El documento describe los objetivos y métodos para aislar y analizar hongos de diferentes fuentes. Los objetivos son demostrar la presencia y distribución de hongos, analizar su morfología y realizar su identificación y clasificación. Se detallan métodos para aislar hongos del aire, suelo y vegetales usando medios de cultivo como agar Sabouraud y agar Littman e incubación a temperatura ambiente. Finalmente se proporcionan referencias bibliográficas.

1. 1

2. OBJETIVOS.
1.
El alumno deberá demostrar la presencia y distribución de
los hongos.
2.
Se analizara la morfología de los hongos que se han
obtenido de diversas fuentes.
3.
Se realizara la identificación y clasificación de los hongos
aislados de los diferentes especímenes trabajados.

3. Son
organismos
eucariontes
Son
macroscópicos y
microscópicos
Su unidad
funcional es
la hifa
Son
heterótrofos
Se alientan
por
absorción
No son
fotosintéticas
Reproducci
ón sexual y
asexual
Tienen pared celular
compuesta por quitina,
celulosa, glucanas y
mananas
Pueden ser
unicelulares y
pluricelulares
3

4. CO2,glucosa,
sacarosa y maltosa,
sales de nitrógeno,
iones inorgánicos,
agua
Acidófilos
siendo el pH 5.6
óptimo para la
mayoría
60%
Nutrientes
Humedad
pH
CONDICIONES
DE
CRECIMIENTO
aw
Temperatura
Luz
La mayoría crecen
entre 0-55 con un
rango de 20-30
oportunistas y
patógenos 35-40
No es vital pero
es importante en
la esporulación
para algunos
Mayor 0.80
hongos
filamentosos y
mayor 0.85
para levaduras
4

5. De acuerdo a su nutrición pueden dividirse en
SAPROFITOS
Toman sus nutrientes de
la materia muerta o en
descomposición
MICORRIZICOS
Viven en simbiosis
con alguna especie
vegetal (normalmente
árboles), obteniendo
ambos un beneficio
mutuo.
PARASITOS
Cuando se nutren de
materia viva
5

6.  DIMORFISMO
FUNGICO:
Un hongo puede pasar de
una forma micelial a
levaduriforme
reversiblemente, pueden
ser:
A) Nutriente
dependientes.
B) Temperatura y
nutriente dependientes
Microbiologia general 2 Aislamiento de hongos de
diferentes fuentes Equipo: 3
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7.  HONGOS BIFÁSICOS
Se refiere aquellos hongos
que presentan dos formas,
una filamentosa y a
diferencia de los hongos
dimórficos , no presenta
fase levaduriforme sino de
otro tipo Por ejemplo:
Las esférulas de
Coccidioides immitis
7

8.  PLEOMORFISMO
FÚNGICO:
Consiste en la
transformación
irreversible de una cepa
por un exceso de
carbohidratos, está tiende
a cambiar dando un
micelio blanco,
algodonoso y estéril. Se
puede presentar en
cualquier hongo
filamentoso , pero es
propio de los dermatofitos.
8

9.  POLIMORFISMO
LESIONAL:
Es la capacidad de un agente
etiológico de generar diferentes
cuadros clínicos Por ejemplo:
La tiña del cuerpo o de la
cabeza puede ser producida
por un solo hongo: M. canis.
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10. Género
Suelo
Aire
Frutas
Rhizopus
Mucor
Alternaria
Botrytis
Fusarium
Pennicillium
Cladosporium
Aspergillus
Candida
Geotrichum
Trichoderma
Cephalosporium
Curvularia
10

11. Rhizopus sp.
Aspergillus sp.
Penicillium sp.
Trichoderma sp
Fusarium sp.
11

12. Alternaria alternata
Geotrichum candidum
12

13. 










Se deben estudiar las características siguientes:
Se observa si una colonia de hongos es filamentosa o levaduriforme.
Forma y tamaño
Color en la superficie o en el reverso.
Difusión del pigmento.
Coloración: blanca, rosada, gris ,anaranjada, verde, rojiza, negra.
Textura: yesosa, glabra, terrosa, granulosa, vellosa, cérea, cremosa.
Superficie: elevada o plana, levantamiento central.
Aspecto: plegado, radiado, cerebriforme, crateriforme.
Consistencia: dura, suave, firme, membranosa.
Rapidez de crecimiento: por ejemplo las levaduras y los oportunistas
crecen en 24 a 48 h, y los dermatofitos en 5 a 10 días.
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14. Macroscópicamente crecen
entre 3-6 días a temperaturas
de 25º y 37º, C 7-10 días las
colonias están cubiertas con
un micelio aéreo blanco,
velloso. A medida que la
colonia madura se observa
una superficie cubierta de
esporas negras. El reverso
de la colonia presenta un
color claro o verdoso.
Aspecto: plano, polvoso,
aterciopelado seco.

15.  Presenta micelios de crecimiento
rápido
 Anverso: tamaño ilimitado, ocupa
todo el medio de cultivo, color
verde con un halo blanquecino en
la periferia, plana, polvosa,
aterciopelada , rugosidades
radiales.

16.  Anverso: tamaño
ilimitado, color blanco
amarillento, vellosa
húmeda
 Reverso: no presenta
pigmento.

17. •Micelio aéreo bien desarrollado, denso, algodonoso. Gris-blanco al
comienzo se forma pronto marrón oscuro a rojo púrpura. Bordes
enteros. El reverso es rojo púrpura a negro.

