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BIOLOGÍA MOLECULAR
Universidad Autónoma de Nayarit
Unidad Académica de Agricultura
Programa Académico de Biología
Docente: M. en C. Karina Mejía
Martínez
Xalisco, Nayarit, Abril 2014
TRANSCRIPCIÓN EN
EUCARIOTAS
Presentado por: Andres Prieto Pineda
TRANSCRIPCIÓN
"La síntesis de ARN utilizando
un molde de ADN. Se
considera la primera etapa de
la expresión génica."
(Campbell et al, 2008)
Consiste de 3 etapas:
• Iniciación
• Elongación
• Terminación
(Alberts et al, 2008)
INICIACIÓN
Formación del CIT (Complejo de Iniciación de la Transcripción)
• Para que la transcripción
comience, unas proteínas
denominadas "factores de
transcripción" deben unirse
a una región específica de
ADN denominada el
"promotor".
• La cadena de RNA
complementaria se crea en la
dirección 5’  3’
(Gregory, 2014) (Petty, 2005)
• Existen factores de
regulación que afectan a la
transcripción
• Enhancers y Silencers son
secuencias de ADN que se
encuentran mucho antes del
promotor
Activador
Enhancer
Coactivadores
Velocidad de
transcripción
aumenta
Silenciador (Silencer)
La transcripción del
ADN a ARN se
bloquea
Represor
1. Se une a la caja TATA; contiene
TBP (proteína de unión TATA)
2. Se forma el complejo pre-iniciación:
RNA Pol II, TFII H,E,F,A,B
3. El complejo pre-iniciación
abre y estabiliza el hélice
4. TFII H, B, E dejan el complejo
5. El CTD de Pol II (dominio
carboxi terminal) es
fosforilado
6. TFII D y A se quedan en la caja
TATA
7. Pol II y TFII F continúan el
síntesis de ARNm hasta llegar al sitio
de terminación
Nombre Número de
Subunidades
Función en Iniciación de
Transcripción
TFII D
TBP subunidad
TAF subunidades
1
~11
Reconoce caja TATA
Reconoce otras secuencias de ADN cerca
del punto de inicio de la transcripción;
regula unión de TBP a ADN
TFII B 1 Posiciona con precisión la ARN
polimerasa en el sitio de inicio
de la transcripción
TFII F 3 Estabiliza la interacción de ARN
polimerasa con TBP y TFII B; ayuda a
atraer TFII E y TFII H
TFII E 2 Atrae y regula TFII H
TFII H 9 Desenrolla el ADN en el punto de inicio
de la transcripción, fosforila Ser5 de la
ARN polimerasa CTD; libera ARN
polimerasa del promotor
ELONGACIÓN
Actividad de la RNA Polimerasa
• La maquinaria de
transcripción necesita mover
histonas fuera del camino
cada vez que se encuentra
un nucleosoma.
• Elongación continúa 1000-
2000 nucleótidos más allá
del extremo del gen que se
transcribe.
• Después de que el ARNpol
ha alargado a través de la
longitud del gen, alcanza
señales de terminación y el
ARN transcrito se libera.
• El resultado es un ARNm
inmaduro.
(Alberts et al, 2008)
TERMINACIÓN
Liberación de las enzimas y de la cadena de ARN
• Una vez que la elongación ha
terminado, el ARNm debe ser
procesado para convertirse en
ARNm maduro y salir del núcleo.
• Al lado 5’ se le agrega un 7-
metilguanosina (adición cap) y al
lado 3’ una cadena de poli-adeninas
• Cap – ayuda en el transporte del
núcleo al citoplasma; protege la
punta 5’ de degradación; promueve
la unión a ribosomas
• Cadena poli-A – protege la punta 3’
de degradación (100 – 300 adeninas)
(Alberts et al, 2008)
• Splicing - la eliminación de
intrones y la unión de
exones
• Spliceosoma – un conjunto
de más de 200 proteínas que
llevan a cabo el splicing
clásico
• Autosplicing – algunas
moleculas de RNA tienen la
capacidad de empalmarse
por si mismo
Grupo I Autosplicing
Grupo II Autosplicing
(Clancy, 2008)
El empalme alternativo se refiere al proceso por el cual un gen dado se
empalma en más de un tipo de molécula de mRNA dando lugar a múltiples
proteínas a partir del mismo gen.
(Clancy, 2008)
BIBLIOGRAFÍA
• Alberts B., A. Johnson, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts, P. Walter. 2008.
Molecular Biology of The Cell, Fifth Edition. New York. Garland
Science.
• Campbell N. A., J. B. Reece, L. A. Urry, M. L. Cain, S. A. Wsserman, P.
V. Minorsky, R. B. Jackson. 2008. Biology, Eighth Edition. New York.
Pearson: Benjamin Cummings.
• Clancy S. 2008. What’s the difference between mRNA and pre-mRNA?
It’s all about splicing of introns. See how one RNA sequence can exist
in nearly 40,000 different forms. Nature Education 1(1):31.
• Gregory M. J. 2014. Gene Expression: Trancription and Translation.
