El documento describe los resultados preliminares de un estudio sobre el estrés oxidativo y la función vascular durante el envejecimiento en la aorta de rata. Los hallazgos incluyen: 1) Un aumento del estrés oxidativo con la edad; 2) Cambios en la biodisponibilidad de óxido nítrico asociados con la edad; 3) Diferencias en la reactividad vascular entre las aortas torácica y abdominal con la edad. Los resultados sugieren que el envejecimiento vascular involucra mecanismos de control locales del estrés oxidativo y cambios en

1. Asociación entre envejecimiento
vascular endotelial y
estrés oxidativo
en la aorta de rata
Dra. Leticia Manuel Apolinar
Dr. Antonio Ruiz Rivera
Dra. Carmen Castillo Hernández
Dra. Teresa Pérez Capistran

2. Estrés
oxidativo
Rigidez
Arterial
O2-
ONOO-
Obesidad
Diabetes
Estilo de vida
Dieta
Disfunción
endotelial
Remodelado Inflamación
Tono
Eventos
Cardiovasculares
Adversos

3. Inhibidores de la ECAAntagonistas AT1
ANGII
Rigidez
Arterial
Estrés
oxidativo

4. Desacople
eNOS
ONOO-/ BH4
PI3K/Akt
eNOS
Foxo
Glut4
ON / O2-
IRS
PPARs/gamma
(Imayama et al. 2006; Xu and Liu et al.,2013; Paar et al., 2014;Wang et al.,2015)
BH2
AT1 RNAm
ECA RNAm
TNF-α
EnNac
Telmisartán

5. ¿Durante el envejecimiento vascular la restricción calórica o el
uso de telmisartan (antagonista AT1) regularan ascendentemente
la expresión del PPAR-gamma? ¿Esto se asociará con un aumento
de la biodisponibilidad de ON a través de la vía de la PI3K/Akt y
una disminución de la generación del estrés lesivo en las células
del endotelio de la aorta de rata?
¿La generación de estrés oxidativo se incrementa con la edad y se
relaciona con la disminución de la biodisponibilidad de ON en la aorta de
rata ?
¿El estrés oxidativo se asocian con cambios de la relajación dependiente
de endotelio y las respuestas a agonistas contráctiles en la aorta de rata?

6. Determinación basal del
Balance estrés oxidativo en función
de la edad:
-ON,
-SOD y
-Catalasa
en aortas torácica y abdominal
Por técnica colorimétrica
Ratas SD de 3,6 y 12 meses de edadMétodos

7. Resultados Preliminares
Estrés oxidativo

8. 0
10
20
30
3mo old
6mo old
12mo old
* **
NO,nmol/mg
0
5
10
15
20
25
* *
SOD,U/mg
0
100
200
300
400 *
**
CAT,U/mg
Aorta Torácica
Aorta Abdominal
0
5
10
15
20
25 3mo old
6mo old
12mo old
*
**
NO,nmol/mg
0
5
10
15
*
SOD,U/mg
0
100
200
300
*
*
CAT,U/mg

9. • El aumento del estrés oxidativo esta asociado con la edad.
• La disminución de la biodisponibilidad del ON, puede ser
parcialmente atribuido a : la disminución de la actividad basal
enzimática de la eNOS y/o al incremento en la ruptura/degradación
del ON.
• El balance del estrés oxidativo en la aorta de rata depende de
mecanismos de control local.
• A nivel torácico la disminución de la biodisponibilidad de ON se
asocia con un incremento de la actividad enzimática de la SOD y la
catalasa que mantiene el balance del estrés oxidativo bajo control.
• A nivel abdominal, la disminución de la actividad de la catalasa
somete a los elementos de la pared arterial, principalmente a las
células del endotelio a los efectos lesivos de las ROS a una edad
más temprana en comparación al segmento torácico.

10. Resultados Preliminares
In vitro

11. Experimentos in vitro de anillos aórticos torácicos y abdominales de 3,6 y
12 meses de edad con endotelio intacto para caracterizar:
-Porcentaje funcional de endotelio
-Relajación dependiente de endotelio
-Contracción a Fen y AngII
Métodos
Diseño experimental
K+
40 mmol/L
Ach
1x10-4
Ach
1x10-7 a 1x10-4
Fen
1 x10-7 a 1x10-4
1 hora1 hora
AngII
1x10-8 a 1x10-4
K+
1 hora

12. 0
20
40
60
80
100
3mo old
6mo old
12mo old
%Endotelio
-10 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3
0
20
40
60
80
100
3mo old
6mo old
12mo old
Log [Ach]
%contracción
*
Aorta Torácica
“ Durante el envejecimiento vascular , se presenta un aumento de la
relajación dependiente de endotelio inducida por Ach”
-11 -10 -9 -8 -7 -6 -5
0
20
40
60
80
100
3mo old
6mo old
12mo old
Log [AngII]
%contracción
-10 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3
0
20
40
60
80
100
3mo old
6mo old
12mo old
Log [Phe]
%contraction

13. 0
20
40
60
80
100
3mo old
6mo old
12mo old* **
%Endotelio Aorta Abdominal
-10 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3
0
20
40
60
80
100
3mo old
6mo old
12 mo old
*
**
Log [Ach]
%contracción
“ El envejecimiento vascular se relaciono con una disminución del endotelio funcional ,
una reducción de la relajación a Ach y una depresión de la respuesta a Fen a los 6 meses .Mientras
que, a los 12 meses aumento la relajación a Ach, la restauración a Fen y un
incremento a AngII ”
-11 -10 -9 -8 -7 -6
0
20
40
60
80
100
*
*
*
*
* 3mo old
6mo old
12mo old
Log [AngII]
%contracción
-10 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3
0
20
40
60
80
100
3mo old
6mo old
12mo old
Log [Phe]
%contraction
*

14. Resultados preliminares
• El envejecimiento vascular en la aorta torácica y abdominal de rata esta
asociado a la generación de estrés oxidativo y a la disminución de la
biodisponibilidad del ON, lo cual desencadena aparentemente, mecanismos
de control local que intentan mantener en balance la reactividad vascular.
• Aparentemente las pruebas de función vascular apuntan que la liberación
basal de ON se permanece intacta (PI3K/Akt/SONe) a nivel torácico, ya que las
respuestas a agonistas contráctiles se mantienen sin cambios a este nivel .Sin
embargo, su metabolismo esta incrementado.
• Un aumento de la relajación dependiente de endotelio (vía Ca2+/CAM/SONe).
• A nivel aórtico abdominal , el envejecimiento se asocio con un marcado estrés
lesivo a nivel de las células del endotelio que disminuyo la funcionalidad
tempranamente, lo cual se asocio con: una disminución de la relajación
dependiente de endotelio y una depresión de la respuesta contráctil a Fen
pero no a AngII.
• Posteriormente, la disminución del la biodisponibilidad de ON se contrarresto
con un incremento de la sensibilidad de la eNOS a través de una vía
dependiente de calcio en asociación con el incremento de la respuesta
contráctil a AngII y Fen.

15. ¿Los cambios observados en la reactividad vascular están
asociados a la alteración de la vía PI3K/Akt/SONe?
¿Son contrarrestados por vías alternas de producción de ON
dependientes del ion calcio?
¿La depresión de la respuesta contráctil a Fen , pero no a AngII
es modulada por las ROS tempranamente a nivel abdominal?
¿Son el resultado de la activación del SRA y la disminución del
PPAR-gamma?