El documento describe una práctica de laboratorio sobre intoxicación por cobre en una rata. Se administró cobre a la rata por vía intraperitoneal y se observaron síntomas como vómito y diarrea antes de su muerte. Luego se realizaron disecciones y pruebas de reconocimiento en los medios biológicos para identificar la presencia de cobre, como usar ferrocianuro de potasio para producir un precipitado rojo característico.
1. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
DOCENTE: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
ESTUDIANTE: Ochoa Verzosa Stefanny Ximena
CURSO: Quinto Año PARALELO: “A”
GRUPO N°: 7
FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 17/Agosto/2015
FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes,24/Agosto/2015
CALIFICACIÓN:
PRÁCTICA N° 11
TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
INTOXICACIÓN POR COBRE
TÓXICO:
Administrar 10 mL (mililitros) de Cobre
ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Rata wistar
VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Intraperitoneal
T. DE MUERTE: 10 minutos
SINTOMAS:
Vómito,
Diarrea,
Cefalea,
Nausea,
Somnolencia. COBRE
TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 7:30 am
Hora de muerte: 8:00 am
Hora de disección: 8:10 am
Hora del baño maría: 9:00 am
Finalización del baño maría: 9:30 am
2. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
Final de la práctica: 10:30 am
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:
1. Observar la reacción que presenta el animal de experimentación ante la
Intoxicación por Cobre.
2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en
que actúa el toxico y adquirir la destreza para realizar y reconocer la
positividad de las reacciones de identificación.
MATERIALES:
Mandil
Mascarilla desechable
Guantes desechables
Gorro desechales
Pipeta 10 mL
Tubos de ensayo
Pinza para tubos de ensayo
Fósforos
Bisturí
Varilla de vidrio
Jeringa de 10 mL
Agitador de vidrio
Vaso de precipitación 250 mL
Mechero de Alcohol
Probeta de 50 Ml
Gradillas
Equipo de destilación
Zapatones desechables
Espátula
Panema
Tabla de disección
Equipo de disección
MUESTRAS:
Muestra de medios biológicos
EQUIPOS:
Equipo de destilación
Balanza analítica
SUSTANCIAS:
Agua destilada
Clorato de potasio KClO3
Solución de Cobre
Ferrocianuro de potasio
Amoniaco
Cupron
Yoduro de potasio
Cianuros alcalinos
Hidróxido de amonio
Hidróxido de sodio
Sulfuro de Hidrógeno
Yoduro de potasio
3. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
PROCEDIMIENTO:
1. Inmediatamente al ingreso de los estudiantes al Laboratorio de
Toxicología se debe equipar adecuadamente con mandil largo para
Laboratorio limpio y sin manchas, gorro desechable, mascarillas
desechables, guantes desechables y zapatones. Todo esto se realiza
siguiendo las normas del Laboratorio para evitar posibles
contaminaciones y contribuir con el orden.
2. Desinfectar el área de trabajo para realizar la práctica de Toxicología,
siempre se debe tener limpio el mesón de trabajo y tener listo a
disposición los respectivos materiales que se utilizaran en la práctica
correspondiente en el Laboratorio de Toxicología.
3. Se procede a la administración del tóxico que es el Cobre, la dosis es
diez mililitros al animal en experimentación que es la rata wistar. Se
prepara la solución tóxica de Cobre, con 10 mililitros de la solución
Cobre (CuSO4) con una jeringuilla de 10cc y administrarle a la rata
wistar por vía intraperitoneal. Anotar la hora de administración.
4. Colocar la rata wistar en el panema y observar su sintomatología
tomando en cuenta el tiempo hasta su deceso. Muerto el animal
colocarlo en la tabla de disección se lo amarra con la ayuda de una
piola.
5. Realizar la disección con un bisturí, pero antes se debe afeitar el área.
Colocar las vísceras y líquido visceral en un vaso de precipitación,
triturarlas lo más finamente posible.
6. Agregar las 50 perlas de vidrio y añadir 2 gramos de KClO3 y 25 ml de
Ácido Clorhídrico concentrado. Para disolver el ácido, disolver en 20 ml
de agua.
7. Mezclar bien y llevar a baño maría por 30 minutos. con agitación
regular. A los 5 minutos que se cumpla con el tiempo establecido añadir
2 gramos más de KClO3.
