El documento describe las etapas de un experimento analítico: 1) identificación y definición del problema, 2) diseño del procedimiento experimental, 3) ejecución del experimento y recopilación de datos, 4) análisis de los datos experimentales, y 5) propuesta de solución al problema. Además, incluye información sobre métodos instrumentales, validación de métodos y conceptos como precisión, exactitud y sensibilidad.

2. • Identificación y definición del problemaIdentificación y definición del problema
• Diseño del procedimiento experimentalDiseño del procedimiento experimental
• Ejecución del experimento y recopilación de datosEjecución del experimento y recopilación de datos
• Análisis de los datos experimentalesAnálisis de los datos experimentales
• Propuesta de solución al problemaPropuesta de solución al problema
““Concentración de paracetamol en un comprimido de Kitadol®”Concentración de paracetamol en un comprimido de Kitadol®”

5. Propiedades Métodos instrumentales
Emisión de radiación Espectroscopía de emisión (rayos X, UV, Visible)
fluorescencia, fosforescencia.
Absorción de radiación Espectrofotometría, fotometría, resonancia
magnética nuclear
Dispersión de radiación Turbidimetría, nefelometría
Refracción de radiación Refractometría, interferometría
Potencial eléctrico Potenciometría, cronopotenciometría
Carga eléctrica Culombimetría
Corriente eléctrica Polarografía, amperometría

6. El instrumento transforma la información relacionada con las propiedades físicas o
químicas del analito en información factible de ser manipulada e interpretada.

9. Lo primero a realizar es definir con claridad la naturaleza del problema
analítico, para ello se debe contestar:
I. ¿Qué exactitud se requiere?
II. ¿De cuanta muestra se dispone?
III. ¿En qué intervalos de concentraciones está el analito?
IV. ¿Qué componentes de la muestra interfieren?
V. ¿Cuáles son las propiedades físicas y químicas de la matriz?
VI. ¿Cuántas muestras hay que analizar?

10. Los criterios cuantitativos de funcionamiento de los instrumentos que
se deben considerar para decidir si un determinado método
instrumental es o no adecuado, son los siguientes:
I. Precisión
II. Exactitud
III. Sensibilidad
IV. Límite de detección
V. Intervalo de concentración
VI. Selectividad
VII. Robustez

11. 10 µL
3 mL
1 mL 1 mL
¿Cómo saber si se ha¿Cómo saber si se ha
cometido algún error?cometido algún error?
Replicas o repeticionesReplicas o repeticiones

12. Cualquier error por el que una medición o resultado es siempre demasiado
alto o demasiado bajo, los resultados erróneos son siempre en el mismo
sentido. Su origen se puede identificar (afecta a la exactitud).
Cualquier error por el cual algunas mediciones o resultados son muy altos o
bajos , caen a ambos lados del valor medio (afecta a la precisión).
Se manifiestan cuando un sistema de medición se utiliza a su máxima
sensibilidad. Se debe a numerosas variables no controladas que son parte
inevitable de toda medición física o química, no se pueden identificar o medir
con certeza.

14. La frecuencia de distribución que presenta una curva gaussiana tiene las
siguientes características:
-El resultado que se observa con mayor frecuencia es la media del conjunto
de los datos
-Los resultados se agrupan de forma simétrica alrededor del valor medio
-Es más frecuente encontrar pequeñas divergencias respecto al valor medio
central que grandes divergencias
-En ausencia de errores sistemáticos, la media de un conjunto de datos
grandes se aproxima al valor verdadero

16. Los errores sistemáticos son de tres tipos: INSTRUMENTALES, PERSONALES Y DEL
MÉTODO
INSTRUMENTALES:
-Deriva en los circuitos eléctricos
-Fugas en sistemas de vacío
-Efecto de la temperatura en detector
-Errores de calibración en los medidores,
pesas y equipos volumétricos
Corrección mediante calibración periódica de los equiposCorrección mediante calibración periódica de los equipos

17. PERSONALES: se introducen en una medida como consecuencia de los criterios
que debe adoptar el analista
-Color de una disolución en el punto final de una valoración
-La intensidad relativa de dos haces de luz
-Leer un indicador alto de forma persistente
-Ceguera al color, etc
MÉTODO: aparecen como consecuencia del comportamiento químico o físico no
ideal de los reactivos y de las reacciones en las que se basa un análisis
-Reacciones lentas e incompletas
-Pérdidas por volatilidad, adsorción del analito sobre sólidos, etc
VALIDACIÓN DEL MÉTODOVALIDACIÓN DEL MÉTODO

18. E = Xi - Xt
Donde xi es el valor aceptado como real y xt el valor medido. El signo + o – se
mantiene para expresar si el valor medido es mayor o menor al real.
E = xi - Xt / Xt x 100

19.  Para conocer la exactitud de los resultados obtenidos es necesario realizarPara conocer la exactitud de los resultados obtenidos es necesario realizar
análisis de estándares.análisis de estándares.
 Para medir el nivel de interferencia de la matriz, es necesario analizar un blanco.Para medir el nivel de interferencia de la matriz, es necesario analizar un blanco.

