Este documento describe Tannerella forsythia, una bacteria asociada con la enfermedad periodontal. Detalla su morfología, hábitat, factores de virulencia como proteasas y su papel en la inducción de la pérdida ósea alveolar. También resume los métodos para cultivar la bacteria, realizar diagnósticos, y tratar infecciones y abscesos periodontales. Finalmente, resume un artículo sobre cómo la proteína BspA de T. forsythia induce la pérdida ósea en ratones a través de mecanismos infl

1. Facultad de Odontología
Unidad de Aprendizaje: Microbiología Oral
Tema:
Tannerela Forsythia
Sylvana Chávez

2. NOMBRE DEL
MICROORGANISMO
Bacteria:
Bacteroides forsythus, formalmente
conocida como Tanerella forsythia
GÉNERO
Tanerella
ESPECIE
forsythia
MORFOLOGÍA
Bacilos
TINCIÓN
Gram -

3. MEDIO DE CULTIVO
Agar TF o caldo TF que
contienen tetraciclina al 5
mg/mL
ATMÓSFERA DE CRECIMIENTO
Anaeróbica
HÁBITAT
Cavidad oral,
principalmente cuando se
presenta la enfermedad
periodontal.

4. FACTORES DE VIRULENCIA
Proteasas, lipasas y
colagenasas
Cápsula
Pili
ß-lactamasa
MECANISMOS DE
TRANSMISIÓN
La transmisión endógena se
produce por aspiración,
derramamiento a partir del
intestino o lesión de
superficies mucosas por
traumatismo, cirugía o
quimioterapia.

5. CUADROS CLÍNICOS
Absceso Periodontal:
Colección de pus localizada en el tejido periodontal.
Pude ser Agudo - Crónico.
Absceso Periodontal Agudo:
Dolor, Edema, Enrojecimiento, Tejido Brillante en la encía marginal en encía
insertada, Pérdida de puntilleo del tejido.
Absceso Periodontal Crónico:
Luego del proceso agudo, podría establecerse un dolor pulsante, y podría regresar a
l a fase aguda y alternarse con la fase crónica. Causando daño en los tejidos
periodontales circundantes.

6. MÉTODOS DIAGNÓSTICOS
El dentista o el periodoncista están capacitados para juzgar el color y la forma de las encías, para
determinar la presencia de dientes flojos, y para utilizar instrumentos pequeños que se introducen
cuidadosamente debajo de las encías para conocer la profundidad de las bolsas periodontales. A esta
clase de examen se le llama sondeo periodontal y tiene que formar parte de todo examen dental.
PLAN DE TRATAMIENTO
Disminuir el dolor
Control de la infección
Drenaje de la colección de pus localizada
Se pueden recomendar enjuagues de agua tibia Utilización de antisépticos en solución o en gel
Clorhexidina
PREVENCIÓN
Cepillado dental, acudir al dentista al menos dos veces al año, si se presentan
síntomas, acudir más seguido.

7. Artículo:
Tannerella forsythia-inducida en
pérdida de hueso alveolar en ratones
involucra la proteína de Leucina BspA
repetida
R. Sharma una , *
S. Inagaki un
K. Honma 2
C. Sfintescu un
PJ Baker 3
RT Evans 1
1 Departamento de Biología Oral, Escuela de Medicina Dental de la Universidad Estatal de Nueva
York, 3435 Main Street, Buffalo, NY 14214, EE.UU.;
2 Departamento de Microbiología, Centro de Ciencias de la Salud Oral, Universidad Dental de Tokio, Chiba
261-8502, Japón, y
3 Departamento de Biología, Bates College, Lewiston, ME 04240, EE.UU.;

8. Tannerella forsythia (antes forsythus Bacteroides) es uno de los patógenos
periodontales recientemente implicado en el desarrollo de la enfermedad
periodontal. La superficie celular asociada, así como la proteína
secretada, rica en leucina repetida (BSPA) de esta bacteria se ha sugerido
que juegan un papel en la adhesión bacteriana, y también en la
inflamación, al desencadenar la liberación de citocinas pro-inflamatorias
de los monocitos y quimiocinas de los osteoblastos, lo que lleva a la
reabsorción ósea y la inflamación. En este estudio, hemos tratado de
determinar el potencial patogénico de T. Forsythia y el papel in vivo de la
proteína en la patogénesis BSPA en el modelo de ratón de la infección-la
pérdida de hueso alveolar inducido. Los resultados mostraron la pérdida
de hueso alveolar en los ratones infectados con el T. cepa de tipo
salvaje forsitia, mientras que el mutante BSPA se vio afectada. En
conclusión, la evidencia se presenta en apoyo de T.forsitia como un
organismo importante que participa en la inducción de la pérdida de
hueso alveolar, y la proteína BSPA es un importante factor de virulencia de
esta bacteria.

9. Materiales y métodos
• Las cepas bacterianas y condiciones de cultivo
• La inoculación de ratones
• rBspA Purificación y la Inmunización
• La detección por PCR para evaluar la infección
• Respuesta de anticuerpos
• Respuesta proliferativa de linfocitos
• Las mediciones del hueso alveolar
• SDS-PAGE y Western Blot
• Estadísticas

10. Cepas bacterianas y condiciones de cultivo
• T. forsythia (forsythus B. ATCC 43037) fue cultivada
en caldo o en la TF-TF placas de agar (1,5% de agar
en el caldo de TF) en condiciones anaeróbicas como
se describió previamente UnT. forsitia mutante
(BFM571) defectos en la expresión de la proteína
BSPA se cultivó en placas de agar o caldo que
contiene tetraciclina al 5 mg / mL.

