1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
“Calidad Pertinencia y Calidez”
D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969
PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
PRÁCTICA N° 1
Estudiante: María Belén Ayala González
Docente: Dr. Carlos García
Carrera: Bioquímica Y Farmacia
Fecha de realización de la práctica: lunes 29 de mayo del 2017
Curso: 8vo Semestre
Paralelo: “A”
Título de la Práctica: Intoxicación por metanol.
Animal de Experimentación: Pollo (vísceras).
Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.
Volumen administrado: 10ml de metanol.
TIEMPOS:
Inicio de la práctica 08:30 am
Hora de disección 08:38 am
Hora Inicio de Destilado 08:52 am
Hora de finalización de Destilado 09:00 am
Hora finalización de la práctica 11:29 am
1. OBJETIVOS:
Observar la sintomatología que presenta el pollo tras la intoxicación producida
por metanol.
Determinar mediante reacciones de reconocimiento la presencia de metanol en el
destilado de las vísceras del pollo.
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2. 2. FUNDAMENTO TEÓRICO:
El metanol (CH3OH) es un compuesto químico, conocido como alcohol de madera o alcohol
metílico. El metanol (a temperatura ambiente) es un líquido incoloro, volátil, tóxico e
inflamable. Su olor suave a alcohol puede ser percibido a un umbral de concentración de 6,54
a 131 mg/m3. Se utiliza como intermediario en la fabricación de una infinidad de artículos,
entre ellos, resinas adhesivas para maderas terciadas y materiales de construcción similares,
fibras y empaques de poliéster, plásticos, pinturas, revestimientos, combustibles y aditivos
para combustibles.
3. INSTRUCCIONES:
Trabajar con orden, limpieza y sin prisa.
Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios
innecesarios para el trabajo que se esté realizando.
Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla,
gorro, zapatones.
Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario.
4. MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS Y SUSTANCIAS:
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MUESTRAS
Vasos de
precipitación
Pipetas
Erlenmeyer
Tubos de ensayo
Probeta
Perlas de vidrio
Agitador
Embudo
Guantes
Mascarilla
Gorro
Mandil
Cronómetro
Estuche de
disección
Agitador
Fosforo
Pinzas
Cocineta
Espátula
Gradilla
Aparato de
destilación
Balanza
Baño maría
Campana de
extracción
Cloruro de
fenilhidracina
Nitroprusiato
sódico
Hidróxido de
sodio
HCl
Cloruro de fenil
hidracina
Sulfato férrico
Ácido sulfúrico
Leche
Cloruro férrico
Sulfato ferroso
Ácido sulfúrico
Ácido
clorhídrico
Formol
Destilado de
vísceras del
animal de
experimentaci
ón.
3. 5. ACTIVIDADES A REALIZAR:
5.1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse
5.2. Preparar una solución de formaldehido al 4%.
5.3. Agarrar al animal de experimentación (pollo) por sus patas y mediante una aguja
hipodérmica administrar 8ml de solución de formaldehido.
5.4. Colocar al animal de experimentación (pollo) en la panema y observar los efectos
de la intoxicación.
5.5. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el al animal de
experimentación (pollo) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas
posibles en un vaso de precipitación.
5.6. Verter las vísceras en un vaso de precipitación y agregar 50 ml ácido tartárico al
4% y perlas de vidrio.
5.7. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N.
5.8. Con aproximadamente 15 ml del destilado recogido (muestra) realizar las
reacciones de reconocimientos en medios biológicos.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN:
6.1. Reacción de Schiff:
A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al
1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar
por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta
que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora
totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro.
Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual
se produce un intenso color violeta en caso de positivo.
6.2 Reacción de Rimini
A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas
de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de
hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.
6.3 Con la Fenilhidracina
En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad
de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución
4. de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12%
se obtienen una coloración rojo grosella.
6.4 Reacción de Marquis
Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita
luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de
ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un
color violeta.
