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Blgo. Carlos A. Fernández Miñope – FernandezC4@gmail.com – Enero, 2014
M.V. Nieves Vargas Machuca
Segunda Especialidad en Microbiología Clínica
Hospital Regional Lambayeque - Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo
Fuente DGE-MINSA
NORMA TÉCNICADESALUDPARALAVIGILANCIA,
PREVENCIÓNYCONTROLDELA PESTEENELPERÚRM
N°684-2010/MINSA-NTSN°083 –MINSA/DGSP.V.01
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Areas de riesgo 2010 según OPS/OMS
• Alta endemicidad:
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del Congo
• Actividad Regular:
• Mongolia, Kazakhstan, USA, China,
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Yersinia pestis
Gram Cocobacilos Gram (-), pleomórficos, aislados o
en cadenas cortas.
Bipolares con tinción de Wright o Giemsa
Aerobios/anaerobios Anaerobios facultativos
Temperatura de crecimiento La óptima está debajo de 37 ºC (25-29 ºC)
Hemolisis Negativo
Catalasa Positivo
Oxidasa Negativo
Motilidad Negativo
Aerobios/anaerobios Anaerobios facultativos
Ureasa Negativo
Requerimientos Hierro
Blgo.CarlosA.FernándezMiñope-
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Tinción de Gram
Tinción de Giemsa
o Wright
Blgo.CarlosA.FernándezMiñope-
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Blgo.CarlosA.FernándezMiñope-
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Scanning electron microscopy of Hms-positive (A) and Hms-negative (B) Yersinia pestis grown on
agar plates at 21 ºC
A, In vivo biofilm dissected from a flea. B, In vitro biofilm produced on a glass surface by Yersinia
pestis KIM6+(pGFP)
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Biofilm-like growth of Hms-positive Yersinia pestis in the proventriculus of blocked fleas. A, Digestive tract
dissected from an uninfected Xenopsylla cheopis flea, indicating the location of the proventricular valve
(PV), which connects the esophagus (E) to the midgut (MG). (B) Scanning electron microscopy of the spines
lining the interior of a proventriculus from an uninfected flea, (C)a flea infected with Hms-negative Y. pestis,
(D) and a flea blocked with Hms-positive Y. pestis, showing bacteria embedded within an extracellular
matrix.
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Y. pestis defense mechanisms
against host innate immunity.
(a) Defense mechanisms at the
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release of Y. pestis from
macrophages.
Componentesdel Sistemade Secreciónde
Tipo IIIdeY. pestis
Blgo.CarlosA.FernándezMiñope-
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Blgo.CarlosA.FernándezMiñope-
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Infección de Glóbulos rojos de mamíferos por Y. pestis. a. GRs humanos control
cultivados in vitro; c. Diferentes etapas de daño a los GR humanos, bacteria alrededor
del GR, forma poros en sus membranas, invade y luego deja el GR y aparece
extracelularmente.
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Infección de Glóbulos rojos de mamíferos por Y. pestis. b GRs humanos control
cultivados in vitro; d. Daño al GR humano, formación de poros, localización
intracelular de la bacteria, con cadenas de microorganismos fuera del GR.
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Infección de Glóbulos rojos de mamíferos por Y. pestis. e. Destrucción total de los
GRs de ratón por una cepa virulenta, mostrando localización intracelular y aparente
multiplicación de Y. pestis dentro del GR
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Y. pestis
Oxidasa
Catalasa
Sideróforo
Glucosa
Inhibición del crecimiento
H2O2
Regula[ ]
Hemoglobina
Grupo Hem
Fe2+
+
Fe3+
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Oxigenación
Síntomas de envenenamiento
Hipoxia = Cianosis = “Peste Negra”
Carencia G6PDH
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Simplified model of Yersinia species evolution based on
present knowledge of genome data.
Patogenia de Peste Bubonica
• Aguda y dolorosa de los ganglios linfáticos (bubón)
• Frecuentemente al sitio de picadura por una pulga infectante.
• Localizaciones más frecuentes: inguinal, crural o femoral, axilar y
cervical; también puede localizarse en la región post - auricular, poplítea,
epitroclear y otros.
• La Yersinia pestis se multiplica en gran medida, causando la necrosis de
los tejidos del ganglio, formándose abscesos que en algunos casos se
fistulizan y drenan hacia el exterior,
• Los bacilos logran vencer la resistencia de los ganglios llegando a pasar a
la sangre (bacteremia) con localizaciones secundarias en otros órganos,
tales como el bazo, hígado, pulmonesy meninges (septicemia).
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Peste Septicemica
• Es la invasión del bacilo al torrente sanguíneo
en forma masiva (bacteremia).
