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Pruebas especiales para la detección y
cuantificación de anticuerpos
INSTITUTO TECNOLÓGICO DE SONORA
Departamento de Ciencias Agronómicas y Veterinarias
PE de Medicina Veterinaria y Zootecnia
Integrantes:
Janitzin Herrera Valenzuela ID: 136477
Jonathan Eliud Gaytan Romero ID: 136295
Siria Carolina Muñoz Ochoa ID: 136516
Inmunología Veterinaria
Ciudad Obregón, Sonora 11-11-2015
ELISA
Técnica de laboratorio que permite detectar pequeñas
partículas llamadas antígenos, que habitualmente son
fragmentos de proteínas. La identificación es específica, es
decir, consigue que pequeños segmentos de proteínas
destaquen y no puedan ser confundidas con otras.
Para poder identificar los antígenos se utilizan moléculas
con dos componentes acoplados: un anticuerpo (que se
une al antígeno de forma específica) y una enzima (que se
activa y señala la unión al antígeno
Tipos de ELISA:
•ELISA directo
•ELISA indirecto
•ELISA sándwich
Fijación del complemento
Esta técnica se basa en que los complejos antígeno-
anticuerpo fijan el complemento. Una vez producida esta
reacción, se añade complemento y un sistema indicador
que está formado por eritrocitos de carnero recubiertos de
anticuerpos. En la muestra clínica que existan anticuerpos
se fijará el complemento y no se producirá la lisis del
sistema indicador
Neutralización del virus
Esta prueba se basa en la perdida de la capacidad infectiva de un
virus al unirse al anticuerpo especifico, formando un complejo
antigeno-anticuerpos
Las pruebas de neutralizacion van dirigidas a la deteccion de
anticuerpos capaces de bloquear los epitopos criticos del patogeno.
Donde normalmante suelen tener una interpretacion biologica
correlacionada con la proteccion.
Sin embargo, no suelen ser útiles para diferenciar respuestas entre
animales infectados y vacunados ya que la mayoria de vacunas
inducen anticuerpos neutralizantes.
Identificación del virus por
microscopia inmunoelectrica
Esta técnica permite la visualización de complejos
antígeno / anticuerpo que son específicos para un virus
en particular. En este método se obtienen cortes ultra
finos (de la muestra) y se incuban con un anticuerpo
específico para el virus. Después de un paso de lavado,
el corte se incuba con Proteína A conjugada con
partículas de oro (de un rango de 5 a 20 nm). Este
conjugado se une a la porción Fc del anticuerpo y se
detecta por microscopía electrónica.
Inhibición de la aglutinación
¿Qué es?
Es un método sensible y específico para la identificación de pequeñas
cantidades de antígeno soluble en la sangre o en otros líquidos de los
tejidos.
¿Para que es utilizada?
Para identificar virus con capacidad hemoaglutinante presentes en una
muestra dada (virus influenza, parainfluenza, etc.), que al unirse a los
anticuerpos específicos, pierden esta propiedad.
La prueba se lleva a cabo en dos etapas:
•Directa: Los antígenos presentes en la superficie de las partículas
reaccionan directamente con el anticuerpo homólogo formando grumos.
•Indirecta: Los antígenos se acoplan a partículas que funcionan como
soportes, estas partículas pueden ser eritrocitos o poliestireno (látex).
Lectura:
•Positiva: Se observa formación de grumos teñidos y el resto
del líquido permanece claro.
•Negativa: La mezcla permanece sin cambios.
Aplicaciones más habituales:
•Diagnóstico de enfermedades infecciosas del hombre y de
los animales.
•Determinación de grupos sanguíneos eritrociticos.
•Identificación y clasificación de bacterias.
•Determinación de la presencia de anticuerpos.
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Pruebas especiales para la detección y cuantificación de anticuerpos

  • 1. Pruebas especiales para la detección y cuantificación de anticuerpos INSTITUTO TECNOLÓGICO DE SONORA Departamento de Ciencias Agronómicas y Veterinarias PE de Medicina Veterinaria y Zootecnia Integrantes: Janitzin Herrera Valenzuela ID: 136477 Jonathan Eliud Gaytan Romero ID: 136295 Siria Carolina Muñoz Ochoa ID: 136516 Inmunología Veterinaria Ciudad Obregón, Sonora 11-11-2015
  • 2. ELISA Técnica de laboratorio que permite detectar pequeñas partículas llamadas antígenos, que habitualmente son fragmentos de proteínas. La identificación es específica, es decir, consigue que pequeños segmentos de proteínas destaquen y no puedan ser confundidas con otras. Para poder identificar los antígenos se utilizan moléculas con dos componentes acoplados: un anticuerpo (que se une al antígeno de forma específica) y una enzima (que se activa y señala la unión al antígeno
  • 3. Tipos de ELISA: •ELISA directo •ELISA indirecto •ELISA sándwich
  • 4. Fijación del complemento Esta técnica se basa en que los complejos antígeno- anticuerpo fijan el complemento. Una vez producida esta reacción, se añade complemento y un sistema indicador que está formado por eritrocitos de carnero recubiertos de anticuerpos. En la muestra clínica que existan anticuerpos se fijará el complemento y no se producirá la lisis del sistema indicador
  • 5. Neutralización del virus Esta prueba se basa en la perdida de la capacidad infectiva de un virus al unirse al anticuerpo especifico, formando un complejo antigeno-anticuerpos Las pruebas de neutralizacion van dirigidas a la deteccion de anticuerpos capaces de bloquear los epitopos criticos del patogeno. Donde normalmante suelen tener una interpretacion biologica correlacionada con la proteccion. Sin embargo, no suelen ser útiles para diferenciar respuestas entre animales infectados y vacunados ya que la mayoria de vacunas inducen anticuerpos neutralizantes.
  • 6. Identificación del virus por microscopia inmunoelectrica Esta técnica permite la visualización de complejos antígeno / anticuerpo que son específicos para un virus en particular. En este método se obtienen cortes ultra finos (de la muestra) y se incuban con un anticuerpo específico para el virus. Después de un paso de lavado, el corte se incuba con Proteína A conjugada con partículas de oro (de un rango de 5 a 20 nm). Este conjugado se une a la porción Fc del anticuerpo y se detecta por microscopía electrónica.
  • 7. Inhibición de la aglutinación ¿Qué es? Es un método sensible y específico para la identificación de pequeñas cantidades de antígeno soluble en la sangre o en otros líquidos de los tejidos. ¿Para que es utilizada? Para identificar virus con capacidad hemoaglutinante presentes en una muestra dada (virus influenza, parainfluenza, etc.), que al unirse a los anticuerpos específicos, pierden esta propiedad. La prueba se lleva a cabo en dos etapas: •Directa: Los antígenos presentes en la superficie de las partículas reaccionan directamente con el anticuerpo homólogo formando grumos. •Indirecta: Los antígenos se acoplan a partículas que funcionan como soportes, estas partículas pueden ser eritrocitos o poliestireno (látex).
  • 8. Lectura: •Positiva: Se observa formación de grumos teñidos y el resto del líquido permanece claro. •Negativa: La mezcla permanece sin cambios. Aplicaciones más habituales: •Diagnóstico de enfermedades infecciosas del hombre y de los animales. •Determinación de grupos sanguíneos eritrociticos. •Identificación y clasificación de bacterias. •Determinación de la presencia de anticuerpos.
  • 9. Gracias por su Atención 
  • 10. Gracias por su Atención 