La bacteria B. ovis causa la epididimitis contagiosa del carnero. Se puede aislar de muestras de semen u otros tejidos y cultivar en medios selectivos. Presenta una estructura antigénica compleja que incluye proteínas de membrana externa e interna y lipopolisacáridos. Las pruebas serológicas como ELISA e inmunodifusión en gel son útiles para el diagnóstico, mientras que la respuesta inmune humoral a ciertos antígenos provee protección contra la infe

1. ASPECTOS INMUNOLÓGICOS EN EL
DIAGNOSTICO Y CONTROL DE LA
EPIDEMITIS CONTAGIOSA DEL CARNERO
POR B.OVIS
FAUSTO BLADIMIR PANTOJA
tatosfbpe@gmail.com

2.  B. ovis es un cocobacilo encapsulado, carece de pilis y
flagelos, es Gram negativo.
 Crece en medios sólidos como el Agar tripticasa soya o agar
Columbia, con suero equino,bovino,u ovino al 10% y en una
atm con 5-10% de CO2
 Para aislar muestras a partir de semen, de mucus o de
necropsias se utilizan medios de cultivo sólidos selectivos
como el Thayer Martin o el Agar Skirrow que permiten el
crecimiento de B.ovis inhibiendo la presencia de otros M.O
de la flora normal de vagina y prepucio.
MORFOLOGIA Y CARACTERISTICAS
CULTURALES

4.  Las colonias visibles después de una incubación de 3-5 días,
se aprecian pequeñas, circulares, opacas, granulares y con
tonalidades de blanco a marrón
 Puede observarse la morfología rugosa de B ovis por trans-
iluminación oblicua amarillas,aspecto seco, opaco y
granular
 confirmación acriflavina
 . Colorante que aglutina las colonias
 Otras pruebas que permiten identificar y/o aglutinar las
colonias de B ovis: tinción de colonias con el cristal violeta

6. ESTRUCTURA ANTIGENICA

7.  la estructura de la
Envoltura celular de las
bacterias gram negativas
presenta:
 1.-Membrana plasmática
interna
 2.- Espacio periplasmico: (P,
PG)
 3.- ME
 Estas envolturas se
distinguen por ser más
resistentes a la acción de
detergentes, proteólisis de
enzimas y digestión de
lisozima
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA

8.  MI: proteínas de membrana
interna
 E. periplasmico:P. solubles y
peptidoglucano.(PG)
 ME:LPS- rugoso y proteínas
de ME (epitopos)
 LPS: complejo-
lipido A, (restos)
Nucleo o core ( sacaridos de
glucosa, galactosa , manosa)
ANTIGENOS

9. ESTRUCTURA LIPOPOLISCARIDO (LPS)

10.  ME:
 PME mayores: 36-38 KDa--- o--
porinas—LPS
 PME: 25-27 KDa y 31-34 KDa--- PG
 proteina de 25-27 KDa ..
Conformación diferente se
distingue de otras Brucellas.
Las PME varian en las distintas
especies, en B.ovis, las de 25-27
KDa y 31-34 KDa son
predominantes…en vesículas
liberadas

11.  PME menores : 10 KDa,16.5
KDa 19 KDa 89 KDa 89-94 KDa
 Lipoproteina: 8 Kda---
determinantes antigenicos
comunes con la lpoproteina de
Braun.. E. coli.
 Espacio periplasmico….P 26
KDa caracterizada
 En citoplasma: P 18 KDa
especifica del genero Brucella.

12.  Pruebas serológicas
 Western blot… identificar antígenos individuales y su
inmunodominancia.
 Estudios (infección experimental y natural):
 Respuesta humoral LPS y PME (25-27 y 31-34 KDa)
 Epidídimo- orquitis… rta mas intensa a mas proteínas (+
estimulación Ag)
RESPUESTA INMUNITARIA HUMORAL Y
CELULAR

13.  OTROS ESTUDIOS
 5 Ag IMD (fases aguda y
crónica)…LPS,PME-17,19 y 29 KDa
proteína de estrés térmico (63 KDa).
Estudios Posteriores:
 suero de carnero infectado…western
blot:
 Ag contra PME,y P periplasmicas y
citoplasmáticas

14.  Raton ( rex inmune a B. ovis )
 Inyeccion Ac anti PMEs Y LPS previa… usado como protección
 PME menores y 34 KDa blancos inmunidad Humoral
 …opsonizacion… muerte intracelular de B.ovis .. Ac
 muerte extracelular= cel. NK

15.  B ovis es un Parasito Intracelular facultativo
 Capaz de sobrevir y multiplicarse en el interior de los
macrófagos
 Transferencia de suero, mejor que transferencia de células
sensibilizadas
 Suero anti B. abortus confirió mayor protección que células
inmunes para B. ovis
 Inmunidad humoral brinda mas protección que la celular

16. El diagnostico: examen clínico y su
confirmación mediante el aislamiento de
B.ovis en el semen y/o resultados + en
pruebas serológicas
Se debe tener en cuenta la situación
epidemiológica, datos reproductivos
(vacunaciones, antecedentes)
DIAGNOSTICO

17. Palpación del contenido escrotal
Se examina muestras de semen en m. óptico
(animalidades morfológicas y de motilidad)
Coloración de Giemsa: presencia de células
inflamatorias
Si Hay M.O sospechosos….muestra se incuba
a una Atm 5-10% Co2 y se examina durante
10 días
examen clínico

18. Fijación del complemento combinado con la
palpación escrotal… ideal en Australia y
Nueva Zelanda
Tº (1-4ºC)….rx positivas en etapas tempranas
pero la prueba es poco especifica a
diferencia de la aplicad a 37ºC
 muy compleja….reactivos…. Prozona
Menos sensible y especifica que la ELISA

20. ELISA , inmunodifusion en gel y fijación de
complemento utilizan como ag al extracto HS
obtenido a partir de la cepa B. ovis REO 198…
fácil obtención y es rico en Ag in.domiantes
Rx cruzada con B melitensis (áreas o animales
vacunados)

21. INMUNODIFUSION EN GEL…referencia en
América del sur, es sencilla, de bajo costo,
fácil de interpretar
ELIS…mas sensibilidad y especificidad que
las anteriores, procesa muestras de manera
simultanea.
Las mejores resultados se han obtenido por
combinación de inmunodifusion en gel y
ELISA.. Sensibilidad del 100%.

22. Otra alternativa: prueba alérgica
Usa como alérgeno a la brucelina del INRA
Detectar infección en un rebaño
Vigilancia epidemiológica, de rutina
Interferida por la infección con otras
especies de Brucella