IRA

1. Test rápidos para descartar infecciones
respiratorias virales o bacterianas en el I y II
nivel de atención
Dra. Flor de María Charca Rodríguez
Médico Patólogo Clínico - HNHU

2. Declaración de conflicto de intereses
• Nombres y apellidos: Flor de María Charca Rodríguez
• Titulo de la presentación: Test rápidos para descartar infecciones
respiratorias virales o bacterianas en el I y II nivel de atención.
Declaro que no existe ningún conflicto de intereses, que pueda resultar en un sesgo
en esta presentación.

3. Introducción
• Técnicas de diagnóstico rápido TDR resultado en menos de 7 h.
• Algunas TDR, sencillez y rapidez, obtención e interpretación de resultado
POINT OF CARE (Pruebas en el punto de atención).
• Los TDR de muestras NF para patógenos específicos útiles para
terapia dirigida (p. Ej., Infección por estreptococo del grupo A,). En
pacientes inmunodeprimidos, durante ciertos brotes o para
proporcionar una terapia específica a los contactos.
• En general ayudan a:
• Ayudan a disminuir uso de ATB.
• Terapia antivírica adecuada.
• Disminuir estancia hospitalaria.
• Implementación medidas de aislamiento que limiten la transmisión vertical.

4. Metodologías

5. Metodologías
INMUNOCROMATOGRAFIA
Boletín del servicio bibliográfico de Wiener Laboratorios S.A.I.C https://issuu.com/ibio_upibi-ipn/docs/ibio_covid_19_diciembre_2020/s/11536922

6. Metodologías
INMUNOENSAYO FLUORESCENTE (FIA)
• Utiliza la tecnología de la Inmunofluorescencia.
https://www.quidel.com/sites/default/files/product/documents/EF1192503EN00.pdf

7. Metodologías
INMUNOENSAYO FLUORESCENTE (FIA)
• Utiliza la tecnología de la Inmunofluorescencia.
https://www.quidel.com/sites/default/files/product/documents/EF1192503EN00.pdf

8. Metodologías
INMUNOENSAYO FLUORESCENTE (FIA)
https://www.quidel.com/sites/default/files/product/documents/EF1192503EN00.pdf

9. Metodologías
INMUNOENSAYO FLUORESCENTE (FIA)
• Analizador escanea, mide e interpreta las
señales inmunofluorescentes usando
algoritmos internos específicos del
método.
• El Analizador notificará el resultado de la
prueba en su pantalla al usuario (positivo,
negativo o no válido) y se puede imprimir
a través de una impresora incorporada o
trasmitir mediante una conexión LIS.
https://www.quidel.com/sites/default/files/product/documents/EF1192503EN00.pdf

10. Metodologías
INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA (IFD)
• Método basado en la reacción de anticuerpos específicos con el
antígeno de la muestra.
• Los anticuerpos reaccionan con el antígeno y los no unidos se
eliminan con el lavado.
• El complejo Ag-Ac es visualizado gracias a una sustancia fluorescente
conjugada al anticuerpo.

11. Metodologías
• INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA (IFD)
• Muestra: Frotis NF, Lavados BA,
bronquiales, aspirados NF en un Medio
de transporte.
• Centrifugado PBSextensión y fijación
en portaobjetosTinción (FITCMab)
enjuague(PBS)LavadoSecado 
montajeobservación al microscopio de
Fluorescencia.

12. Recomendaciones
• Seguir instrucciones del fabricante de reactivos.
• Condiciones de estabilidad de la muestra (ambiente, temperatura).
• Condiciones de estabilidad de los reactivos (ambiente, temperatura).
• Control de Calidad independiente.
• Usar medidas de bioseguridad.
• Uso de EPP adecuado.

13. TDR en Infecciones
Bacterianas: Faringitis
Estreptocócica

14. Faringitis Estreptocócica
• Infección bacteriana más frecuente
causada por Streptococcus B hemolítico
del grupo A (S. pyogenes)
• 20-30% de faringitis en niños.
• S y S: Dolor de garganta, fiebre, dolores
de cabeza y escalofríos. Otros: dolor
abdominal, náuseas y vómitos.
• Secuelas no supurativas: FR, GN
postestreptococica, …..
https://kidshealth.org/es/parents/strep-throat.html

15. Faringitis Estreptocócica
• Gold estándar cultivo.
• 1ros test 1980: Aglutinación en látex Elisa
Inmunocromatografía (ICT) moleculares.

