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FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA Y
CIENCIAS DEL MAR
FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO
POFCM0102-1 Hoja 1 de 3
CÓDIGO
MATERIA
Cultivode plancton FMAR02519
NOMBRE
DavidQuiñonez
PARALELO
1
TEMA DE LA PRÁCTICA
Cultivode microalgasymantenciónde cepas.
OBJETIVOS GENERALES:
Cultivo de microalgas, tetraselmis sp.
Mantención de cepas de tetraselmis sp.
INTRODUCCIÓN:
Parámetros del cultivo:
Un cultivotiene tresdiferentescomponentes: un medio de cultivo contenido en un recipiente adecuado;
lasalgas creciendoenel medioyaire,para permitirel intercambiode dióxido de carbono entre el medio y
la atmósfera. Los parámetros más importantes que regulan el crecimiento de las algas son, cantidad y
calidad de nutrientes, luz, pH, turbulencia, salinidad y temperatura. (Fao, 2007)
-Nutrientes:
Requerimientos Compuestos químicos Valores
C CO2, CO3 g/100ml
O,H O2, H2O g/100ml
N N2, NH4, NO3 g/100ml
P PO4 g/100ml
S SO4 g/100ml
Na, K, Ca, Mg Sales g/100ml
Fe, Zn, Mn, B, Br, Si Sales mg/100ml
Cu, Co, Cl, I, Sr, Rb, Al, et Sales µg/100ml
Vitaminas B12, tiamina y biotina µg/100ml
FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA Y
CIENCIAS DEL MAR
FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO
POFCM0102-1 Hoja 2 de 3
-Temperatura:
La mayoríade la especiesde microalgastolerantemperaturasentre16 y 27ºC, aunque estopuede variarde
acuerdo a la composición del medio de cultivo o la especie cultivada. Un valor intermedio de 18-20ºC es
frecuentementeempleado.Temperaturaspordebajode los16ºC puedenretardarel crecimiento,mientras
que aquellas por arriba de los 35ºC son letales para cierto número de especies.
-Luz:
Comoen lasplantas,laluz esla fuente de energíaque promuevelas reacciones fotosintéticas en las algas.
Aquí, la intensidad, la calidad espectral y el fotoperiodo deben ser considerados.
-pH:
El rango del pH para la mayoría de las especies de algas cultivadas es entre 7 y 9, siendo el rango óptimo
8.2-8.7. Para mantener un pH aceptable es necesario airear el medio de cultivo.
-Aireación:
La aireaciónesnecesariaparaprevenirlasedimentaciónde lasalgas,paraasegurarque todas lascélulasde
la población están igualmente expuestas a la luz y los nutrientes, y para mejorar el intercambio de gases
entre el medio de cultivo y el aire.
Mantenimiento de cepas:
En estaetapa la cepas (stocks) de algas se mantienen en fiolas o matraces de 250 cc con 100 ml de medio
de cultivoy/oenplacas con agar. El mediode cultivose preparasegúnel procedimiento descrito para cada
caso y segúnlaespecie,seaéstade maro de agua dulce.Estaetapa tiene carácterde cultivoaxénico por lo
que un máximo de cuidado se debe tener para no contaminar las cepas. La intensidad de luz debe estar
entre 500 y 1000 lux y la temperatura de 15 grados centígrados constante. La cepa se mantiene en una
incubadorque brindatodasestasfacilidades.Lascepastambiénse mantienen entubosde ensayo con tapa
rosca o de algodón de 20 cc. (Arellano, 1994)
EQUIPOS Y MATERIALES:
Aza de platino
Mechero
Caja Petri con tetraselmis sp.
