Una carga viral indetectable significa que la cantidad de virus VIH en la sangre de una persona es tan baja que no puede ser detectada por las pruebas de laboratorio estándar. Algunos puntos clave sobre una carga viral indetectable: - Se logra mediante el uso exitoso de medicamentos antirretrovirales (TARGA) que controlan muy bien la replicación del VIH. - No significa que la persona esté curada del VIH, sino que el virus está bajo muy buen control gracias a la adherencia al tratamiento. - Implica que la persona no trans

1. RETROVIRUS

2. FAMILIA SUBFAMILIA GENERO EJEMPLOS
Retroviridae Orthoretrovirinae Alpharetrovirus Virus del sarcoma y leucemia de aves (AVL)*
Betaretrovirus Virus de tumor mamario de ratón (MMTV)*
Gammaretrovirus Virus relacionado con leucemia de ratón (Mo-MLV)*
Deltaretrovirus Virus linfotrópico humano de células T (HTLV-1, HTLV-2)*
Virus linfotrópico bovino ( BLV)*
Lentivirus Virus de la inmunodeficiencia humana (HIV-1, HIV-2)*
Virus de la inmunodeficiencia Simia (SIV)*
Epsilonretrovirus Wally dermal sarcoma virus
Spumaretrovirinae Spumavirus Espumavirus Humano (HFV)*

3. ESTRUCTURA DE LOS RETROVIRUS
Sigla Proteina Función
MA Matriz Proteina de la matriz (gen gag)
CA Capside Proteinas de la capside (gen gag); protege al core.
NC Nucleocapside Proteina de la capside (gen gag); protege al genoma, forma parte del core.
PR Proteasa Esencial para el clivaje de la proteina Gag durante la maduración
RT Transcriptasa Reversa Retrotranscripción del RNA genómico, también tiene actividad RNAsaH
IN Integrasa Codificada por el gen pol, es necesaria para la integración del provirus
SU Glicoproteínas de
superficie
Proteínas externas de la envoltura; Antigeno viral muy importante. Interviene en la union al
receptor.
TM
Proteina
transmembrana
Glicoproteinas internas de la envoltura madura
•Virus esférico envuelto
•Diametro: 90 – 130 nm
•Pequeñas proyecciones en su superficie
•Nucleocapside esférica o en cono
truncado
•2% de ácido nucleico.(2 ARN (+) y 1
ARNt (trp, pro,lys). Su tamaño varía entre
8 a 11 kb.

4. Virusde Inmunodeficienc
ia
Humano
•
•
•
•
Retrovirus
Humano
Material genético:
RNA
nucleocápsid
e
envoltura
gp120,
gp41

5. Hitos enla
historia
del
VIH/SIDA
•
•
•
•
•
1931: probable primer caso: primate a
humano
1981: descubrimiento de la enfermedad:
SIDA
1983: descubrimiento del virus de
inmunodeficiencia
Luc Montagnier & Robert Gallo
humana:VI
H
1985: test diagnóstico
factores de riesgo: sangre, sexo
(HSV-2)
1986: primer tratamiento disponible:
AZT

6. 1981:
primeros
casos:
USA

7. 1

8. ORIGEN DEL VIH
SALTO INTER- ESPECIE DESDE PRIMATES NO HUMANOS
HIV-2
sooty mangabeys
reservorio SIV sm
Pan troglodytes troglodytes
reservorio del SIV cpz HIV-1

9. ¿Cómo saltó el virus simio (SIV)
a los humanos?
• Se cree que el virus simio se propagó de los chimpancés
a los humanos, mediante la matanza de los animales y el
consumo de su carne.
• Mascotas de primates no humanas.

10. TIPO GRUPO SUBTIPO RECOMBINANTES
M (mayor) A,B,C,D,”E”,F
G,H,”I”,J,K,L
HIV-1 O (outlier)
N (no M, no O)
HIV-2 A,B,C,D,E,F
Diversidad Genética del VIH
A/E, B/F, A/G
A/G/H/K/U
2
HIV 1

12. 3

13. SIDA: EVOLUCION EPIDEMICA

14. SIDA: EVOLUCION EPIDEMICA

18. EL VIH/SIDA EN EL
PERÚ
OGE, Boletín Epidemiológico Mensual, marzo 2009

19. Vías de transmisión del VIH 4

20. HistoriaNaturalde laInfecció
n
VIH
Infecció
n
Transmisió
n
Asintomátic
o
SID
A
Muerte
Agud
a
2-4
sem
1-3 se
m
8 año
s
1.3
años

21. Curso de la infección por VIH

26. TARGA:
beneficios
•
•
•
•
•
Control efectivo de la replicación viral del VIH.
Reconstitución del sistema immune
Disminució
n
dela progresión a SIDA
Disminució
n
de infecciones oportunistas
Disminució
n
de la tasa de mortalidad

