MEMORIAS TRABAJOS LIBRES Conferencia Científica Anual sobre Síndrome Metabólico 2016 Polimorfismos G-6A en el gen AGT e I/D en el gen ECA y su relación con hipertensión arterial M.C. Jorge Barrera Alcocer1, Dra. Isela Parra Rojas1, Dr. José Francisco Muñoz Valle2, Dra. Alejandra Guadalupe García Zapién3, QBP. Aralia Berenice Salgado Bernabé1, Dra. Ines Matia Garcia1, Dr. Lorenzo Salgado Goytia1 1 Laboratorio de Investigación de Obesidad y Diabetes. U.A.C.Q.B. Universidad Autónoma de Guerrero. Chilpancingo, Gro. 2 Departamento de Biología Molecular y Genómica, C.U.C.S. U. de Guadalajara, Jal. México. 3 Departamento de Farmacología. C.U.C.E.I.U. de Guadalajara, Jal. México.

1. UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE GUERRERO
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICO BIOLÓGICAS
POSGRADO EN CIENCIAS BIOMÉDICAS
LABORATORIO DE INVESTIGACIÓN EN OBESIDAD Y DIABETES
“POLIMORFISMOS G-6A EN EL GEN AGT E I/D EN EL GEN ECA Y SU
RELACIÓN CON HIPERTENSIÓN ARTERIAL”
P R E S E N T A
M. en C. JORGE BARRERA ALCOCER
MÉXICO D.F, AGOSTO DE 2016

2. HIPERTENSIÓN ARTERIAL
Es la enfermedad crónica que se caracteriza por el incremento continuo de
la presión sanguínea en las arterias.
El 30-45% de la población general padece
hipertensión.
HTA en México es de 31.5%, y es más alta
en adultos con obesidad 42.3 %.
En Guerrero es de 13.5%, la cual aumentó en
43.6% respecto a la prevalencia reportada en la
ENSANUT 2006 (9.4%).
Mancia et al., 2013, ENSANUT, 2012; OMS 2012.

3. HIPERTENSIÓN PRIMARIA
El 95% no tienen una etiología definida, denominada hipertensión arterial
esencial, primaria o idiopática.
HIPERTENSIÓN SECUNDARIA
Resultado de muchas enfermedades y afecciones: medicamentos,
problemas cardíacos congénitos, enfermedad renal, estrógenos y
enfermedades del sistema endocrino.
Tortora y Grabowski, 1998

4. SISTEMA RENINA ANGIOTENSINA ALDOSTERONA
Zaman et al., 2002

5. G/A a -6 pb del sitio de inicio de la transcripción.
POLIMORFISMOS G-6A DEL GEN ANGIOTENSINÓGENO (AGT)
Valdezet al., 2007; Markovic et al., 2005.
Región AGCE 1
(angiotensinogen core
promoter element 1)
Factor nuclear
conocido como
AGF1.
Exones

6. POLIMORFISMO I/D DE 287 pb EN EL GEN DE LA ENZIMA
CONVERTIDORA DE ANGIOTENSINA (ECA)
Piroja, 2000; Vasudeban et al., 2008.
El polimorfismo no afecta la estructura de la
proteína; se sugiere que podría ser solo un
marcador ligado a una verdadera variante del
gen responsable.

7. EL OBJETIVO:
Analizar la asociación de los polimorfismos G-6A gen del
Angiotensinógeno (AGT) e I/D del gen de la Enzima Convertidora de
Angiotensina (ECA) con hipertensión arterial.

8. MATERIALES Y MÉTODOS
• Un total de 196 muestras de DNA de pacientes, los cuales firmaron un consentimiento
informado, para los casos la presión arterial fue ≥130/85 mmHg de acuerdo con el NCEP-
ATP III, y los controles una presión arterial de 90-119/60-79 mmHg.
• Se determinaron las frecuencias alélicas y genotípicas, el análisis estadístico se realizó con
Sofware STATA 11.0. Ambos polimorfismos se encuentran en Equilibrio de Hardy-Weinberg.
Se consideró un valor estadísticamente significativo cuando p<0.05. Los Residuos
Peligrosos Biológico Infecciosos según la Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-
2002.