Medio de cultivo agar-agar
Medio de cultivo f/2 Guillard
Alcohol
Tubo de ensayos
Botellas de vidrio
FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA Y
CIENCIAS DEL MAR
FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO
POFCM0102-1 Hoja 3 de 3
PROCEDIMIENTO:
Mantención de cepas de microalgas:
a) Prepare cajas Petri, conteniendo medio de cultivo solidificado con 1 a 1,5% de agar.
b) Con el asa de platino (punta esterilizada sumergida en alcohol y quemada), coger una pequeña porción
de la cepa de la caja Petri con la muestra dada.
c) Con el asa de platino (punta esterilizada sumergida en alcohol y quemada), bajo criterio de asepsia, rayar
en paralelo la muestra de la colección en el agar.
d) Luego repetir el paso b).
e) Transfiera las unidades algales de una colonia a un medio líquido (tubo de ensayo).
f) Al agar con la cepa se lo lleva al refri, mientras que los tubos de ensayos se los lleva a un ambiente
controlado ya descrito en la introducción,
g) Este proceso de mantención de cepa se puede repetir tanto del agar como del tubo de ensayo, pero para
la mantención de cepa en el tubo de ensayo, lo que se hace es colocar ¾ partes en una botella de medio
litro, y la parte restante a otro tubo de ensayo con medio de cultivo, y así mantener la cepa.
Transferencia a botella de medio y un litro:
a) Luego de permanecer una semana la microalga (tetraselmis sp) en el tubo de ensayo se lo pasa a un
medio con más volumen, en nuestro caso la botella de medio litro.
b) Se coloca los mecheros alrededor del tubo y las botellas que contienen el medio de cultivo.
c) Colocar ¾ partes en una botella de medio litro, y la parte restante a otro tubo de ensayo con medio de
cultivo
d) Luego de varias semanas repetiremos el procedimiento de transferencia pero esta vez a una botella de un
litro.
e) llevar a un ambiente controlado, pero en este caso se añadirá aireación y más luz.
RESULTADOS: (Puede incluir información, características)
Mantuvimos las cepas en el refri, atreves de cajas Petri.
Cultivamos exitosamente tetraselmis sp en una botella de un litro
Conclusión:
El procesode mantención de cepas en agar sirve para cultivar algas, siempre que queramos o se nos haya
muertos las que cultivamos en las botellas.
El procesode transferenciade tubo-botellamediolitro-botella de un litro sirve para aumentar el volumen
de nuestra alga.
Bibliografía
Arellano, H. G. (1994). http://mail-cenaim.espol.edu.ec. Obtenido de http://mail-
cenaim.espol.edu.ec: http://mail-cenaim.espol.edu.ec/publicaciones/algas/capitulo_3.pdf

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  • 1. FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA Y CIENCIAS DEL MAR FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO POFCM0102-1 Hoja 1 de 3 CÓDIGO MATERIA Cultivode plancton FMAR02519 NOMBRE DavidQuiñonez PARALELO 1 TEMA DE LA PRÁCTICA Cultivode microalgasymantenciónde cepas. OBJETIVOS GENERALES: Cultivo de microalgas, tetraselmis sp. Mantención de cepas de tetraselmis sp. INTRODUCCIÓN: Parámetros del cultivo: Un cultivotiene tresdiferentescomponentes: un medio de cultivo contenido en un recipiente adecuado; lasalgas creciendoenel medioyaire,para permitirel intercambiode dióxido de carbono entre el medio y la atmósfera. Los parámetros más importantes que regulan el crecimiento de las algas son, cantidad y calidad de nutrientes, luz, pH, turbulencia, salinidad y temperatura. (Fao, 2007) -Nutrientes: Requerimientos Compuestos químicos Valores C CO2, CO3 g/100ml O,H O2, H2O g/100ml N N2, NH4, NO3 g/100ml P PO4 g/100ml S SO4 g/100ml Na, K, Ca, Mg Sales g/100ml Fe, Zn, Mn, B, Br, Si Sales mg/100ml Cu, Co, Cl, I, Sr, Rb, Al, et Sales µg/100ml Vitaminas B12, tiamina y biotina µg/100ml