Recuperado el 23 de abril del 2014 de:
http://faculty.clintoncc.suny.edu/faculty/michael.gregory/files/bio%2
0101/bio%20101%20lectures/Gene%20Expression/gene%20expressio
n.htm
• Petty Y. 2005. So, how is mRNA made? Recuperado el 23 de abril del
2014 de: http://www.dnatutorial.com/RNATranscription2.shtml

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Transcripción en Eucariotas

  • 1. BIOLOGÍA MOLECULAR Universidad Autónoma de Nayarit Unidad Académica de Agricultura Programa Académico de Biología Docente: M. en C. Karina Mejía Martínez Xalisco, Nayarit, Abril 2014
  • 3. TRANSCRIPCIÓN "La síntesis de ARN utilizando un molde de ADN. Se considera la primera etapa de la expresión génica." (Campbell et al, 2008)
  • 4. Consiste de 3 etapas: • Iniciación • Elongación • Terminación (Alberts et al, 2008)
  • 5. INICIACIÓN Formación del CIT (Complejo de Iniciación de la Transcripción)
  • 6. • Para que la transcripción comience, unas proteínas denominadas "factores de transcripción" deben unirse a una región específica de ADN denominada el "promotor". • La cadena de RNA complementaria se crea en la dirección 5’  3’ (Gregory, 2014) (Petty, 2005) • Existen factores de regulación que afectan a la transcripción • Enhancers y Silencers son secuencias de ADN que se encuentran mucho antes del promotor Activador Enhancer Coactivadores Velocidad de transcripción aumenta Silenciador (Silencer) La transcripción del ADN a ARN se bloquea Represor
  • 7. 1. Se une a la caja TATA; contiene TBP (proteína de unión TATA) 2. Se forma el complejo pre-iniciación: RNA Pol II, TFII H,E,F,A,B 3. El complejo pre-iniciación abre y estabiliza el hélice 4. TFII H, B, E dejan el complejo 5. El CTD de Pol II (dominio carboxi terminal) es fosforilado 6. TFII D y A se quedan en la caja TATA 7. Pol II y TFII F continúan el síntesis de ARNm hasta llegar al sitio de terminación
  • 8. Nombre Número de Subunidades Función en Iniciación de Transcripción TFII D TBP subunidad TAF subunidades 1 ~11 Reconoce caja TATA Reconoce otras secuencias de ADN cerca del punto de inicio de la transcripción; regula unión de TBP a ADN TFII B 1 Posiciona con precisión la ARN polimerasa en el sitio de inicio de la transcripción TFII F 3 Estabiliza la interacción de ARN polimerasa con TBP y TFII B; ayuda a atraer TFII E y TFII H TFII E 2 Atrae y regula TFII H TFII H 9 Desenrolla el ADN en el punto de inicio de la transcripción, fosforila Ser5 de la ARN polimerasa CTD; libera ARN polimerasa del promotor
  • 10. • La maquinaria de transcripción necesita mover histonas fuera del camino cada vez que se encuentra un nucleosoma. • Elongación continúa 1000- 2000 nucleótidos más allá del extremo del gen que se transcribe. • Después de que el ARNpol ha alargado a través de la longitud del gen, alcanza señales de terminación y el ARN transcrito se libera. • El resultado es un ARNm inmaduro. (Alberts et al, 2008)
  • 11. TERMINACIÓN Liberación de las enzimas y de la cadena de ARN
  • 12. • Una vez que la elongación ha terminado, el ARNm debe ser procesado para convertirse en ARNm maduro y salir del núcleo. • Al lado 5’ se le agrega un 7- metilguanosina (adición cap) y al lado 3’ una cadena de poli-adeninas • Cap – ayuda en el transporte del núcleo al citoplasma; protege la punta 5’ de degradación; promueve la unión a ribosomas • Cadena poli-A – protege la punta 3’ de degradación (100 – 300 adeninas) (Alberts et al, 2008)
  • 13. • Splicing - la eliminación de intrones y la unión de exones • Spliceosoma – un conjunto de más de 200 proteínas que llevan a cabo el splicing clásico • Autosplicing – algunas moleculas de RNA tienen la capacidad de empalmarse por si mismo Grupo I Autosplicing Grupo II Autosplicing (Clancy, 2008)
  • 14. El empalme alternativo se refiere al proceso por el cual un gen dado se empalma en más de un tipo de molécula de mRNA dando lugar a múltiples proteínas a partir del mismo gen. (Clancy, 2008)
  • 15. BIBLIOGRAFÍA • Alberts B., A. Johnson, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts, P. Walter. 2008. Molecular Biology of The Cell, Fifth Edition. New York. Garland Science. • Campbell N. A., J. B. Reece, L. A. Urry, M. L. Cain, S. A. Wsserman, P. V. Minorsky, R. B. Jackson. 2008. Biology, Eighth Edition. New York. Pearson: Benjamin Cummings. • Clancy S. 2008. What’s the difference between mRNA and pre-mRNA? It’s all about splicing of introns. See how one RNA sequence can exist in nearly 40,000 different forms. Nature Education 1(1):31. • Gregory M. J. 2014. Gene Expression: Trancription and Translation. Recuperado el 23 de abril del 2014 de: http://faculty.clintoncc.suny.edu/faculty/michael.gregory/files/bio%2 0101/bio%20101%20lectures/Gene%20Expression/gene%20expressio n.htm • Petty Y. 2005. So, how is mRNA made? Recuperado el 23 de abril del 2014 de: http://www.dnatutorial.com/RNATranscription2.shtml