27. Efecto
s
de laterapia
ARV

28. Estad
o
del sistema
inmune
enVIH
•
•
•
•
HIV infecta y disminuye el número de células
CD4+
Respuesta inmune a la infección por VIH es
primordialmente
células T citotóxicas (CD8+)
en base
a
Activación permanente del sistema inmunológico (CD4 y
CD8)
Marcadores de inflamación son predictores de progresión a
SIDA

29. 5

32. AZT: primer ensay
o
clínic
o
•
•
•
•
•
AZT primera droga aprobada
por
FDA
Análogo
nucleósidos
Mostró una respuesta
inicial
favorable
Sin embargo, la respuesta no
fue
sostenible
Útil en prevenir
transmisión
vertical

33. AZT: primer ensay
o
clínic
o
•
•
•
•
•
AZT primera droga aprobada por
FDA
Análogo nucleósidos
Mostró una respuesta inicial
favorable
Sin embargo, la respuesta no fue
sostenible
Útil en prevenir transmisión
vertical

34. AZT: primer ensay
o
clínic
o
•
•
•
•
•
AZT primera droga aprobada por
FDA
Análogo nucleósidos
Mostró una respuesta inicial
favorable
Sin embargo, la respuesta no fue
sostenible
Útil en prevenir transmisión
vertical

35. Nuevasdrogas
:
HAART
•
•
•
•
•
•
Nuevos análogos de nucleósidos
T
erapia dual:AZT+3TC
Inhibidores de proteasa (Indinavir)
terapia múltiple: tres drogas: HAART
Análogos no nucleósidos (Nevirapina)
T
erapia combinada produjo un cambio
importante
en disminuir la mortalidad por VIH
Problemas: tolerancia, toxicidad, número de
pastillas
1996-2007: mejoramiento de la tolerancia

36. HAART:
disminución
de mortalida
d
•
•
•
•
HAART cambio la historia del
VIH/SIDA
Recuperation del sistema inmunológico
Aumento de la sobrevida
Sin embargo:
•
•
•
•
toxicidad
resistencia al tratamiento
no cura la enfermedad
acceso a antiretrovirales:Africa,
Asia,
Latinoamérica

37. 6

39. 7

40. Estudio de respuesta inmune humoral: IgM, IgA, IgG
Los test serológicos se basan en la interacción Antígeno – Anticuerpo.
•Test de Tamizaje
•Son altamente sensibles para poder detectar los Ac en la muestra.
•Detectan anticuerpos para HIV-1 y HIV-2 (sin lograr discriminar)
•Detectan anticuerpos contra grupo M y O
•Antígenos: Lisado total de virus, Proteinas recombinantes, Peptidos
sintéticos
•Test Confirmatorios
•Son altamente específicos para confirmar con certeza la presencia de Ac.
Específicos contra HIV.
•Pueden discriminar infección por HIV-1 o por HIV-2

41. TEST RAPIDOS

42. TEST CONFIRMATORIOS
Western Blot
LIA
Criterios:
WB Positivo: p24,gp41,gp120/160
(p24 con al menos otra)
WB Negativo: Ausencia total de
Bandas
WB mejorado
ID
muestra
3.+
1+
+/-
gp120
gp 41
p31
p24
P17
gp105
gp36

43. Algoritmo para el diagnóstico serológico de la
infección por VIH
Técnicas de Tamizaje
No Reactivo
informar
Reactivo
Laboratorio Periférico
Banco de Sangre
Laboratorio de Referencia
2 Técnicas de Tamizaje
Distinta Configuración antigénica
No Reactivo
(-/-)
informar
Reactivo
(+/+)
Discordante
(+/-)
WESTERN BLOT
Positivo * Indeterminado Negativo
INFORMAR
Repetir serología
en 30 días
8

45. TAXONOMIA
• Família Retroviridae
• Sub-família Oncovirinae
• 1980 – HTLV-1
• 1982 – HTLV-2
• 2005 – HTLV-3
• 2005 – HTLV-4

46. • HTLV: primeiro retrovírus descrito em humanos
• Mundo: 15 a 20 milhões de pessoas infectadas pelo HTLV-1
• Brasil: ~2,5 milhões de pessoas infectadas pelo HTLV-1
• Regiões endêmicas a prevalência aumenta com a idade e é
maior no sexo feminino
• Fonte: Catalan-Soares, 2001; Coelho-dos-Reis, 2007
EPIDEMIOLOGIA

47. EPIDEMIOLOGIA

48. 9

49. PATOGENICIDAD E IMUNIDAD
• El crescimento celular descontrolado puede
transformar neoplasicamente a célula
• Ou promover alterações genéticas ao longo de um
período extenso
• Associados a transtornos neurológicos não-
neoplásicos e outras doenças
• HTLV-I causa leucemia linfocítica aguda de células
T do adulto (ATLL) e mielopatia associada a HTLV-I
(parapesia espástica tropical), uma doença
neurológica não-oncogênica
• Fonte: Murray, 2006

