Este documento resume las características de los inmunocomplejos, que son complejos compuestos de antígenos y anticuerpos. Explica que los inmunocomplejos se forman como resultado del contacto entre un antígeno y un anticuerpo, y que su unión depende de factores como la afinidad, temperatura, pH y concentración. También describe varias técnicas para determinar inmunocomplejos, como ensayos inmunoenzimáticos, citometría de flujo, radioinmunoensayos e inmunotransferencia.
Ensayo ENRICH (sesión clínica, Servicio de Neurología HUCA)
Inmunocomplejo Ag-Ac técnicas determinación
1. Fecha de presentación: diciembre del 2017
Artículo de revisión
INMUNOCOMPLEJO: COMPLEJOANTÍGENO ANTICUERPO.
INMUNOCOMPLEX: COMPLEX ANTIGEN.ANTIBODY
AUTOR
Luis Geovanny Cevallos Mieles
Email: luisyocm@hotmail.com
RESUMEN
Los complejos Sg-Ac son estudiados por
la inmunología que es una ciencia
biológica conformada por células y
moléculas que le hacen frente a las
enfermedades infecciosas y es originada a
partir de la microbiología. El complejo
Ag-Ac también conocido como
inmunocomplejo o complejo inmune, es el
resultado del contacto entre un antígeno
con un anticuerpo, que se caracteriza por
ser rápido, específico y espontáneo. El
contacto y su unión dependerá de la
adaptación y estabilidad que ambas posean
y puede ser modificada por factores
externos como la temperatura, el pH, la
fuerza iónica, el tiempo de incubación, la
concentración antígeno anticuerpo y la
estructura antigénica. Estas reacciones, a
su vez, se encuentran condicionadas a
ciertas características como la afinidad,
avidez y la especificidad.
Una manera más efectiva para determinar
el complejo Ag-Ac, es realizar diferentes
técnicas de inmunoanálisis, entre estas se
encuentran las técnicas basadas en la
reacción de aglutinación, las técnicas
basadas en la reacción de precipitación, las
que se basan en la reacción de
fluorescencia que incluye la citometría de
flujo, las técnicas basadas en reacciones
marcadas con radioisótopos, las técnicas
basadas en la reacción enzimática, en la
reacción de inmunotransferencia y por
último la reacción de cromatografía de
afinidad.
PALABRAS CLAVE: Antígeno.
Anticuerpo. Inmunología.
ABSTRACT
The Sg-Ac complexes are studied by
immunology, which is a biological disease
that is made up of cells and molecules that
deal with infectious diseases and
originates from microbiology. The Ag-Ac
complex, also known as immune complex
or immune complex, is the result of
contact between an antibody and an agent,
which is characterized by being fast,
specific and spontaneous. The contact and
2. its union will depend on the adaptation and
the range of temperature and can be
modified by external factors such as
temperature, pH, ionic strength,
incubation time, antigen antibody
concentration and antigenic structure.
These reactions, in turn, are conditioned in
certain characteristics such as affinity,
avidity and specificity.
A more effective way to determine the Ag-
Ac complex, different immunoassay
techniques are performed, the techniques
based on the agglutination reaction, the
techniques based on the precipitation
reaction, which are based on the
fluorescence reaction that includes
cytometry of flow, the techniques based on
reactions with radioisotopes, the
techniques based on the enzymatic
reaction, the immunoblot reaction and the
last affinity chromatography reaction.
KEYWORDS: Antigen.Antibody.Immun
ology.
INTRODUCCIÓN
El término inmunidad ha hecho referencia
a la protección frente a la enfermedad y, de
forma más específica, frente a las
enfermedades infecciosas. Las células y
las moléculas responsables de la
inmunidad constituyen el sistema
inmunitario, y a su respuesta conjunta y
coordinada a la introducción de sustancias
extrañas se le llama respuesta inmunitaria
(1).
La inmunología es el estudio de las
respuestas inmunitarias en este sentido
amplio y de los acontecimientos celulares
y moleculares que se producen después de
que un organismo se encuentra con
microbios y otras macromoléculas
extrañas (1).