20. Problemática: Determinar el contenido de mercurio en el aguaProblemática: Determinar el contenido de mercurio en el agua

21. Decidir cómo obtener una muestra para su análisis depende de:Decidir cómo obtener una muestra para su análisis depende de:
- Tamaño del lote del que se ha de tomar la muestraTamaño del lote del que se ha de tomar la muestra
- El estado físico de la fracción de muestra que se ha de analizarEl estado físico de la fracción de muestra que se ha de analizar
- Las características químicas del material que se ha de analizarLas características químicas del material que se ha de analizar
““La toma de la muestra va ligado directamente al método de análisis”La toma de la muestra va ligado directamente al método de análisis”

23.  Si la muestra no es representativa los resultados del análisis noSi la muestra no es representativa los resultados del análisis no
reflejarían con exactitud su contenido en la muestra.reflejarían con exactitud su contenido en la muestra.
 La mayoría de los materiales de los cuales se toman muestras sonLa mayoría de los materiales de los cuales se toman muestras son
heterogéneos.heterogéneos.
 El muestreo debe ser a tiempos regulares y fijo en forma y métodoEl muestreo debe ser a tiempos regulares y fijo en forma y método
Apilar y dividir en cuartosApilar y dividir en cuartos

24. Muestreo en etapas: permite conocer mejor las características deMuestreo en etapas: permite conocer mejor las características de
distribución del analito en la matriz.distribución del analito en la matriz.
““Muestreo jerárquico múltiple”Muestreo jerárquico múltiple”

25. ““el establecimiento de la evidencia documental de que unel establecimiento de la evidencia documental de que un
procedimiento analítico conducirá, con un alto grado de seguridad, aprocedimiento analítico conducirá, con un alto grado de seguridad, a
la obtención de resultados precisos y exactos, dentro de lasla obtención de resultados precisos y exactos, dentro de las
especificaciones y los atributos de calidad previamenteespecificaciones y los atributos de calidad previamente
establecidosestablecidos”.”.
El proceso de validación contempla varias fases que se deben llevar aEl proceso de validación contempla varias fases que se deben llevar a
cabo para conocer las características de fiabilidad del método, quecabo para conocer las características de fiabilidad del método, que
son las que demuestran la capacidad de un método analítico parason las que demuestran la capacidad de un método analítico para
mantener a lo largo del tiempo los criterios fundamentales demantener a lo largo del tiempo los criterios fundamentales de
validaciónvalidación

26. Los métodos analíticos están sometidos a interferencias químicas yLos métodos analíticos están sometidos a interferencias químicas y
físicas que contribuyen a la incertidumbre del análisis.físicas que contribuyen a la incertidumbre del análisis.
Cuando el método está libre de estas interferencias se puede decir queCuando el método está libre de estas interferencias se puede decir que
es robusto.es robusto.
La robustez de un método garantiza que este pueda ser utilizado enLa robustez de un método garantiza que este pueda ser utilizado en
distintas condiciones en diversas matrices.distintas condiciones en diversas matrices.
Variable Bajo Alto Óptimo
% ACN* en la fase móvil (v/v) 4.0 6.0 6.0
Flujo (mL min-1
) 0.6 1.0 0.7
pH 2.2 2 6 2.6

27. Identificar cuales son los factores que tienen mayor influencia
Método ultravioleta para determinar fosforo en suero
Fosfato + ion molibdato = complejo inorgánico molibdato fosfórico
= 340 nmʎ
Analistas
Tiempo y
temperatura de
reacción
 Almacenamiento
 Técnica manual o automatizada

28. Método ultravioleta para determinar melatonina en cápsulas
Mediciones a 307 nm, solución de 30 µg/mL
Soluciones de pH 3-5
50°C – 4°C

29. La precisión es la medida de la dispersión de los datos entorno a un
valor central y puede expresarse como rango, desviación estándar o
varianza.
Por lo general se divide en dos categorías: repetibilidad y
reproducibilidad.
i. Repetibilidad: precisión de un análisis en el que la única fuente de
variación es el análisis de muestras repetidas
ii. Reproducibilidad: precisión obtenida cuando se comparan los
resultados de distintas muestras, distintos análisis o distintos
métodos.

30. Precisión
Repetibilidad
Precisión
intermedia
Instrumental
Del método
Reproducibilidad

31. La precisión se ve afectada por los errores aleatorios, como se
distribuyen aleatoriamente en torno al valor central, los errores
positivos y negativos tienden a compensarse, siempre que el número de
mediciones sea suficientemente grande.