18. Alternaria sp
Anverso:
tamaño
ilimitado, color negro
con tonalidades café
obscuro,
plana,
aterciopelada, seca y
en ocasiones lo cubre
un
velo
velloso
blanco.
Reverso:
presenta
pigmento
café
obscuro que difunde
al medio

19. Anverso:
tamaño
ilimitado, blanco en un
inicio,
posteriormente
naranja,
violeta-lila.
Aspecto: vellosa-seca
Reverso: presenta color
naranja o violeta difusible
al medio.

20. Mucor sp
Anverso:
tamaño
ilimitado, en un
inicio es blanco (2-3
días) después toma
una
tonalidad
blanco-grisáceo,
velloso-algodonoso
seco.
Reverso:
no
presenta pigmento.

21. Anverso:
tamaño
ilimitado, cubriendo la
superficie del agar con
un crecimiento denso
con , tiende a llenar los
tubos y cajas petri.
Color : en un inicio es
blanco
y
posteriormente
gris
obscuro.
Reverso: pigmento no
presente, vellosos aalgodonoso seco

22. •Aspecto
inconfundible:
vellosas,
algodonosas,
pulverulentas.
•De vistosos y variados
colores
•Crecen
radialmente
de
modo progresivo
•Colonias de mayor tamaño

23. Anverso: tamaño ilimitado, crece de dos a cuatro cm, color blanco
amarillento-cremosa, convexa y plegada.
Reverso: no presenta pigmento

24. Nutrientes básicos en medio de cultivo
 Materias nitrogenadas como peptona.
 Azucares como glucosa o maltosa.
 Un soporte solido como la gelosa.
 pH ácido (5 a 6).
 Vitaminas (impurezas de la peptona)

25. AGAR SABOURAUD
Composición:
*Peptona
10g
*Glucosa
20g
*Agar-Agar
20g
*Agua destilada 1000ml
pH 5.6 ± 0.2
AGAR PAPA DEXTROSA (PDA)
Composición:
*Pulpa de papa
250g
*Glucosa
20g
*Agar
20g
*Agua destilada
1000ml
pH final 5.6 +- 0.2.
USO:
Para cultivo de hongos
patógenos y no
patógenos,
particularmente
dermatofitos, levaduras y
m.o. acidúricos.
USO:
Para cultivo,
aislamiento y
determinación del
numero de hongos y
levaduras.

26. AGAR LITTMAN
Composición:
*Peptona,
*Estreptomicina
*Dextrosa,
*Cristal Violeta
*Agar
10.0g
15.0g
10.0g
0.01g
20.0g
AGAR BIGGY
*Sulfito de bismuto
*Dextrosa
*Extracto de levadura
*Glicina
*Agar
*Citrato de Amonio y Bismuto
pH 6.8 ± 0.2
 8,0g
 10,0g
 1,0g
 10,0g
 16,0g
 5,0g
USO:
Medio selectivo, que
suplementado con
estreptomicina, se
emplea para el
aislamiento primario y
cultivo de hongos,
especialmente
dermatofitos.
USO:
El Agar Biggy (por sus
siglas en inglés BismuthGlucose-Glycine-Yeast) es
utilizado para el
aislamiento y
diferenciación de especies
de Candida. También es
conocido como Agar de
Nickerson.

27. Micosel agar
-
Estreptomicina 0,5%
Peptona de soya.
Dextrosa.
Cloranfenicol
Agar agar
Agua destilada
Cicloheximida.
USOS: Selectivo para el aislamiento de hongos patógenos de muestras
que puedan tener alto contenido de flora bacteriana.

28. Aislamiento de Hongos del aire
Aislamiento de
hongos del aire
En una caja
petri con agar
Saboraud y otra
con agar Litman
Exponerlas
abiertas a la
corriente de aire
por 15 min.
Incubar a
temperatura
ambiente
Realizar
lectura,
reportar
características
macroscópicas

29. Aislamiento de Hongos del suelo
Aislamiento de
hongos en suelo
Pesar 0.5 g de
tierra y agregar a
un tubo 4.5mL
de la solución
salina estéril
Dil 1:10
Fundir Saboraud y
Littman
25º -30º se añaden 2
gts de la mezcla de
antibióticos.
PenicilinaStreptomicina 1:1
Añadir el
contenido
*
Diluciones
hasta alcanzar
10 -6
Realizar lectura,
reportar
características
macroscópicas
Incubar a
temperatura
ambiente
De las
diluciones del
paso ( * )
colocar 1 mL de
las diluciones
en dos cajas con
agar Saboraud y
dos con Littman

30. Diluciones realizadas para el
aislamiento micológico del suelo

31. Aislamiento de hongos de
verduras y frutos
En el centro de
la caja
Aislamiento de
Hongo de
verduras y
frutas
Colocar un poco
de tejido de la
verdura o fruta
que contenga el
hongo
Pasarlos unos
minutos por
hipoclorito
No realizar si el
hongo es de
aspecto polvoso
Sembrar en agar
Saboraud y
Littman
Incubar a
temperatura
ambiente
Realizar lectura,
reportar características
macroscópicas

32. BIBLIOGRAFÍA:
Bonifaz A. Micología médica básica. Edit. Méndez. 2a edición. México D.F.
1991.
Arenas, Roberto, Micología médica ilustrada, Edit. Interamericana McGrawHill. 1°edición, 1993
Microbiologia general 2 Aislamiento de hongos de
diferentes fuentes Equipo: 3
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