6.5 Con el Ácido Cromotrópico
Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el
formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.
6.6 Reacción de Hehner
Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con
ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5
gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de
contacto se produce un color violeta o azul violeta.
7. GRÁFICOS:
5. 8. RESULTADOS OBTENIDOS.
Reacción de Schiff
Positivo característico
Reacción de Rimini
Positivo no característico
Con la Fenilhidracina
Positivo característico
Reacción de Marquis
Positivo característico
Con el Ácido Cromotrópico
Positivo característico
Reacción de Hehner
Positivo no característico
6. 9. CONCLUSIÓN
Mediante esta práctica pudimos observar como las vísceras de pollo fueron contaminadas
con metanol, a su vez se le realizaron un destilado en el cual se obtuvo muestras para realizar
las diferentes reacciones de identificación en donde se pudo determinar que todos los análisis
realizados dieron positivo (cambio de coloración) pero en unos casos este no se mostraba
como lo dice la literatura ya que en unos se notaba precipitados no característicos de la
reacción.
RECOMENDACIONES
Usar siempre el equipo de protección como guantes y mascarillas ya que se trabaja
con ácidos concentrados y con esto evitamos cualquier riesgo de quemado.
Tener siempre en cuenta las normas de bioseguridad en caso de ser necesarias durante
algún accidente.
Usar la cámara de gases para evitar intoxicaciones.
Dejar los reactivos en orden y los materiales usados limpios
10.CUESTIONARIO
1. ¿Qué es el metanol?
Es el principal componente del destilado en seco de la madera. Es uno de los disolventes más
universales y encuentra aplicación,tanto en el campo industrial comoen diversos productosde
uso doméstico (EcuRed, 2011)
2. Escriba los usos del metanol
Se utiliza en:
pinturas
barnices
disolventes
fabricación de plásticos
material fotográfico
anticongelante
aditivo de la gasolina
productos de limpieza del hogar
desnaturalizador del alcohol etílico
(Anales de Medicina Interna, 2002)
7. 3. Diga cuantos estadios progresivos hay durante una intoxicación por metanol y
describa cada uno de ellos.
Son 3 estadios
El primer estadio se presenta con una mínima disminución de la actividad del
sistema nervioso central, debilidad, sensación vertiginosa y náuseas.
El Segundo estadio aparece después de un periodo de latencia asintomático,que
coincide con el desarrollo de una acidosis metabólica que se caracteriza por vómitos,
dolor abdominal, desorientación y alteraciones visuales con fotofobia, visión borrosa,
midriasis bilateral arreactiva a la luz y ceguera ocasional.
El tercer estadio aparece en relación directa con el grado de acidosis metabólica
alcanzada, se produce lesión neuronal, con necrosis retiniana y de los ganglios basales
del encéfalo (Anales de Medicina Interna, 2002)
4. Identifique las vías de más frecuentes por las que se puede dar la intoxicación
por metanol.
Vía digestiva, en el caso de bebidas alcohólicas adulteradas con alcohol
desnaturalizado
Vía respiratoria, como bronquitis crónicas, frecuentemente con componentes
asmatiformes, y alteraciones en la mucosa de las vías respiratorias altas. Esta vía de
absorción es propia de los lugares de trabajo
Vía dérmica (por la piel), difícilmente pueda dar .lugar a intoxicaciones agudas.
(EcuRed, 2011)
8. 11. ANEXO
12. BIBLIOGRAFÍA
Anales de Medicina Interna. (2002).CARTAS AL DIRECTOR:Intoxicaciónpor metanol. Scielo,2.
Recuperado el 3 de Junio de 2017, de
http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0212-71992002000900020
EcuRed. (24 de Junio de 2011). Metanol. Recuperado el 3 de Junio de 2017, de
https://www.ecured.cu/Metanol
13. FIRMA DE RESPONSABILIDAD
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María Belén Ayala González
C.I. 0704558535