11. Inoculación de ratones
• Los ratones fueron infectados por sonda con 10 9 ufc
/ ml de bacterias vivas (T. forsythiade tipo salvaje
Tf43037, o la cepa mutante BFM571) en 100 L de
PBS con 2% de carboximetilcelulosa (CMC) tres veces
en intervalos de 48 horas. Los ratones de control
(simulado por el VIH) recibieron antibióticos. antes
del tratamiento y la sonda CMC sin las bacterias.

12. rBspA Purificación y la Inmunización
• Los animales fueron inmunizados con la longitud
completa de proteínas recombinantes BSPA
(rBspA), preparado de acuerdo a nuestro
procedimiento descrito anteriormente para
rBsp70, un derivado truncado expresa la rica en
leucina la repetición de dominio de BSPA.

13. La detección por PCR para evaluar la infección
• Muestras de placa subgingival se obtuvieron de los molares
de cada ratón por medio de puntas de papel estéril. En pocas
palabras, puntas de papel se colocaron debajo de la encía
durante 5 segundos y luego fue trasladado en 1
ml T. crecimiento a medio forsitia suplementado con 100 mg /
ml de gentamicina, y agitó durante 10 segundos. Tras una
semana de incubación, el medio se giró a 12.000 x g durante
10 minutos, y el total del ADN genómico se aisló bacterias con
el uso de la genómica Puregene kit de aislamiento del ADN

14. Respuesta de anticuerpos
• Cuarenta y dos días después de la última
infección, los ratones fueron asesinados, y el suero
fue recolectado y almacenado a -70 ° C para la
evaluación de las respuestas de IgG específica. Las
cantidades de IgG o IgA se determinaron por el ratón
IgG o IgA kits de ELISA de cuantificación.

15. Respuesta proliferativa de linfocitos
• El índice de estimulación proliferativa (SI) se calculó
como el nivel medio de la captación de timidina
radiactiva por los cultivos incubados con el
estimulante, menos el nivel medio de la absorción
por la cultura de control respectivo, sin estimulantes,
dividido por la captación de control.

16. Las mediciones del hueso alveolar
• La pérdida de hueso horizontal alrededor de los
molares superiores se evaluó mediante un método
morfométrico. Hervidos, huesos de carne de un día
para otro se sumergieron en agua oxigenada al 3%,
pulsado durante 1 minuto en lejía, y se tiñeron con
azul de metileno al 1%. La distancia desde la unión
cemento-esmalte a la cresta ósea alveolar
(denominado CEJ: ABC) se midió en forma ciega por
al menos dos individuos, utilizando un microscopio
de disección calibrado (x30), en 14 sitios
bucal porratón.

17. SDS-PAGE y Western Blot
• La reactividad específica de IgG e IgA de los ratones
con la proteína rBspA se evaluó mediante
inmunotransferencia como se describió
previamente. La proteína rBspA con electronvoltios a
una membrana de nitrocelulosa se utilizó como
antígeno.

18. Estadísticas
• Las diferencias entre grupos se analizaron
mediante la prueba t deStudent, y las vías de
análisis de varianza con un grupo de
comparaciones múltiples se realizaron con la
prueba de Tukey. Un valor de p menor de 0,05
fue considerado estadísticamente
significativo.

19. Resultados
• Se determinó la respuesta de anticuerpos séricos contra la bacteria
y la proteína BSPA, para confirmar la infección y determinar
si T. forsitiaprovocó una respuesta inmune. Tanto el tipo salvaje
(Grupo B) y el BFM571 BSPA-mutante (Grupo C) las tensiones que
provocan niveles significativos de-toda-la célula anticuerpos
específicos anti-después de la infección oral, en comparación con
los controles infectados-Sham. Sólo la naturaleza de
tipo T. forsitia tensión inducida por anticuerpos anti-BSPA, y, como
se esperaba, los animales infectados con el mutante BSPA no
producen anticuerpos anti-BSPA, lo que confirma que los animales
estaban infectados con éxito con la de tipo salvaje y las cepas
mutantes, respectivamente, y que la respuesta anti-BSPA sólo se
observó en los animales infectados con la cepa de tipo
salvaje.vacunación subcutánea con la proteína de suero rBspA
indujo una fuerte respuesta rBspA IgG anti-.

20. Discusión
• El posible papel en la patogénesis de la BSPA también se confirma a
partir de los resultados que muestra la protección
de T. forsitia inducida por la pérdida de hueso alveolar mediante la
inmunización rBspA, que dio lugar a BSPA específicos en suero e IgA
anticuerpos IgG. Se encontraron porcentajes similares de ratones a
ser positiva para T. forsitia por PCR al ser infectados por tanto la de
tipo salvaje o la cepa mutante, el apoyo a la idea de que la proteína
BSPA no podría ser crucial en la adherencia.Por otra parte, en cada
grupo de ratones, ni los niveles de anticuerpos, ni los niveles de
hueso fueron significativamente diferentes en los ratones
infectados de los que T. forsitia fue detectado por PCR, en
comparación con los ratones infectados de los que no lo
era. Además,T. forsitia fue recuperado de los ratones que fueron
protegidos de la T.forsitia inducida por la pérdida de hueso alveolar
después de la vacunación rBspA.

21. Conclusión
• BSPA podría ser un factor de virulencia importante
especialmente implicados en la inflamación mediante
la activación de la liberación de citoquinas resorción
ósea, la IL-β y TNF-α, y / o la activación de quimiocinas
participan en el reclutamiento de neutrófilos, lo que
lleva a la reabsorción ósea y la inflamación. Además, la
proteína BSPA puede promover a través de su osteólisis
otros (aún por identificar) las funciones de virulencia,
especialmente ya que las proteínas que pertenecen a la
rica en leucina la repetición de la familia tienen
diversas funciones.

22. Referencias
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