Otra definición es que la Inmunología es la
ciencia que estudia todos los aspectos del
sistema inmunitario normal y patológico,
aunque la delimitación anatómica y
funcional del sistema inmunitario es algo
aún impreciso. Inmunología es una
disciplina que trata del estudio,
diagnóstico y tratamiento de pacientes con
enfermedades causadas por alteraciones de
los mecanismos inmunológicos y de las
situaciones en las que las manipulaciones
inmunológicas forman una parte
importante del tratamiento y/o de la
prevención (2)
A principios del siglo xx, Paul Ehrlich
propuso que las células inmunitarias
usaban receptores, a los que llamó cadenas
laterales, para reconocer toxinas
microbianas y que después los secretaban
para combatir los microbios. También
acuñó el término anticuerpos (antikorper
en alemán) para las proteínas séricas que
se unían a las toxinas, y a las sustancias
que estimulaban la producción de
anticuerpos se las llamó antígenos. La
moderna definición de antígenos abarca
sustancias que se unen a receptores
específicos de los linfocitos, estimulen o
no las respuestas inmunitarias. Según
definiciones estrictas, las sustancias que
estimulan respuestas inmunitarias se
llaman inmunógenos (1).
Los anticuerpos son proteínas circulantes
que se producen en los vertebrados en
respuesta a la exposición a estructuras
extrañas conocidas como antígenos. Los
anticuerpos son increíblemente diversos y
específicos en su capacidad para reconocer
estructuras moleculares extrañas, y son los
principales mediadores de la inmunidad
humoral contra todas las clases de
microbios. Los anticuerpos, las moléculas
3. de complejo principal de
histocompatibilidad (MHC) y los
receptores del linfocito T para el antígeno
son las tres clases de moléculas que utiliza
el sistema inmunitario adaptativo para
unirse a los antígenos. De estos tres, los
anticuerpos reconocen el espectro más
amplio de estructuras antigénicas, tienen la
mayor capacidad de discriminar entre
diferentes antígenos y se unen a los
antígenos con mayor fuerza. Los
anticuerpos representan la primera de los
tres tipos de moléculas ligadoras de
antígenos que se descubrieron y
caracterizaron (1).
Inmunocomplejo, es un complejo
compuesto por antígenos y anticuerpos en
la respuesta mediada por inmunidad
humoral tipo III o precipitínica (3).
DESARROLLO
Calderón (4) citado de Vargas (5) explicó
que durante las primeras décadas del siglo
XX Karl Landsteiner hizo grandes
contribuciones inmunoquímicas habland
o por primera vez sobre las reacciones
entre antígenos y anticuerpos.
Anónimo (6) citado de Vargas (5) delimitó
como antígenos a las moléculas que
radican en la superficie del agente
patógeno o en las sustancias que éste
produce y que son los responsables de
estimular la producción de anticuerpos.
Por otro lado, los anticuerpos,
denominados también inmunoglobulinas,
son glucoproteínas que se presentan en
respuesta a la presencia de un antígeno
localizado en la sangre o en cualquier tipo
de secreción corporal.
Cualquier forma o superficie disponible en
una molécula que pueda reconocer un
anticuerpo constituye un determinante
antigénico o epítopo (1).
Todas las funciones de los anticuerpos
dependen de su capacidad para unirse de
forma específica a los antígeno (1).
Cabrera (7) y Bautista (8) citados de
Vargas (5) describieron que la reacción
antígeno- anticuerpo, denominada también
inmunocomplejo o complejo inmune, se
produce a partir del contacto entre un
antígeno y un anticuerpo y se caracteriza
por ser rápida, específica y espontánea.
Esta unión dependerá de la adaptación y
estabilidad que ambas posean, si estos son
afines tendrán mayor fuerza de
interacción, de todas maneras, esta unión
será reversible y puede ser modificada por
factores externos.