9. PCR-RFLPS DEL SNP G-6A DEL GEN AGT.
Figura 6. Visualización de los productos de PCR,
de izquierda a derecha, “MP” marcador de peso
molecular de 100 pb, carril 1-3 amplificado de 205
pb.
Figura 7. Genotipificación del SNP -6 G/A del gen
AGT. De izquierda a derecha, “MP” marcador de
peso molecular de 100 pb, genotipo G/G (banda de
205 pb), el genotipo A/A (bandas de 149, y 56 pb),
el genotipo G/A (bandas de 205, 149, y 46 pb).
SNP G A
Enzima de restricción BstN I
Temperatura de reacción 60ºC
Tiempo restricción 5 Hrs.
Homocigoto G 205
Heterocitgoto G/A 205 + 149 + 56
Homocigoto A 149 + 56
Iniciadores Secuencia (5´- 3´)
Sentido 5’-CTG GGA ACA GCT CCA TCC CC-3’
Antisentido 5’-TTT TTC AGT CTA CAC CGT GCC T-3’

10. PCR Y GENOTIPIFICACIÓN DEL POLIMORFISMO I/D
DEL GEN ECA.
Iniciadores Secuencia (5´- 3´)
Sentido 5’ –CTGGAGACCACTCCCATCCTTTC- 3’
Antisentido 5’ –GATGTGGCCATCACATTCGTCACGAT- 3’

11. Variable Hipertensos
n=55
Normotensos
n=141
Valor de
p
Edad** 26 (21-45) 22 (20-33) 0.027
Género* <0.001
Masculino 32 (58) 44 (31)
Femenino 23 (42) 97 (69)
Peso (kg)** 92.5 (78.3-105.8) 79.4 (55.9-83) <0.001
Talla (cm)*** 162.1 ±11.4 159.4 ±8.54 0.068
IMC (kg/m2)** 33.6 (31.7-37.7) 30 (21.5-33.1) <0.001
Glucosa (mg/dl)** 95 (86-106) 87 (80-102) 0.014
Tg (mg/dl)** 162 (114-208) 110 (83-155) <0.001
Col. Tot (mg/dl)** 177 (149-208) 155 (143-189) 0.008
Tabla 1. Parámetros clínico-bioquímicos por grupo de estudio.
*Datos proporcionados por n y porcentajes. Prueba de X². **Datos proporcionados en medianas, percentil 25 y 75. Prueba
de Mann-Whitney. *** Datos proporcionados en media ± DE. Prueba de t student. IMC (Índice de Masa Corporal), (Presión
Arterial Diastólica), Tg (Triglicéridos) Col. Tot. (Colesterol Total).
ENSANUT, 2012, Hall et al., 2014.
RESULTADOS

12. Tabla 2. Distribución genotípica y alélica del polimorfismo G-6A del gen AGT.
*Prueba de X²
Hipertensos
n (%)
Normotensos
n (%)
Valor de p
Genotipo
G/G 3 ( 5) 12 ( 8)
G/A 34 (62) 67 (48) 0.19*
A/A 18 (33) 62 (44)
Alelos
G 40 (36) 91 (32) 0.25*
A 70 (64) 191 (68)
En un estudio previo en población caucásica, se reportó una frecuencia del
51% para el alelo A en individuos con hipertensión arterial primaria,
asociándolo con la enfermedad (OR=2.2;IC95% 1.49-3.3) (Sudhir et al.,
2010).

13. Tabla 2. Parámetros clínico-bioquímicos en la población guerrerense
agrupados por genotipo del polimorfismo G-6A del gen AGT.
Variables Genotipos
Valor
p
G/G G/A A/A
Género * 0.40
Masculino 8 (53) 36 (36) 32 (40)
Femenino 7 (47) 65 (64) 48 (60)
Peso (kg)** 70.2 (55.6-90) 78.3 (62.5- 89.4) 72.9 (57.2-94) 0.67
Talla (cm)*** 161.2 ±10.5 159.7.3 ±9.03 160.4 ±9.94 0.80
IMC (kg/m2)** 30.4 (20.8-32.1) 31.7 (23-35) 30.8 (21.9-34.1) 0.29
PAS (mmHg)** 107 (100-114) 114 (106-133) 106 (102.5-117) 0.02
PAD (mmHg)** 69 (66-76) 74 (68-88) 71 (66-77.5) 0.06
Glucosa (mg/dL)** 92 (83-100) 88 (82-103) 89 (80-102) 0.94
Tg (mg/dL)** 123 (83-186) 112 (83-179) 138 (94-189) 0.47
Col. Tot. (mg/dL)** 161 (141-197) 164 (145-201) 165.5 (144-194.5) 0.90
*Datos proporcionados por n y porcentajes. Prueba de X². **Datos proporcionados en medianas y percentil 25 y 75. Prueba Kruskal-
Wallis. *** Datos proporcionados en media ± DE. Prueba de ANOVA. IMC (Índice de Masa Corporal), PAS (Presión Arterial Sistólica),
PAD (Presión Arterial Diastólica), Tg (Triglicéridos) Col. Tot. (Colesterol Total).
Yanahi et al., 1996