32. Nº de inyección Área (mvolts* seg)
1 54493
2 55358
3 55401
4 55447
5 56001
6 55691
Promedio 55399
DE 505
DER% 0.91

33. Extracto
1
Extracto
2
Extracto
3
Extracto
4
Extracto
5
S CV%
Área
promedio
2488,8 2203,1 2413,5 2137,3 2203,4 152,6 6,67
tr 12,185 12,185 12,183 12,182 12,182 0,0015 0,012
 5 extractos a un nivel de sobrecarga de 0,8 ppm

34.  5 extractos a un nivel de sobrecarga de 0,8 ppm en dos días distintos
Día 1 Día 2
Promedio 2289,2 2624,3
S 152,6 191,8
CV% 6,67 7,31
CV% 6,98

35. La exactitud es una medida de la proximidad entre la medida de
tendencia central y la verdad o el valor esperado.
Los errores que afectan a la exactitud de un análisis se llaman
sistemáticos y se caracterizan por una desviación sistemática en relación
con el valor verdadero, es decir, todas las medidas individuales son
demasiado pequeñas o demasiado grandes.
Sobrecarga µg mLSobrecarga µg mL-1-1
Recuperación %Recuperación % DER%DER%
300300 94± 4.24 4.51
600600 85± 0.71 0.84
900900 90± 0.71 0.79

37. Es la medida de la capacidad para
diferenciar pequeñas variaciones
en la concentración del analito.
La definición cuantitativa de
sensibilidad para la IUPAC es
“sensibilidad de calibrado”, es
decir la pendiente de la curva de
calibración a la concentración en
estudio.
S = mc + Sbl

38. Sensibilidad
Sensibilidad de
calibración
Pendiente de
la curva
Sensibilidad
analítica
LD y LC

40. Se define como la mínima masa de analito que se puede detectar para
un nivel de confianza dado.
Este límite depende de la relación entre la magnitud de la señal analítica
y el valor de las fluctuaciones estadísticas de la señal del blanco.
Según IUPAC es la menor concentración o cantidad absoluta de un
analito que produce una señal significativamente mayor que la que se
obtiene con un blanco.
I. Método del error típico
II. Método de la inspección visual
III. Método de la desv. St. del blanco

43. Se define como la menor concentración de analito que puede
determinarse con precisión y exactitud razonables en las condiciones
establecidas y se expresa en unidades de concentración.
Límite de detección (LOD): 3 * Sbl / m
Límite de cuantificación (LOQ): 10 * Sbl / m

44. Se define como el intervalo
desde la concentración más
pequeña a la que se puede
realizar una medida
cuantitativa hasta la
concentración a la que la
curva de calibrado se
desvía de la linealidad.

45. Independiente de la apariencia lineal de la recta es conveniente evaluar
los estimadores de regresión es un intervalo de confianza dado:
• Del coeficiente de regresión (r) : se determina para evaluar el ajuste al
modelo lineal propuesto
• De la pendiente (m): se determina como parámetro de sensibilidad
• De la ordenada en el origen (b): para evaluar la proporcionalidad de la
función analítica, que la recta pase por el origen y que cualquier
desviación pueda adjudicarse únicamente a un error aleatorio.

46. Este parámetro se refiere a la propiedad del método de producir una señal
medible debida solo a la presencia del analito, libre de interferencias de
otros componentes, en la matriz de la muestra.
Indica el grado de ausencia de interferencias con otras especies que
contiene la matriz de la muestra.
Estos compuestos pueden ser excipientes de un fármaco, productos de
degradación, subproductos o productos laterales de síntesis de una droga,
metabolitos del mismo analito en un fluido biológico, etc.

49. DON
Blanco de matriz de trigo

50. DON
Muestra de trigo naturalmente contaminada con deoxinivalenol

51. DON
HT-2
T-2
Muestra de trigo con tres toxinas de Fusarium DON, HT-2 y T-2

52. En productos farmacéuticos se evalúan las rutas de degradación con el fin
de realizar un ensayo de degradación artificial:
• Termólisis (por calentamiento de la droga a una t° fija)
• Hidrólisis (por calentamiento a reflujo con agua durante 1 hora)
• Hidrólisis alcalina (por calentamiento a reflujo con NaOH 1 N por 1 hora)
• Hidrólisis ácida (por calentamiento a reflujo con HCl 1 N por 1 hora)
• Fotólisis (por exposición de la droga y una solución de ella a radiación UV
o luz directa)
• Oxidación (calentamiento a baño maria de una solución de la droga con
gotas de agua oxigenada o burbujeo de hidrógeno)
“+ pureza“

53. nm
200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300
mAU
0
2
4
Alimento extruido Ascorbil 2-monofosfato

55. Consiste en una disminución o aumento de la respuesta instrumental del
analito debido a la presencia de otros componentes.
El efecto matriz provoca un error sistemático proporcional, es decir,
dependiente de la concentración de analito en la muestra.