Bautista (8) citado de Vargas (5)
estableció que los principales factores que
pueden afectar la reacción antígeno-
anticuerpo son:
Temperatura: Los anticuerpos IgM
reaccionan a una temperatura que varía
de 4 a 27°C y los antígenos y los
anticuerpos IgG tendrán una mejor
reacción a los 37°C, por lo tanto la
detección de anticuerpos se podrá
realizar en distintas temperaturas.
pH: Se dice que la mayoría de los
grupos sanguíneos significativos se
detectan cuando el pH varía de 6 a 7.3.
Fuerza iónica: Donde la asociación
antígeno- anticuerpo se ve impedida
por la neutralización parcial de cargas
opuestas, producto de la concentración
de iones de Na y Cl alrededor de los
antígenos y anticuerpos.
4. Tiempo de incubación: Este tiempo
dependerá del medio en el que se
encuentren los antígenos, lo ideal será
30 minutos a 37°C para detectar la
mayor cantidad de anticuerpos
clínicamente significativos.
Concentración antígeno- anticuerpo: la
cantidad de anticuerpos y la cantidad
de sitios antigénicos interfieren en una
reacción de aglutinación, puesto que el
exceso de anticuerpos, por lo general,
inhibe la aglutinación.
Estructura antigénica: Los antígenos
son moléculas conformadas por 3 o 4
azúcares, lo que determina su
especificidad.
Características de la reacción antígeno-
anticuerpo
Cabrera (7) e Iáñez (9) citados por Vargas
establecieron que
estas reacciones antígeno-anticuerpo,
dependerán principalmente de la
naturaleza del antígeno y del anticuerpo
además de las condiciones de la reacción
que se llevan a cabo debido a ciertas
características, estas son:
Afinidad: Representa la fuerza de unión
entre el epítope y zona combinante de un
antígeno y un anticuerpo respectivamente.
Avidez: Representa la fuerza de unión
entre un antígeno y un anticuerpo, ambos
multivalentes, es decir que posean más de
un lugar de unión.
Especificidad: Probabilidad que existe de
que un anticuerpo en particular se una a un
epítope preciso del antígeno (4).
Reactividad cruzada: Sucede cuando dos
antígenos diferentes comparten un mismo
epítope antigénico.
Técnicas basadas en reacción de la
fluorescencia
Cabrera (7), Tortora (10) Ingraham (11) y
Aguilar (12) citados de Vargas (5)
describen como esta técnica utiliza la
fluorescencia para marcar los anticuerpos
que se unen de manera covalente a un
fluorocromo. Según la capacidad de
absorción que posean los anticuerpos,
existirán varios métodos de
inmunofluorescencia.
Método directo: Donde un anticuerpo
específico es marcado con
fluorescencia, este al reaccionar frente
al antígeno, lo hace de manera óptima.
Método indirecto: Es una técnica de
microscopia que, al igual que la
anterior, utiliza un marcador
fluorescente. Esta técnica incuba el
antígeno con un anticuerpo fijado a un
portaobjetos y luego completa la
reacción con otro anticuerpo marcado
con fluorescencia.
Tinción del complemento: Similar a la
técnica del método indirecto solo
difiere por la añadidura de un
complemento marcado con
fluorescencia, será de gran utilidad
para la detección, no solo de antígenos,
sino también de anticuerpos
desconocidos en el suero del paciente.
Método en sándwich: Se utiliza para
detectar anticuerpos, en los estudios de
biopsias principalmente.
Por características distintas a las
anteriores, existen otras técnicas de
fluorescencia.
Citometría de flujo: Esta técnica es
llamada también clasificación celular
electrónica, es rápida y permite el
estudio de las células de manera
5. individual, sus resultados serán
representados de manera gráfica a
través de histogramas. (4) (13) [citado
en (5)]
Técnicas basadas en reacciones
marcadas con radioisótopos
Se encontró en (4) (7) [citado en (5)] que
dentro de estas técnicas se encuentra la
reacción de radioinmunoensayo que
consiste en la competencia entre una
muestra radiomarcada y otra sin marca.
