1. Cultivo de tejidos y
células
Curso de posgrado
Productos Biofarmacéuticos:
de I + D a control de calidad
Dra. Lorena González
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA, UBA.
2. ¿Cuál es la importancia de los cultivos de tejidos y
celulares para la producción de ?
…y control de calidad
SISTEMAS DE
EXPRESIÓN
BIOENSAYOS
en I+D….
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3. Historia del desarrollo del cultivo de tejidos
1885: Wilhem Roux
Cultivo de células de
embrión de pollo en
solución salina
1907: R. G. Harrison Cultivos de médula espinal
embrionaria de anfibios
1910: Burrows Plasma de pollo para nutrir
los explantes de tejidos
1916: Rous y Jones Extractos enriquecidos en
tripsina para disociar células
´40s:
El aislamiento de los primeros antibióticos
permitió el gran desarrollo del cultivo de
tejidos
4. Definición
Cultivo de tejidos: conjunto de técnicas que
permiten el mantenimiento de las células 'in
vitro', manteniendo al máximo sus
propiedades fisiológicas, bioquímicas y
genéticas.
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5. Tipos de cultivos de tejidos.
Este tipo de cultivo permite mantener los tipos celulares
diferenciados. Es una buena réplica del tejido de
origen, pero no permite su propagación.
El órgano se conserva en un
medio del que obtiene los
nutrientes, al que puede
liberar los desechos y en el
que mantiene su estructura
tridimensional
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6. Tipos de cultivos de tejidos.
Se coloca un fragmento de
tejido o de órgano en la
interfase sólido-líquido de un
soporte de vidrio o de plástico.
Las células pueden migrar y
proliferar por la superficie del
soporte.
Proteomic identification of new adipokines and miokines
implicated in obesity (Full text in Spanish) - Scientific Figure on
ResearchGate. Available from:
https://www.researchgate.net/figure/Figura-29-Foto-del-
cultivo-de-diferentes-explantes-tisulares-De-izquierda-a-
derecha-y_fig13_259117313 [accessed 28 May, 2019]
7. Tipos de cultivos de tejidos.
En estos cultivos se pierden las
interacciones célula-célula y las
interacciones de la célula con la
matriz extracelular.
Sin embargo, las células son
capaces de proliferar y la población
celular crece notablemente.
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8. Cultivo celular: es el proceso mediante el
que células aisladas pueden cultivarse en
condiciones controladas. Es un modelo de
estudio in vitro por el cual pueden crecer y
mantenerse en suspensión o en monocapa
células, por períodos prolongados
Definición
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9. : las células crecen adheridas
sobre un soporte sólido (plástico o vidrio). El anclaje al sustrato es
un prerrequisito para la proliferación celular (mayoría de las células
excepto para las hematopoyéticas).
: las células se encuentran
dispersas en el medio de cultivo. Su crecimiento no depende del
anclaje. Este tipo de cultivo se restringe a las células
hematopoyéticas, células madre, líneas celulares transformadas y
células tumorales.
10. Crecimiento de las células en cultivo
Fase de latencia (período log).
Fijación al sustrato e inicio del
ciclo celular.
Fase de crecimiento
exponencial. El número de
células se duplica
aproximadamente cada 24
horas.
https://nptel.ac.in/courses/102103016/35
11. Fase de confluencia. Las
células dejan de dividirse
(monocapa: inhibición por
contacto; suspensión:
consumo del medio).
Fase de muerte. Las
células entran en una fase
de senescencia que
termina con la muerte de
las células en cultivo.
Crecimiento de las células en cultivo
https://nptel.ac.in/courses/102103016/35
12. Tipo de cultivos celulares
Cultivos primarios
Cultivos celulares obtenidos de tejidos normales a partir de
un organismo vivo.
Características:
Las células mantienen la viabilidad un
periodo de tiempo limitado y no se
reproducen en cultivo.
El cultivo presentan una reducción en
el número total de células vivas a lo
largo del tiempo
Hepatocitos de ratón
Ejemplo:
13. Tipo de cultivos celulares
Características:
Poder limitado de proliferación celular
(número limitado de generaciones).
Línea celular primaria
Cultivo establecido a partir de un tejido u órgano, que se
mantiene un periodo de tiempo limitado pero con
reproducción de las células en el cultivo.
Fibroblastos dérmicos
Ejemplo:
14. Tipo de cultivos celulares
Líneas celulares continuas
Cultivos celulares obtenidos a partir de un cultivo primario,
mediante un fenómeno de transformación.
Características:
Poder ilimitado de proliferación
celular.
Poder ilimitado de expansión
(número ilimitado de generaciones).
MDA-MB-231
Ejemplo:
15. BASIC TECHNIQUES IN ANIMAL CELL CULTURE - Scientific Figure on ResearchGate. Available from:
https://www.researchgate.net/figure/Growth-of-animal-cells-in-culture_fig3_266455722 [accessed 28 May, 2019]
Tipo de cultivos celulares
Cultivoprimario
Línea celular
primaria
Línea celular
continua
16. Líneas celulares continuas
Las células transformadas se caracterizan porque:
• Son inmortales: crecen indefinidamente
• Su crecimiento es aberrante: se pierde la inhibición por
contacto y la dependencia del anclaje
• Son malignas: invaden tejidos y dan lugar al crecimiento de
tumores
• Son genéticamente inestables: son heteroploides (varía el
número de cromosomas) y presentan aberraciones
cromosómicas
En 1952 se obtuvo la primera línea
celular continua humana: las
células HeLa
19. Muchas gracias
Dra. Lorena González
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA, UBA.
Curso de posgrado
Productos Biofarmacéuticos:
de I + D a control de calidad