangos permitidos por la farmacopea española que permite no menos del
98.0% y no más del 101.0% de P.A.
g) ORP (potencial oxido-reducción)
# MUESTRAS RESULTADO 1
(mV)
RESULTADO 2
(mV)
1 Citrato de piperazina
(“YERBATEN”, comercial)
129 130
2 Citrato de piperazina (“Nature’s
Garden”, genérico)
134 121
3 Citrato de piperazina
(“Piperazina NF”, genérico)
177 178
REFERENCIAS PARA ESTABILIZAR LOS RESULTADOS
Agua Destilada 176 176
h) Grados Brix- índice de refracción-glucosa
Métodos Jarabe Genérico Jarabe Comercial
Identificación Citrato de piperazina
Grados Brix 36,63 % a 20°C 40,66 % a 17,5°C

14. Indice de refracción 1,3934 a 20°C 1,4015 a 17,5°C
Glucosa 37,12 % a 20°C 41,23 % a 20°C
8. CONCLUSIONES:
Mediante esta práctica se ha logrado conocer, aprender e identificar acerca
de evaluación de calidad de un medicamento, las cuales ayudan al
Bioquímico Farmacéutico a determinar si un medicamento se rige a la
normativa vigente y legal dentro del campo farmacéutico, lográndose evaluar
controles de calidad tales como: pruebas organolépticas, pH, densidad,
solubilidad, valoración, ORG (potencial oxido-reducción), grados brix (índice
de refracción de glucosa). Lográndose obtener valores aceptables en cada
uno de los ensayos realizados, apoyándose a su vez de fuentes bibliográficas
como farmacopeas internacionales, evidenciando así que el medicamento
analizado en este caso, el Ibuprofeno si cumple con la normativa de calidad.
9. RECOMENDACIONES:
 Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para
evitar posteriormente accidente alguno.
 Se recomienda utilizar bata, mascarilla, guantes y gorro para la realización
de la práctica.
 Leer con anticipación cada uno de las instructivos que se llevarán a cabo
para tener todo el material listo.
 Si durante el proceso de la práctica se obtienen resultados erróneos o
dudosos consultar al docente responsable a cargo.
10.ANEXOS:
Figura 1. Valoración ___________________________________
FIRMA DEL ESTUDIANTE