50. Población blanca
Enfermedad hematológica Enfermedad neurológica

51. MIELOPATIA / PARAPARESIA ESPÁSTICA TROPICAL (HAM/TSP)
www.vertebrata.com.br/imagens/fig_corpo_cerv.jpg
( De 2-3 % )

52. ( De 1-2 % )
Leucemia / linfoma das células T do adulto (ATLL)
Principais sintomas e
sinais clínicos
Febre, dor abdominal, icterícia,
perda de peso, linfoadenopatia,
hepatoesplenomegalia,
hipercalcemia, infecções
oportunistas e lesões de pele
www.ebc.ee/~mremm/virol/rna/1512.jpg

53. DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
• Realizado en dos etapas: Clasificacion y confirmacion
• Clasificacion: testes laboratoriais sorológicos (ELISA ou
aglutinação – Sorologia para HTLV)
• presença de anticorpos contra o vírus
• Confirmação: utiliza-se geralmente um teste sorológico
(Western blot) e em casos de indeterminação deste, o teste
PCR (HTLV-PCR)
• Os dois últimos testes, além de confirmarem a infecção,
discriminam se ela é causada pelo HTLV-1 ou HTLV-2
Fonte: www.laboratoriocepac.com.br/informes_int.asp?...

54. 00000000000

56. QUE ES LA PCR ?
La reacción en cadena de la polimerasa es una técnica de
biología molecular en donde hay reacción enzimática in
vitro que amplifica millones de veces una secuencia
específica de ADN durante varios ciclos repetidos en los
que la secuencia blanco es copiada fielmente.

57. APLICACIONES DE PCR EN MEDICINA
• Detección de cantidades mínimas (diagnóstico temprano en
pacientes asintomáticos)
• Monitoreo de terapia (por ej. disminución de carga viral)
• Evaluación de terapia - pronostico de recaída
• Detección de cepas resistentes a antibióticos
• Detección temprana de Citomegalovirus y otros patógenos
en pacientes con transplante de órganos (por
inmunosupresión y mayor riesgo a infecciones latentes)
10

58. MUESTRAS QUE PUEDEN PATOGENOS QUE PUEDEN
SER SER EVALUADAS POR PCR DETECTADOS POR PCR
•Sangre - Bacterias
•Mucosa - Hongos
•Tejido - Parásitos
•Orina - Virus
•Heces - Mutaciones en Genes
•Líquido cefalorraquídeo - Ausencia /Deleción de genes

59. USOS DE LA TECNOLOGIA MOLECULAR EN LA
SOCIEDAD
• Medicina : Diagóstico Molecular:
Enfermedades geneticas
Enfermedades infecciosas
• Identificación genética y filiación (Pruebas de paternidad,
medicina forense, pedigree de animales, etc...)
• Mejoramiento genético en animales y plantas
• Productos biomédicos
• Terapia génica

61. FUNDAMENTO PCR
Es la amplificacion. enzimática de un fragmento de ADN
flanqueado por dos secuencias de oligonucleótidos que hibridan
en la cadena complementaria de la molécula molde que se va a
amplificar (cebadores o “primer”) y que son utilizados por una
DNA polimerasa termoresistente para copiar la secuencia de la
misma.
Consta de 3 etapas: desnaturalización, hibridación y extensión.

62. PCR
Aspectos generales
Ampliamente sensible, detecta mínimas
cantidades de un gen o secuencia.
Rápida. En pocas horas permite obtener
resultados
Múltiples aplicaciones

63. 11

65. 10

66.  PASOS DE LA PCR
12

68. CARGA VIRAL -
VIH
 PRE ANALITICO
 NO MAS DE 48 HORAS PARA
SU PROCESO.
. SE REQUIERE PLASMA.
VOLUMEN DE 1ml DEPENDIENDO
DEL EQUIPO.

69. CARGA VIRAL –
VIH
SEPARACION DE
PLASMA Y
PREPARACION
PARA SU PROCESO

70. QUE ES
CARGA VIRAL
 Es la cuantificación de VIH-1 que
se encuentra en el plasma o
cuantificación del RNA vírico que
existe en una muestra. El método
empleado consiste en técnicas de
biología molecular o de
diagnóstico genético, usando la
reacción en cadena de la
polimerasa.
 La carga viral resulta un marcador
de la actividad del VIH-1 y junto
con la determinación de CD4
miden la competencia del sistema

71. QUE ES UN ANALISIS
DE CARGA VIRAL
 Determinan el numero de
partículas de VIH en una
muestra de sangre. Esto se lleva
a cabo comprobando los genes
del VIH, llamado ARN por
mililitro

72. QUE SIGNIFICA CARGA
VIRAL INDECTECTABLE
Todo los análisis de CV tiene un
punto de corte por debajo del cual
no pueden detectar el VIH de
manera fiable. Este punto se llama
limite de detección y varia de un
instrumento de análisis a otro

73. CARGA
VIRAL Y CD4

74. PCR