8. Una vez finalizado el baño María, dejar enfriar, filtrar y con el filtrado
realizar las reacciones de reconocimiento. Al finalizar la práctica, se
procede al levantamiento de todos los medios biológicos y materiales de
Laboratorio. Se desinfecta nuevamente el área de trabajo, se desechan
4. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
los materiales y que queden en su lugar y en orden luego desinfectarse
las manos.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS:
El líquido proveniente de la destrucción de la materia orgánica, es tratado con
amoniaco para disminuir la acidez y luego se realizan las reacciones de
identificación que a continuación se detallan.
1. Con el Ferrocianuro de Potasio: En un medio acidificado con ácido
acético, el cobre reacciona dando un precipitado rojo oscuro de
ferrocianuro cúprico, insoluble en ácidos diluidos, soluble en amoniaco
dando color azul.
K4Fe(CN)6 + 2Cu(NO3) Cu2Fe(CN)6 + KNO3
2. Con el Amoniaco: La solución muestra tratada con amoniaco, forma
primero un precipitado verde claro pulverulento que al agregarle un
exceso de reactivo se disuelve fácilmente dando un hermoso colr azul
por formación de un compuesto cupro-amónico.
Cu(NO3)2 + 4NH3 Cu(NH3)4 . (NO3)2
3. Con el Cuprón: En solución alcoholica al 1 % al que se le adiciona
gotas de amoniaco, las sales de cobre reaccionan produciendo un
precipitado verde insoluble en agua, amoniaco diluido, alcohol, ácido
acético, soluble en acidos diluidos y poco solubles en amoniaco
concentrado.
C6H5-C=NOH C6H5-C=N-O
C6H5-CHOH + Cu(NO3)2 C6H5-C-N-O Cu + 2HNO3
4. Con el Yoduro de Potasio: Adicionando a la solución muestra gota a
gota, primeramente se forma un precipitado blando que luego se
transforma a pardo-verdoso o amarillo.
Cu(NO3)2 + IK + I3-
5. Con los cianuros alcalinos: A una pequeña cantidad de muestra se
agregan unos pocos cristales de cianuro de sodio formando un
precipitado verde de cianuro de cobre, a este precipitado le agregamos
exceso de cianuro de sodio y observamos que se disuelve por formación
de un complejo de color verde-café.
(NO3)Cu + 2CNNa (CN)2Cu + NO3- + Na+
(NO3)Cu + 3CNNa [Cu(CN)3]= + 3Na+
5. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
6. Con el Hidróxido de Amonio: A la solución muestra, agregarle
algunas gotas de NH4OH, con lo cual en caso positivo se forma un
precipitado color azul claro de solución NO3(OH)Cu.
Este precipitado es soluble en exceso de reactivo, produciendo solución
color azul intenso que corresponde al complejo [Cu(NH3)4]++.
(NO3)2Cu + NH3 Cu(OH)NO3
(NO3)2Cu +3 NH3 2[Cu(NH3)4+++ NO3H + H2O
7. Con el Hidróxido de Sodio: A 1ml de solución muestra, agregamos
algunas gotas de de NaOH, con lo cual en caso de ser positivo se debe
formar un precipitado color azul pegajoso por formación de Cu(OH)2.
Este precipitado es soluble en ácidos minerales y en álcalis
concentrados.
Cu++ + 2OH Cu(OH)2
8. Con el SH2: A la solución muestra, hacerle pasar una buena corriente
de SH2, con lo cual en caso de ser positivo se forma un precipitado color
negro este precipitado es insoluble en exceso de reactivo, en KOH 6M,
en ácidos minerales diluidos y fríos .
(NO3)2Cu + SH2 SCu+ 2NO3H
9. Con el IK: A una pequeña porción de solución muestra agregarle gota a
gota de solución de IK, con lo cual en caso de ser positivo se forma
inicialmente un precipitado color blanco que luego se transforma en
pardo verdoso o por formaciones de iones tri yoduros, el mismo que se
puede volar con Tio sulfato de sodio.
(NO3)Cu + Tri yoduros
GRÁFICOS:
6. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS CON
LA SOLUCIÓN PROBLEMA:
1. REACCIÓN CON EL FERROCIANURO DE POTASIO:
1. Animal de
experimentación
rata wister
2. Inyectar 10 ml
del tóxico
3. Obseravr los
síntomas de la rata
luego de haber
administrado el tóxico
7. Una vez finalizado el
baño maria dejar enfriar
8. Obtener el filtrado para
realizar las reacciones
correspondientes
5
3
4. Colocar la rata en
la tabla de disección
5. Extraer y triturar
las víceras, colocar 50
perlas de vidrio
6. Llevar a baño
maria por 30 minutos
con agitación regular
21
6
7 8
4
7. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIÓN POSITIVA
En un medio acidificado con ácido acético, el cobre reacciona dando un
precipitado rojo oscuro de ferrocianuro cúprico, insoluble en ácidos diluidos,
soluble en amoniaco dando color azul.
