Este documento describe los procedimientos para valorar el ácido ascórbico (vitamina C) y polifenoles en muestras de alimentos y medicamentos utilizando cromatografía, titulación redox y el ensayo colorimétrico de Folin-Ciocalteu. Incluye las propiedades y funciones de la vitamina C, así como las dosis diarias recomendadas. Los métodos descritos permiten cuantificar de manera precisa estos compuestos bioactivos.
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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
Calidad, Pertinencia y Calidez
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
ANÁLISIS DE MEDICAMENTO
Diario de Campo # 24
Estudiante: Wilmer Andrés López Pinta.
Docente: Bioq. Farm. Carlos Alberto García González, Ms.
Fecha: miércoles, 1 de agosto de 2018. Curso: 9no Semestre “A”
VALORACION DEL ÁCIDO ASCÓRBICO O VITAMINA C
La vitamina C
es una
vitamina
hidrosoluble
El ácido
ascórbico o
vitamina C es
un donador
de electrones
Contribuye a
la prevención
del daño
oxidativo
Ayuda en la
síntesis y el
metabolismo
de la tirosina,
ácido fólico y
el triptófano
También en la
hidroxilación
de glicina,
prolina,y
catecolaminas
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VALORACIÓN DEL ÁCIDO ASCÓRBICO (FARMACOPEA ARGENTINA 7ma ED. VOL II,
Pág. 115)
La cromatografía
y la titulación
volumétrica de
óxido-reducción
son métodos
utilizados para
cuantificar el
contenido de
vitamina C de un
alimento.
La cromatografía
líquida de alta
presión (HPLC) es
el método más
utilizado por
ofrecer una gran
precisión de los
resultados.
La Vitamina C se
puede reconocer
mediante azul de
metileno. Este
colorante cuando
está oxidado es de
color azul y se
reduce fácilmente
formando un
compuesto
incoloro.
Las dosis
recomendadas
por la
Organización
Mundial de la
Salud (OMS) para
la vitamina C se
sitúan en 90 mg
diarios para
hombres y 75 mg
para mujeres.
Pesar exactamente alrededor de 400 mg de Ácido
Ascórbico.
Disolver en una mezcla de 100 ml de agua y 25 ml de
ácido sulfúrico 2 N
Agregar 3 ml de almidón (SR) y titular
inmediatamente con iodo 0,1 N (SV).
Realizar una determinación con un blanco.
Cada ml de iodo 0,1 N equivale a 8,81 mg C6H8O6.
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Muchos compuestos
polifenólicos tienen un
efecto sobre la calidad de
los alimentos que los
contienen, puesto que son
responsables de algunas
propiedades sensoriales.
Su determinación
puede realizarse por
medio de diversos
métodos como el
ensayo Folin-Ciocalteu,
a pH básico, dando
lugar a una
coloración azul.
Susceptible de ser
determinada
espectrofotométricament
e a 765 nm
• DETERMINACION DE POLIFENOLES EN EL ZUMO DE NARANJA
• Preparación del extracto de polifenoles de la muestra de zumo.
• En un tubo tomar la cantidad adecuada de muestra de zumo y
añadir metanol en relación 1:2.
• Adicionar NaF 2mM para inactivar la encima polifenol oxidasa y
prevenir la degradación de los polifenoles durante el ensayo.
• Homegeneizar el contenido de los tubos en el vortex y centrifugar a
10000 rpm durante 15 minutos a 10ºC.
• Recuperar el sobrenadante
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DETERMINACIÓN DE POLIFENOLES EN LA MUESTRA Y EN LOS PATRONES DE ÁCIDO
GÁLICO
Tomar 250 μL de cada disolución patrón de
ácido gálico o del sobrenadante procedente
de la extracción de los compuestos
polifenólicos en la muestra y colocarlos en
matraces aforados de 25 mL.
Añadir 15 mL de agua destilada y 1,25 mL de
reactivo de Folin-Ciocalteau.
Homogeneizar el contenido de los matraces y
dejar reposar 8 minutos en oscuridad.
Transcurrido este tiempo, adicionar a cada
matraz 3,75 mL de la disolución de carbonato
sódico al 7,5 % y llevar a un volumen de 25 mL
con agua destilada.
Homogeneizar los matraces y mantener en
oscuridad a temperatura ambiente durante 2
horas.
Medir la absorbancia a 765 nm.
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BIBLIOGRAFÍA
❖ GARCIA CARLOS. Control de Calidad de los Medicamentos volumen I y II Ecuador
Ediciones UTMACH 2015.
❖ USP 34.2011. The United States pharmacopeia NF 29. The national formulary.
EEUU.V.1 (1713p.) v. 2 (1525p.) v3 (1395 p.)
❖ VILA JATO ed. Tecnología farmacéutica. Vol. I y 2. España. Ed. Síntesis. 2009. España
v. 1 (625 p.) v. 2 (591 p.)
❖ KUMATAE J. 1992. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Ed. Secretaria de
Salud. México (1984 P.)
FIRMA DEL ESTUDIANTE
Wilmer Andrés López Pinta
C.I. 1310695729