  • 2. FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA Y CIENCIAS DEL MAR FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO POFCM0102-1 Hoja 2 de 3 -Temperatura: La mayoríade la especiesde microalgastolerantemperaturasentre16 y 27ºC, aunque estopuede variarde acuerdo a la composición del medio de cultivo o la especie cultivada. Un valor intermedio de 18-20ºC es frecuentementeempleado.Temperaturaspordebajode los16ºC puedenretardarel crecimiento,mientras que aquellas por arriba de los 35ºC son letales para cierto número de especies. -Luz: Comoen lasplantas,laluz esla fuente de energíaque promuevelas reacciones fotosintéticas en las algas. Aquí, la intensidad, la calidad espectral y el fotoperiodo deben ser considerados. -pH: El rango del pH para la mayoría de las especies de algas cultivadas es entre 7 y 9, siendo el rango óptimo 8.2-8.7. Para mantener un pH aceptable es necesario airear el medio de cultivo. -Aireación: La aireaciónesnecesariaparaprevenirlasedimentaciónde lasalgas,paraasegurarque todas lascélulasde la población están igualmente expuestas a la luz y los nutrientes, y para mejorar el intercambio de gases entre el medio de cultivo y el aire. Mantenimiento de cepas: En estaetapa la cepas (stocks) de algas se mantienen en fiolas o matraces de 250 cc con 100 ml de medio de cultivoy/oenplacas con agar. El mediode cultivose preparasegúnel procedimiento descrito para cada caso y segúnlaespecie,seaéstade maro de agua dulce.Estaetapa tiene carácterde cultivoaxénico por lo que un máximo de cuidado se debe tener para no contaminar las cepas. La intensidad de luz debe estar entre 500 y 1000 lux y la temperatura de 15 grados centígrados constante. La cepa se mantiene en una incubadorque brindatodasestasfacilidades.Lascepastambiénse mantienen entubosde ensayo con tapa rosca o de algodón de 20 cc. (Arellano, 1994) EQUIPOS Y MATERIALES: Aza de platino Mechero Caja Petri con tetraselmis sp. Medio de cultivo agar-agar Medio de cultivo f/2 Guillard Alcohol Tubo de ensayos Botellas de vidrio
  • 3. FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA Y CIENCIAS DEL MAR FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO POFCM0102-1 Hoja 3 de 3 PROCEDIMIENTO: Mantención de cepas de microalgas: a) Prepare cajas Petri, conteniendo medio de cultivo solidificado con 1 a 1,5% de agar. b) Con el asa de platino (punta esterilizada sumergida en alcohol y quemada), coger una pequeña porción de la cepa de la caja Petri con la muestra dada. c) Con el asa de platino (punta esterilizada sumergida en alcohol y quemada), bajo criterio de asepsia, rayar en paralelo la muestra de la colección en el agar. d) Luego repetir el paso b). e) Transfiera las unidades algales de una colonia a un medio líquido (tubo de ensayo). f) Al agar con la cepa se lo lleva al refri, mientras que los tubos de ensayos se los lleva a un ambiente controlado ya descrito en la introducción, g) Este proceso de mantención de cepa se puede repetir tanto del agar como del tubo de ensayo, pero para la mantención de cepa en el tubo de ensayo, lo que se hace es colocar ¾ partes en una botella de medio litro, y la parte restante a otro tubo de ensayo con medio de cultivo, y así mantener la cepa. Transferencia a botella de medio y un litro: a) Luego de permanecer una semana la microalga (tetraselmis sp) en el tubo de ensayo se lo pasa a un medio con más volumen, en nuestro caso la botella de medio litro. b) Se coloca los mecheros alrededor del tubo y las botellas que contienen el medio de cultivo. c) Colocar ¾ partes en una botella de medio litro, y la parte restante a otro tubo de ensayo con medio de cultivo d) Luego de varias semanas repetiremos el procedimiento de transferencia pero esta vez a una botella de un litro. e) llevar a un ambiente controlado, pero en este caso se añadirá aireación y más luz. RESULTADOS: (Puede incluir información, características) Mantuvimos las cepas en el refri, atreves de cajas Petri. Cultivamos exitosamente tetraselmis sp en una botella de un litro Conclusión: El procesode mantención de cepas en agar sirve para cultivar algas, siempre que queramos o se nos haya muertos las que cultivamos en las botellas. El procesode transferenciade tubo-botellamediolitro-botella de un litro sirve para aumentar el volumen de nuestra alga. Bibliografía Arellano, H. G. (1994). http://mail-cenaim.espol.edu.ec. Obtenido de http://mail- cenaim.espol.edu.ec: http://mail-cenaim.espol.edu.ec/publicaciones/algas/capitulo_3.pdf