REACCIÓN DE PRECIPITACIÓN:
K4Fe(CN)6 + 2Cu(NO3) Cu2Fe(CN)6 + KNO3
RESULTADO:
Positivo Característico
2. REACCIÓN CON AMONIACO:
REACCIÓN POSITIVA
La solución muestra tratada con amoniaco, forma primero un precipitado
verde claro pulverulento que al agregarle un exceso de reactivo se disuelve
fácilmente dando un hermoso colr azul por formación de un compuesto
cupro-amónico.
REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Cu(NO3)2 + 4NH3 Cu(NH3)4 . (NO3)2
RESULTADO:
Negativo
3. REACCIÓN CON CUPRÓN:
REACCIÓN POSITIVA
En solución alcoholica al 1 % al que se le adiciona gotas de amoniaco, las
sales de cobre reaccionan produciendo un precipitado verde insoluble en
agua, amoniaco diluido, alcohol, ácido acético, soluble en acidos diluidos y
poco solubles en amoniaco concentrado.
ANTES:
Reacción de Coloración
DESPÚES RESULTADO:
Positivo característico
ANTES
Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO:
Negativo
8. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
REACCIÓN DE COLORACIÓN:
C6H5-C=NOH C6H5-C=N-O
C6H5-CHOH + Cu(NO3)2 C6H5-C-N-O Cu + 2HNO3
RESULTADO:
Negativo
4. REACCIÓN CON YODURO DE POTASIO:
REACCIÓN POSITIVA
Adicionando a la solución muestra gota a gota, primeramente se forma un
precipitado blando que luego se transforma a pardo-verdoso o amarillo.
REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Cu(NO3)2 + IK + I3-
RESULTADO:
Positivo No Característico
5. REACCIÓN CON CIANUROS ALCALINOS:
REACCIÓN POSITIVA
A una pequeña cantidad de muestra se agregan unos pocos cristales de
cianuro de sodio formando un precipitado verde de cianuro de cobre, al este
precipitado le agregamos exceso de cianuro de sodio y observamos que se
disuelve por formación de un complejo de color verde-café.
REACCIÓN DE COLORACIÓN:
(NO3)Cu + 2CNNa (CN)2Cu + NO3- + Na+
ANTES
Reacción de coloración:
DESPÚES ESULTADO:
Negativo
ANTES
Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO:
Positivo Característico
9. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
(NO3)Cu + 3CNNa [Cu(CN)3]= + 3Na+
RESULTADO:
Positivo Característico
(Precipitado verdoso)
6. REACCIÓN CON HIDRÓXIDO DE AMONIO:
REACCIÓN POSITIVA
A la solución muestra, agregarle algunas gotas de NH4OH, con lo cual en
caso positivo se forma un precipitado color azul claro de solución
NO3(OH)Cu. Este precipitado es soluble en exceso de reactivo, produciendo
solución color azul intenso que corresponde al complejo [Cu(NH3)4]++.
REACCIÓN DE COLORACIÓN:
(NO3)2Cu + NH3 Cu(OH)NO3
(NO3)2Cu +3 NH3 2[Cu(NH3)4+++ NO3H + H2O
RESULTADO:
Positivo Característico
(Precipitado azul claro)
7. REACCIÓN CON HIDRÓXIDO DE SODIO:
REACCIÓN POSITIVA
A 1ml de solución muestra, agregamos algunas gotas de de NaOH, en
caso de ser positivo se debe formar un precipitado color azul pegajoso por
ANTES
Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO:
Positivo Característico
(Precipitado verdoso)
ANTES
Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO:
Positivo Característico
(Precipitado azul claro)
10. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
formación de Cu(OH)2. Este precipitado es soluble en ácidos minerales
y en álcalis concentrados.
REACCIÓN DE COLORACIÓN:
Cu++ + 2OH Cu(OH)2
RESULTADO:
Positivo Característico
8. REACCIÓN CON SULFURO DE HIDRÓGENO:
REACCIÓN POSITIVA
A la solución muestra, hacerle pasar una buena corriente de SH2 en
caso de ser positivo se forma un precipitado color negro este precipitado es
insoluble en exceso de reactivo, en KOH 6M, en ácidos minerales diluido s
y fríos.
