Este documento describe un experimento realizado por estudiantes de ingeniería química para comprobar experimentalmente la ley de Lambert-Beer. Los estudiantes prepararon soluciones de permanganato con diferentes concentraciones y midieron su absorbancia. Luego graficaron los resultados para verificar la relación directamente proporcional entre la concentración y la absorbancia, tal como lo establece la ley de Lambert-Beer. El documento también incluye preguntas sobre los fundamentos teóricos de la espectrofotometría y la ley.
4. PROCEDIMIENTOS A REALIZAR EN LA PRACTICA
A partir de una solución
madre de permanganato que
contiene 0.1 mg, hacer
distintas soluciones con
concentraciones distintas.
Las soluciones se preparan
depositando en matraces
aforados de 100ml la cantidad
necesaria de la solución
estándar de permanganato.
Se guardan al abrigo de la luz.
Se miden aproximadamente
de 5 a 7 ml.
Preparar el equipo
previamente y calentar
durante 15 minutos para
estabilizar sistemas
electrónicos, ajustar el 0% y
100% la transmitancia.
Seleccionar una longitud de
onda de 490 nm.
5. Se procederá a leer las
celdas del
espectrofotómetro
empezando con la
menos concentrada.
Después de leer todos
los tubos se grafican los
resultados.
6. CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es el enunciado de la ley Lambert y Beer .
Esta ley expresa la relación entre absorbancia de luz monocromática (de longitud de onda fija) y concentración
de un cromóforo en solución: A = log I/Io = ε·c·l La absorbancia de una solución es directamente proporcional a
su concentración –a mayor número de moléculas mayor interacción de la luz con ellas-; también depende de la
distancia que recorre la luz por la solución –a igual concentración, cuanto mayor distancia recorre la luz por la
muestra más moléculas se encontrará-; y por último, depende de ε, una constante de proporcionalidad -
denominada coeficiente de extinción- que es específica de cada cromóforo. Como A es adimensional, las
dimensiones de ε dependen de las de c y l. La segunda magnitud (l) se expresa siempre en cm mientras que la
primera (c) se hace, siempre que sea posible, en M, con lo que las dimensiones de ε resultan ser M-1·cm-1. Este
coeficiente así expresado, en términos de unidades de concentración molar (o un submúltiplo apropiado), se
denomina coeficiente de extinción molar (εM). Cuando, por desconocerse el peso molecular del soluto, la
concentración de la disolución se expresa en otras unidades distintas de M, por ejemplo g·L-1, las dimensiones
de ε resultan ser distintas, por ejemplo g-1·L·cm-1, y al coeficiente así expresado se denomina coeficiente de
extinción específico (εs).
La ley de Lambert-Beer se cumple para soluciones diluidas; para valores de c altos, ε varía con la concentración,
debido a fenómenos de dispersión de la luz, agregación de moléculas, cambios del medio, etc.
7. CUESTIONARIO
2. Investiga el fundamento de la espectrofotometría de absorción.
El espectro de absorción de un material muestra la fracción de la radiación electromagnética incidente
que un material absorbe dentro de un rango de frecuencias. Es, en cierto sentido, el opuesto de un
espectro de emisión. Cada elemento químico posee líneas de absorción en algunas longitudes de onda,
hecho que está asociado a las diferencias de energía de sus distintos orbitales atómicos. De hecho, se
emplea el espectro de absorción para identificar los elementos componentes de algunas muestras, como
líquidos y gases; más allá, se puede emplear para determinar la estructura de compuestos orgánicos
3. Investiga el diagrama óptico de los elementos que constituyen un espectrofotómetro.
10. CONCLUSIONES
A partir de esta práctica se logró llevar a la práctica la ley de Lambert Beer ya
que se conoció y utilizó una técnica de aplicación para lograr determinar la
concentración de una muestra de concentración desconocida a partir de su
absorbancia,. Por esta razón es importante conocer estas técnicas, leyes y
formulaciones ya que si se tienen estas bases para conocer algunas sustancias
desconocidas, con estas bases se puede determinar concentración,
absorbancia, coeficiente de extinción molecular e incluso la transmitancia de
una solución.
11. BIBLIOGRAFÍA
UCO. (s,f). Espectrofometría: Espectros de absorción y cuantificación colorimétrica de
biomoléculas. Recuperado el 31 de Octubre de 2015, de:
http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-ol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETR%C3%8DA.pdf
WIKIPEDIA. (2015). Ley de Beer-Lambert. Recuperado el 31 de Octubre de 2015, de:
https://es.wikipedia.org/wiki/Ley_de_Beer-Lambert
Espectrometría. (s,f). Espectrometría de absorción. Recuperado el 31 de Octubre de 2015,
de: http://www.espectrometria.com/espectrometra_de_absorcin