56. Además de los parámetros de calidad se deben considerar las
siguientes características:
1.- Velocidad
2.- Facilidad y comodidad
3.- Habilidad del operador
4.- Costo y disponibilidad del equipo
5.- Costo por muestra.

57. La exactitud de la estandarización depende de la calidad de los reactivos y
del material de vidrio que se utilicen para preparar los estándares.
- Elevada purezaElevada pureza
- Composición conocidaComposición conocida
- Estable a temperatura ambienteEstable a temperatura ambiente
- Ser posible de secar en estufaSer posible de secar en estufa
Pesar X gPesar X g
Solución de concentraciónSolución de concentración
conocidaconocida

58. - reactivo cuya pureza hay que establecer por comparación con un patrónreactivo cuya pureza hay que establecer por comparación con un patrón
primarioprimario

59. - Aquella estandarización que utiliza un solo patrón con una cantidad conocida deAquella estandarización que utiliza un solo patrón con una cantidad conocida de
analitoanalito
K =K = SS refref
CC ss
- Cualquier incertidumbre del valor de K aumenta la incertidumbre de laCualquier incertidumbre del valor de K aumenta la incertidumbre de la
concentración del analitoconcentración del analito
- Se prefiere laSe prefiere la estandarización con varios puntosestandarización con varios puntos

60. La mayoría de los métodos instrumentales requieren de una calibración,
proceso que implica relacionar la señal analítica medida con la
concentración del analito. Los tres métodos más utilizados son:
I. Curvas de calibrado
II. Método de la adición estándar
III. Método del patrón interno

61. • Se requieren varios estándares de concentraciones conocidas del analito de
interés.
• Se requiere un blanco que contenga los componentes de la muestra original
excepto el analito.
• Se representa una gráfica de respuesta del instrumento v/s concentración del
analito.

63. Este método se utiliza para muestras complejas en las cuales la matriz
puede interferir de manera importante.
Se adicionan diferentes volúmenes de una disolución patrón a varias
alícuotas de la muestra del mismo tamaño.
El valor del volumen en la intersección de la línea recta con el eje x es el
volumen del reactivo estándar equivalente a la cantidad de analito en la
muestra.

65.  Un patrón interno es una sustancia que se añade a todas las
muestras, blancos y patrones de calibrado en una cantidad fija.
Concentración analito/Cst.int.
áreaanalito/áreast.int.
 Está ausente en la
muestra
 Se añade en
concentración fija y
conocida
 Este método sirve para
compensar algunos
errores aleatorios o
sistemáticos.

66. • Si el estándar interno y el analito responden proporcionalmente a los
errores instrumentales y fluctuaciones del método, la razón entre las señales
es independiente de las fluctuaciones.
• La mayor dificultad es encontrar un estándar interno adecuado, con señal
reproducible y que genere una señal similar a la del analito.

68. • Dígitos de una cantidad medida, incluyendo todos los dígitos conocidos y
un dígito cuya magnitud no se conoce con seguridad.
• Son importantes ya que reflejan la incertidumbre de la medida.
• Repasar las reglas para realizar redondeos de cifras significativas en los
cálculos

69. Las cifras significativas indican el error con el cual se midió una
determinada magnitud.
• Todas las cifras distintas de cero son significativas
• Los ceros a la derecha o entre dos cifras distintas de cero son significativos
• Los ceros a la izquierda NO son significativos

70. • Cuando la cifra siguiente a la que se va a conservar es menor a 5, la cifra
que se conserva queda inalterada.
23,4533 23,4523,4533 23,45
• Cuando la cifra siguiente a la que se va a conservar es 5 o mayor a 5, la
cifra que se conserva se debe aumentar en una unidad.
23,4567 23,4623,4567 23,46

71. Cuando un problema tiene varios datos el resultado final debe expresarse con
la misma cantidad de cifras significativas del dato que tenga menor cantidad
de cifras significativas.
Si se obtienen resultados parciales, en los mismos se debe dejar por lo menos
una cifra significativa más de las que se necesita tener en el resultado final.

72. 16.00
1.007
1.007
18.014 18.0118.01
El resultado de una adición/sustracción
no puede tener más dígitos significativos
a la derecha del punto decimal que el
término que menos contenga.
[(0.958)x 1 x (6.0221367 x 1022 ]
(18.01)
3
4
8
El resultado de una multiplicación/
división tiene tantas cifras
significativas como el factor que
menos tenga