REACCIÓN DE COLORACIÓN:
(NO3)2Cu + SH2 SCu+ 2NO3H
RESULTADO:
Negativo
9. REACCIÓN CON YODURO DE POTASIO:
REACCIÓN POSITIVA
A una pequeña porción de solución muestra agregarle gota a gota de
solución de IK, con lo cual en caso de ser positivo se forma inicialmente
un precipitado color blanco que luego se transforma en pardo verdoso o
ANTES
Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO:
Positivo Característico
ANTES
Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO:
Negativo
11. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
por formaciones de iones tri yoduros, el mismo que se puede volar con
Tio sulfato de sodio.
REACCIÓN DE COLORACIÓN:
(NO3)Cu + Tri yoduros
RESULTADO:
Positivo No Característico
OBSERVACIONES:
A la solución madre de medios biológicos se le adiciona dos gramos
de KClO3 para identificar cobre.
Al realizar la disección de la rata wistar, se pudo observar que el
cobre provoco daños en órganos.
La mayoría de las reacciones de reconocimiento dieron como
resultado positivo, comprobando la presencia de este toxico en los
órganos afectados.
RECOMENDACIONES:
Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el
laboratorio para evitar accidentes.
Toda sustancia a manipular en la práctica se las debe de realizar
bajo la campana extractora de gases.
Culminada la práctica se debe dejar el área de trabajo
desinfectada, para evitar contaminación con las sustancias
químicas utilizadas.
CONCLUSIONES:
En esta práctica se pudo observar la intoxicación con cobre a dosis
de diez mililitros es letal en el cual ocasionó la muerte de la rata
wistar, con un tiempo de muerte de diez minutos debido a su
toxicidad que tiene este compuesto que es el cobre se producen así
diferentes manifestaciones o síntomas como vómito, diarrea,
ANTES
Reacción de coloración:
DESPÚES RESULTADO:
Positivo No Característico
12. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
cefalea y mediante las pruebas de reconocimiento se pudo
comprobar la presencia de cobre en los órganos afectados del
animal.
CUESTIONARIO:
1. ¿CUÁLES SON LOS PRINCIPALES ENFERMEDADES POR LA
INTOXICACIÓN POR COBRE?
La anemia hemolítica, la enfermedad de Wilson se debe por la
acumulación progresiva de cobre en hematíes, riñón, hígado y cerebro de
carácter hereditario autosómico recesivo por lo que se produce en
hermanos de ambos sexos pero no recibe directamente de los padres ni
se cede a los hijos.
2. ¿DÓNDE PODEMOS ENCONTRAR EL COBRE COMO COMPUESTO
TÓXICO PARA LA SALUD HUMANA?
El cobre el agua potable causa trastornos en la salud humana, la
aparición de los síntomas es cuestión de minutos a horas (diarrea: uno a
dos días) después de la ingestión de agua de cobre
3. ¿NOMBRE CIETOS TRATAMIENTOS BIOLÓGICOS CONTRA LA
INTOXICACIÓN POR COBRE EN SERES HUMANOS?
Tratamiento Biológico: la prescripción mediante fitoterápicos debe ser
inmediata como el B-4. BD-15 para restrablecer el hígado. Una dieta rica
en vitaminas y un tratamiento único como la D-PENICILINA, fijadora del
cobre al suero y por tanto eliminación de su circulación.
GLOSARIO
Autosómico dominante: El término autosómico dominante describe a
uno de los patrones de herencia clásicos o mendelianos y se caracteriza
por presentar el fenómeno de dominancia genética para un determinado
alelo de un gen cuyo locus se encuentra ubicado en alguno de los
autosomas o cromosomas no determinantes del sexo.
Caracteres hereditario: Característica morfológica, estructural o
fisiológica presente en un ser vivo y transmisible a la descendencia.
ANEXOS:
13. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
BIBLIOGRAFÍA
Fundación Europea de Medicinas Alternativas. Enfermedad de Wilson
por la toxicidad del cobre. En línea {www.femalt.com}
AUTORIA
Ochoa Verzosa Stefanny Ximena
BQF. García González Carlos
FIRMA DE RESPONSABILIDAD:
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FECHA DE ENTREGA:
Lunes 24 de Agosto del 2015