14. *Prueba de X²
Lazaraso et al., 2003
Hipertensos
n (%)
Normotensos
n (%)
Valor de
p
OR IC95%
Valor de
p
Genotipos
D/D 17 (31) 71 (50) 1.0
I/D 20 (36) 55 (39) <0.001* 1.5 (0.7-3.1) 0.27
I/I 18 (33) 15 (11) 5.0 (2.1-11.9) <0.001
Alelos
D 54 (49) 197 (70)
<0.001*
1.0
2.4 (1.4-3.8)I 56 (51) 85 (30) <0.001
Tabla 4. Frecuencias genotípicas y alélicas del polimorfismo I/D del
gen ECA.
En otro estudio, realizado en población Saudí reportó que el alelo D se
asocia con hipertensión arterial (OR=4.8;IC95% 1.1–21.2) (Ali et al.,
2012).
Se ha reportado al alelo D como de , estudios de asociación en
población china, taiwanesa y caucásica, contrario a lo obtenido en el
presente trabajo.

15. *Datos proporcionados por n y porcentajes. Prueba de X². **Datos proporcionados en medianas y percentil 25 y 75.
Prueba Kruskal-Wallis. *** Datos proporcionados en media ± DE. Prueba de ANOVA. IMC (Índice de Masa Corporal),
PAS (Presión Arterial Sistólica), PAD (Presión Arterial Diastólica), Tg (Triglicéridos) Col. Tot. (Colesterol Total).
Lemes et al., 2013, Eisenmann et al., 2009
Tabla 5. Relación de los parámetros clínico-bioquímicos agrupados por
genotipo del polimorfismo I/D del gen ECA.
Variables Genotipos
Valor
de p
D/D I/D I/I
Género
 Masculino 34 (39) 28 (37) 14 (42)
0.88
 Femenino 54 (61) 47 (63) 19 (58)
Peso (kg)** 63.4 (55-80.6) 82 (69.4- 95.7) 85.7 (75.8-100.3) <0.001
Talla (cm)*** 160 ±9.80 160 ±8.89 159 ±9.48 0.86
IMC (kg/m2)** 24.1 (21-31.6) 32.5 (30.1-35.3) 33.8 (31.4-36.4) 0.001
PAS (mmHg)** 108 (101-115) 111 (104-130) 131 (106-138) 0.005
PAD (mmHg)** 70 (66-76) 73 (69-85) 86 (66-92) 0.01
Glucosa (mg/dL)** 85 (77-95) 95 (83-111) 96 (87-109) 0.002
Tg (mg/dL)** 108 (78.5-158.5) 136 (95-198) 144 (104-187) 0.037
Col. Tot. (mg/dL)** 160 (143-186) 165 (144-198) 171 (151-206) 0.23

16.  El genotipo G/A del SNP G-6A del gen AGT, se asoció con la Presión
Arterial Sistólica en población del Estado de Guerrero.
 El genotipo homocigoto I/I y el alelo I en el polimorfismo I/D del gen
ECA, se asociaron con HTA, en población del Estado de Guerrero.
CONCLUSIONES

17. • En México y especialmente en el Estado de Guerrero, el proceso de mestizaje
influye en la heterogeneidad genética de la población, en la cual contribuyen
las poblaciones europeas, amerindias y en menor proporción la africana.
• Esto ha complicado que los estudios de asociación, permitan caracterizar y
comprender mejor los factores genéticos subyacentes a las enfermedades
complejas de los mexicanos.
¡GRACIAS POR SU ATENCIÓN!