Este documento define pirógenos como sustancias que inyectadas por vía parenteral pueden provocar fiebre. Explica que los pirógenos suelen proceder del metabolismo de microorganismos y pueden causar síntomas como dolor de cabeza y taquicardia. Describe las características, fuentes y métodos de despirogenación como destilación, adsorción con carbón activo y calentamiento. Finalmente, resume el procedimiento de control de pirógenos mediante la medición del aumento de la temperatura rectal en conejos después de la inye

1. Benemérita Universidad Autónoma
de Puebla
Facultad de Ciencias Químicas
Control de Formas Farmacéuticas
“Pirógenos”
Presenta:
Fanny Ahuatzin Teomitzi
Otoño 2018

2. Indice
2
Definición
Origen y naturaleza de lospirógenos
Características
Fuentesde pirógenos
Procedimientos dedespirogenación
Control depirógenos

3. Pirógenos
Sustancias que inyectadas por vía
parenteral que son capacesde provocar
un proceso febril en elpaciente

4. Pirógenos
Suelen ser sustancias procedentes del
metabolismo de microorganismos aunque
también hay algunos queproceden de otras
fuentes
Fuente: imágenesprediseñadas Office
4
Pueden
producir
Dolor de cabeza
Taquicardia
Disnea
Mialgia
Sepsis Muerte

5. Origen y naturaleza
*endotoxinas de bacterias Gram- : lipopolisacáridos (LPS)de la pared celular
bacteriana
Actúan ados niveles:
• directamente en el hipotálamo
• mediante la inhibición de la síntesis deIL
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Endógeno Exógeno
• Hormonas
tiroideas
• Citoquinas
• Adrenalina
• Principios activos
Anfotericina B
Atropina
EDTA
Partículas de sílice
• M.O.
Levaduras
Virus
Bacterias Gram ( + , -)

6. Características de lospirógenos
Termoestables (resisten esterilizacion en autoclave)
Pequeño tamaño 0.05-1 m(Pasanla mayoría de los filtrosde
0,2 m)
Retenidos por filtros de profundidad y porsustancias
adsorbentes
Sensibilidad segúnla especie:
tº de latencia hombre:1 h 15 min
Más fácil prevenir los pirógenos queeliminarlos
6

7. Fuentes de lospirógenos
Disolvente (agua): PRINCIPALFUENTEDEPIRÓGENOS
Sustanciasdisueltas (productos de origen biológico,glucosa,
aa)
Material
Fuente: imágenesprediseñadas Office
7
Fuente: imágenesprediseñadas Office

8. Precauciones para evitarpirógenos
8
Almacenamiento de
agua innecesario
Evitar
estancamiento de
agua (evitar
desarrollo de M.O.)
Reactivos libres de
pirógenos
Lavar material con
ácidos y bases
En juagar con agua
libre de pirógenos
> 200ªC
Precauciones para
evitar pirógenos

9. Procedimientos dedespirogenación
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1. Destilación (agualibre depirógenos)
2. Adsorción sobre carbónactivo
◦ Desventaja: alta afinidad por moléculas no-ionizadas de compuestoscon
elevado PM
3. Tratamiento con agentesoxidantes: H2O2, hipoclorito Na
4. Filtración:
◦ Filtros enprofundidad
◦ Membranas de ultrafiltración porosidad: 0,2-0,002mm
5. Calentamiento en medio ácido oalcalino:
◦ HCl 0,1 N 30 min, 100 °C inactiva LPSporhidrólisis
◦ NaOH0,1 Nen etanol 95 %ó dimetilsulfóxido al 80%
 saponificación del ácido grasodelLPS
6. Calor seco: tª >250°C,30 min (vidrio, equiposmetálicos)
7. Otros métodos: ósmosis inversa, técnicascromatográficas,
etc

10. FEUM
MGA 0316. DETERMINACION
DE ENDOTOXINAS BACTERIANAS
MGA 0711. PRUEBA DE PIRÓGENOS
Procedimientos dedespirogenación
Lisado de amebocitos
Método de formación de
gel (Prueba limite)
Utiliza Conejos

11. Control depirógenos
1. Métodobasadoen la medida del aumento de la Tª rectal en
conejos
◦ universal
◦ Consiste en medir el aumento de temperatura corporal que provocala
administracion intravenosa en conejos de una solución estéril de la
sustancia aexaminar
Fuente: imágenesprediseñadas Office
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12. Reactivos Consideración
Cloruro de sodio libre de pirógenos. Calentar el cloruro de sodio a 200°C por no menos de 2 h.
Carbonato de sódio libre de
pirógenos.
Calentar el carbonato de sodio anhidro a 170°C durante no menos de 4 h.
Agua libre de pirógenos Utilizar agua purificada por destilación u otra tecnología equivalente 0
superior que demuestre la eliminación de agentes pirogénicos Verificar la
ausencia de pirógenos agregando cloruro de sodio al 0.9 % e inyectar 10
mL/kg de peso del conejo.
Solución salina al 0.9 %. Disolver el cloruro de sodio en agua, ambos libres de pirógenos, esterilizar en
autoclave. Verificar la ausencia de pirógenos inyectando 10 mL/kg de peso del
conejo.
Solución de carbonato de sodio al 2.5
%
Disolver el carbonato de sodio libre de pirógenos en agua libre de pirógenos,
esterilizar en autoclave. Verificar la ausencia de pirogenos inyectando 1.0 mL
/Kg de peso del conejo
Solución de hidróxido de sodio 0.05 N. Pesar 2 g de hidróxido de sodio y disolver con agua libre de pirógenos y
llevar al aforo a 1 000 mL.

13. Medida del aumento de la tª rectal en conejos
Pesode los ratones >1.5 kg
Ensayopreliminar :
◦ Administrar 0.9%NaCllibre de pirógenos
◦ Medir cambios en la temperatura del conejo desde los 90 min a3 htras
la administración  <0.6°C
Kabacchi Publicada en Flickr con licencia Creative Commons Genéricade Atribución 4.0. https://www.flickr.com/photos/kabacchi/5305843986
(consultada el 15-04-2015)
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14. Medida del aumento de la tª rectal en conejos
Ensayoprincipal:
◦ 3 conejos
◦ Calentar el producto a38.5-39°C
◦ Inyección IV(0.5-10 mL/kg), lentamente en la vena marginal de laoreja
Medir la temperatura desde 90min hasta 3h trasla
administración, aintervalos menores de 30min.
Material estéril (calor secoa250°C,30min)
Utilizar termómetros de alta precisión (0.1°C)para medir laTª
rectal.
Respuesta:T(inicial) - T(máxima) para cada conejo
sumar las diferencias del total de animalesutilizados
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15. Medida del aumento de la tª rectal en conejos
N conejos Material pasasila sumade las
respuestasnoexcede (°C)
Material NOCUMPLEsila sumade
lasrespuestasexcede(°C)
3 1.15 2.65
6 2.80 4.30
9 4.45 5.95
12 6.60 6.60
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Interpretación de losresultados
Sino secumple el ensayo con 3 conejos, pero los valores entre las columnas 2 y 3
sedebe repetir el test en un grupo adicional de 3 conejos, y asísucesivamente
hasta un total de 4grupos.

16. Bibliografía
Calvo B, Esquisabel A, Hernández R, Igartua M
Tecnologia Farmacéutica: Formas Farmacéuticas. OCW 2015