16. • Obtención de la muestra:
• Frotis faríngeo, con torunda de
dacrón o alginato cálcico.
• Pilares anteriores de las amígdalas
• Fondo de la faringe
• Colocar en un recipiente estéril.
https://www.sgh.com.sg/patient-care/specialties-services/pathology/pages/virology.aspx
Faringitis Estreptocócica

17. INMUNOCROMATOGRAFIA
• Detectan carbohidrato C de la
pared celular del Streptococcus
del grupo A.
• Uso de anticuerpos.
monoclonales, policlonales.
Faringitis Estreptocócica

18. INMUNOCROMATOGRAFIA
• Detectan carbohidrato C de la pared celular del Streptococcus del grupo A.
• Uso de anticuerpos. monoclonales, policlonales.
• Extracción previa del carbohidrato de la pared celular en un medio
ácido capaz de solubilizarlos para poder ser detectados
posteriormente.
• Mejor rendimiento en un paciente previamente seleccionado en
base a parámetros clínicos de infección faringea.
Faringitis Estreptocócica

19. Diagnostic Methods, Clinical Guidelines, and Antibiotic Treatment for Group A Streptococcal Pharyngitis: A Narrative Review.
doi: 10.3389/fcimb.2020.563627

20. TDR en Infecciones
Respiratorias Virales

21. • Síndromes clínicos infecciosos que más afecta a la humanidad.
• Niños, más del 50% de las NAC, hasta el 90% de los casos de bronquiolitis y
aproximadamente el 85% de las exacerbaciones asmáticas se asocian a
infecciones por virus respiratorios (VR).
• Relevancia clínico-epidemiológica: Influenza A y B y Virus Respiratorio Sincitial
VRS, menor medida Adenovirus, Rinovirus, Metaneumovirus, Parainfluenza,
Enterovirus, etc.
• Mayoría autolimitadas.
• Muestras: Aspirado o lavado nasofaríngeo (NF), hisopado NF.
• Técnicas:
• Detección de Antígenos: Inmunofluorescencia, Inmunocromatografía.
• Moleculares: PCR
TDR en Infecciones Respiratorias Virales

22. •
RESOLUCION MINISTERIAL N° 1041-2019/MINSA

23. RESOLUCION MINISTERIAL N° 1041-2019/MINSA

24. rm
RESOLUCION MINISTERIAL Nº 556-2019-MINSA

25. RESOLUCION MINISTERIAL Nº 556-2019-MINSA

26. • INMUNOFLUORESCENCIA:
Su correcta realización ofrece ciertas dificultades:
• Necesidad de citocentrífuga, CBS, microscopio de
Fluorescencia.
• Dependiente de la calidad de la muestra (fijado y
teñido adecuado, cantidad de células respiratorias
suficientes).
• Interpretación depende de la pericia del
observador.
• Tiempo de obtención de resultados: Aprox., 120
minutos.
• Menos utilizada para el diagnóstico inicial.
PR en Infecciones Respiratorias Virales
https://www.vircell.com/soporte-tecnico/galeria-de-imagenes/DFA/

27. INMUNOCROMATOGRAFIA:
• Los más empleados son los que revelan reacción en oro coloidal.
• Fácil realización, rápida ejecución (10 y 20 min.), lectura sencilla,
contribuyen a utilizarla en salas de urgencias.
• Son menos sensibles que la IF.
• La mayoría están diseñados para detectar VSR y/o Gripe A y B.
• Tipo de muestra: Mejores resultados con lavados y NF que con hisopados.
• Toma de muestra: Mejor durante las primeras 24 hrs de evolución de
enfermedad.
• Sensibilidad: Mejor si se usa para detectar VRS que si se utiliza para Gripe.
PR en Infecciones Respiratorias Virales

28. PRUEBAS MOLECULARES
• PCR:
• Son altamente sensibles y específicas y han sustituido al cultivo como método de
referencia.
• Tiempo de respuesta > a 24 h.
• Requieren infraestructuras, equipamientos específicos y personal especializado Limita su uso
para diagnóstico rápido o en situaciones de urgencia.
• Actualmente nuevas técnicas moleculares de rápida ejecución, manipulación mínima de
muestra tras su dispensación y realizan en un mismo equipo la extracción, amplificación
y detección de VR, sin pérdida de eficiencia respecto a los métodos moleculares clásicos.
• Pruebas para virus concreto.
• Multiplex (mas de 20 patógenos a la vez)
• Tiempo: 90 min aprox.
• Costo alto.
PR en Infecciones Respiratorias Virales