Después de un tiempo determinado los
resultados son evaluados tomando en
cuenta la radioactividad residual. Existen
dos tipos de Radioinmunoensayos (RIA),
estos son:
RIA convencional: A un antígeno
sensibilizado se le añade el antígeno
buscado, después se agrega una anti-
inmunoglobulina con marca
radioactiva, después del lavado se
realiza el conteo. Cuanto mayor
radiación, mayor será la cantidad de
anticuerpos problema.
RIA competitivo: Como su nombre lo
dice, el antígeno problema compite
con el antígeno radioactivo para unirse
al anticuerpo.
Técnicas basadas en la reacción
enzimática
Dentro de (4) (7) (10) y (14) [citados en
(5)] se describe como estas técnicas
utilizan como marcadores
inmunoquímicos a enzimas. Se puede
mencionar dos tipos de
enzimoinmunoanálisis (EIA), estas son:
o Homogéneo: Donde la actividad
enzimática es modulada por el
inmunocomplejo.
o Heterogéneo (ELISA): Es el método
más utilizado por la sensibilidad que
posee y es similar al
radioinmunoanálisis.
Para medir la actividad enzimática
requiere de un paso antes de la separación
de los complejos antígeno- anticuerpo.
Existen tres tipos de técnica ELISA: La
primera es la técnica sándwich, utilizada
para determinar los antígenos presentes en
una muestra; la segunda es la técnica de
captura donde se detecta los anticuerpos
existentes en la muestra; por último, la
técnica competitiva, esta se basa
principalmente en la detección de
antígenos.
Técnicas basadas en la
reacción de inmunotransferencia
Llamada también inmunoblotting, es muy
similar a la reacción de enzimo
inmunoanálisis, puesto que utiliza enzimas
para la marcación de anticuerpos.
Conjuntamente con la electroforesis es
utilizada para el análisis de la mezcla e
interacción de antígenos con anticuerpos.
La inmuno electrotransferencia a través de
la transferencia proteica prevé que las
proteínas que se encuentran en la
superficie de membranas sintéticas se
inmovilicen para su tinción y posterior
detección (4) (7) [Citados en (5)].
Técnicas basadas en la reacción de
cromatografía de afinidad
Esta técnica hace uso de las interacciones
específicas que tengan los
inmunocomplejos para el aislamiento de
antígenos o anticuerpos puros. Su
aplicación es rápida y sencilla y por su alta
selectividad es una de las técnicas más
utilizada en Bioquímica e Inmunología.
6. En algunos casos este método ocasionará
en las moléculas una desnaturalización
irreversible, por lo que la técnica debe
realizarse cuidadosamente (4) (7) [Citados
en (5)].
MATERIALES
Se llevó a cabo el uso de 2 textos de
inmunología, que cumplían con el
contenido adecuado para realizar la
investigación, además de la búsqueda de
material relevante en conocidas revistas
científicas Latinoamericanas, en donde
podemos encontrar información tanto
actual como fidedigna. Por último se
aplicó el uso de páginas web conocidas de
segura procedencia para complementar la
investigación llevada a cabo.
MÉTODOS
Se utilizó un método descriptivo- analítico
debido a los parámetros necesarios que
exigían la presente revisión, entra los
cuales estaba detallar de manera muy
simplificada y concreta, los aspectos más
relevante acerca de las reacciones que se
den entre los anticuerpos y los antígenos.
RESULTADOS
Los complejos inmunes pueden por si
mismos causar enfermedad al ser
depositados en los órganos, por ejemplo,
en algunas formas de vasculitis. Esta es la
tercera forma de hipersensibilidad en la
clasificación de Gell-Coombs,
llamada hipersensibilidad tipo III (15).
DISCUSIÓN
El depósito de complejos inmunes es una
característica importante en algunas
enfermedades autoinmunes como el lupus
eritematoso
sistémico, crioglobulinemia, artritis
reumatoidea, esclerodermia y enfermedad
de Sobren (15).
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