• Con localización en otros órganos, tales como
bazo, hígado, pulmones, meninges. Esta
• forma clínica puede ser:
• Peste septicémica secundaria: Cuando se
deriva de la forma bubónica, tiene un mayor
compromiso del estado general, toxemia,
pequeñas hemorragias de la piel y
deshidratación.
• Peste septicémica primaria: Cuando el
compromiso de ganglios no es evidente, la
Yersinia pestis se multiplica en la sangre,
pudiendo identificarse por hemocultivo
Peste Neumónica
• El enfermo al toser elimina los bacilos
pestosos incluidos en las gotitas de Flügger,
• Clínicamente la peste neumónica se
caracteriza por tener un comienzo brusco
con fiebre alta, disnea, tos, taquicardia,
cefalea, mialgias intensas, temblores y
postración.
• la muerte en un lapso de uno a tres días.
• La Peste Neumónica puede ser:
• Peste neumónica secundaria: es muy grave y
con alta letalidad.
• Puede ser consecuencia de un retraso en el
diagnóstico y/o por inadecuado tratamiento
de la peste bubónica o peste septicémica
primaria.
• Peste neumónica primaria: Cuando el
enfermo con peste neumónica secundaria al
toser elimina al bacilo pestoso
transmitiéndolo a sus contactos
directamente a través de las gotas de
secreciones respiratorias, pudiendo producir
brotes localizados o epidemias devastadoras.
El paciente puede fallecer dentro de 48
horas.
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DIAGNOSTICO DE PESTE
 Muestras biologicas para diagnostico de peste (1)
1- Fase Aguda * :
* bubonica : Aspirado de bubon
• pneumonica : Esputo
• septiceamica: Sangre
• muerte : higado, bazo, pulmon, medula osea y
otros
* Sangre
Cultivo - Immunologia – Tecnicas Moleculares
 Pruebas para diagnóstico de peste
1. Pruebas Microbiológicas:
•Cultivo en Agar Sangre, CIN, BHI, Inoculación en ratones
•Susceptibilidad antibiótica
2. Pruebas Microscopia :
•Gram, Wayson (bipolar)
•Inmunofluorescencia Directa –IFD
3. Pruebas inmunológicas :
•ELISA IgG para humano, canes, roedores.
•Prueba rapida inmunocromatografica Ag F1
4. Pruebas moleculares :
•PCR Convencional.
•PCR Tiempo Real
•PFGE y secuenciamiento
DIAGNOSTICO DE PESTE HUMANA
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DiferenciaentreYersiniapestis yYersinia
pseudotuberculosis. 25°Cen24 horas
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Lisis de Yersinia por bacteriofago.
• La Yersinia pestis es
sensible a ser lisada por
un bacteriofago
especifico y esta
actividad depende de la
temperatura. El
bacteriofago de Y. pestis,
específicamente, lisa su
célula huésped a
temperatura ambiental
(22-25 C) y a 37 C
Yersinia
pseudotuberculosa, es
también lisada por el
bacteriofago solo a 37 c
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Y. pestis Antigeno F1
• Glicoproteína Capsular - codificadas por el ADN
plasmídico (PFRA)
•Y. pestis especifico
• Abundante (secretada at 37°C), resistente al calor
• Muestras de diferentes tipos (humanos, roedores)
•No influenciada por los contaminantes
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Fallecido sin tratamiento
ATB
Paciente recuperado
Fallecido sin
tratamiento ATB
Fallecido sin
tratamiento
ATB
Paciente
recuperado
Y. Pestis
F1 antígeno
Anticuerpos
Days
Punto de
corte
F1
dipstick
D0 D6
Paciente
recuperado
D8
F1 Antígeno bubón / esputo F1 Antígeno sangre/ orina
Y. pestis bubo n/ esputo Anti-F1 anticuerpo
ATB
Evolución de Y. pestis y concentración del
antígeno F1
recuperado
Inicio enfermedad
Blgo.CarlosA.FernándezMiñope-
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Dipstick para detección
de antígeno F1
- Principio:
Inmunocromatografia
partículas de oro coloidal
(Flujo vertical)
- Muestras:
Bubón, esputo, suero, orina,
etc
- Tiempo:
15 minutos
Blgo.CarlosA.FernándezMiñope-
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Inmunocoloración Específica Buscando
Yersinia pestis
Ensayo de fluorescencia directa (DFA)
Usar como prueba rápida (30 minutos),
prueba presuntiva durante el examen inicial
Como ayuda para la identidad de un
aislamiento recuperado
Coloración Inmunohistoquímica (IHC)
Usar como examen forense de material
biopsiado y preservado como ayuda para la
identificación
Inoculación de Ratón
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GRACIAS
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