29. UTILIDAD DE PRUEBAS RAPIDAS EN INFECCIONES RESPIRATORIAS
VIRALES
• Pacientes de alto riesgo y en los que es importante descartar
cualquier virus implicado. Ej, pacientes oncohematológicos.
• Pacientes que requieran ingreso hospitalario.
• Situación clínica del paciente, inicio precoz del tratamiento
• Implementar medidas de prevención de brotes nosocomiales de gripe, en estos casos
realizar directamente prueba molecular.
• PCR Multiplex, por su alto costo está reservado para pacientes que ingresan a UCI.
PR en Infecciones Respiratorias Virales

30. Test de Detección de Antígenos
en Infecciones por SARS-CoV-2

31. • La COVID-19, causada por el SARS-CoV-2, se ha convertido en una carga en la salud
mundial.
• Pruebas que permitan acelerar las decisiones de gestión clínica y de salud pública que
pueden reducir la transmisión.
• Buen rendimiento.
• Tamizaje poblacional masivo y confirmación temprana de casos.
• Laboratorio
• POCT
Test de Detección de Antígenos para SARS-
CoV-2

32. Test de Detección de Antígenos para SARS-
CoV-2
• Detectan proteinas producto de la replicación del virus en secreciones
respiratorias.
• Componentes estructurales:
• Proteinas de la Nucleocápside
• Subunidades S1, S2 de la proteína Spike (S)
Estructura del SARS-CoV-2. Adaptado de Jin et al.

33. Test de Detección de Antígenos para SARS-
CoV-2
INMUNOCROMATOGRAFIA
• Flujo lateral.
• Bajo costo
• POCT
• Resultados: 15-30 min.
https://issuu.com/ibio_upibi-ipn/docs/ibio_covid_19_diciembre_2020/s/11536922

34. Test de Detección de Antígenos para SARS-
CoV-2
PROCEDIMIENTO:
Respetar las condiciones exigidas por el fabricante.
Personal entrenado.
• Toma de muestra, dentro de los 5-7 días,
de inicio de síntomas.
• Uso de EPP según normativa de salud.
• Medidas de Bioseguridad

35. Test de Detección de Antígenos para SARS-
CoV-2
PROCEDIMIENTO:
• Tiempo de lectura (importante, FP, FN)
• Lectura:
• VALIDO (POSITIVO, NEGATIVO)
• INVALIDO

36. Test de Detección de Antígenos para SARS-
CoV-2
• Sensibilidad >/= 80%
• Especificidad >/= 97%

37. • Buen rendimiento:
• Paciente con carga viral elevada
• Sintomáticos, en los que se tiene certeza de fecha de inicio de´síntomas.
• Exposición previa con contactos con infección por SARS-COV-2

41. Test de Detección de Antígenos para SARS-
CoV-2

42. RECOMENDACIONES
• Lugares en los que no se disponga de NAAT o por su demora, carece de utilidad clínica.
• En brotes de COVID-19 en lugares remotos, centros y comunidades semicerradas en los
que no se tenga acceso inmediato a NAAT.
• Para vigilar las tendencias de la incidencia en comunidades, trabajadores esenciales y el
personal sanitario en brotes o en las regiones con transmisión comunitaria en las que el
VPP y el VPN del resultado de una PDR-Ag sean suficientes para control eficaz de la
infección.
• En casos en los que se necesite confirmar resultados con NAAT, estos deben ser
confirmados dentro de las 48 hrs.
• No se recomienda su uso en lugares de baja prevalencia.

43. Training Resources from Test Manufacturers for COVID-19 Point-of-Care and Rapid Testing
Below are links to trainings developed by manufacturers of COVID-19 testing devices. ADVAITE
•RapCovTM Rapid COVID-19 Test
• Training Videoexternal icon
Cepheid™ Xpert® Xpress SARS-CoV-2
• Test Resourcesexternal icon
Abbott ID NOW™ COVID-19 test
• Training Videosexternal icon
•BinaxNOW™ COVID-19 Ag Card App Set-Up and Trainingexternal icon
Cue™ Health* CueTM COVID-19 Test
• Product Supportexternal icon
Becton, Dickinson and Company (B.D.)
•Veritor™ System for Rapid Detection of SAR-CoV-2
• Training Videosexternal icon
LumiraDx
•LumiraDx SARS-CoV-2 Ag Test
• Training Resourcesexternal icon

44. RESOLUCION MINISTERIAL Nº 834-2021/MINSA

45. Gracias…
Flor de María Charca Rodríguez:
fm_dreams@hotmail.com