INMUNODIFUSION RADIAL COMO PRUEBA DIAGNOSTICA

1. INMUNODIFUSION
RADIAL
GRACE VANESSA PAJARO ROSANIA
ANGIE PAOLA SANDOVAL CIFUENTE
MARIA JOSE VIERA CONTRERAS

2. ANTECEDEN
TES
REACCIÓN ANTIGENO – ANTICUERPO (Ag-Ac)
TIPOS DE INTERACCIONES
 Entre más se complementan las configuraciones moleculares, más
uniones secundarias se forman entre el antígeno y el anticuerpo y por lo
tanto, es más difícil que el complejo sea alterado por fuerzas tales como la
agitación térmica.
Es una unión molecular entre el epitope (antígeno) y la región hipervariable del
anticuerpo, mediante interacciones no covalentes o secundarias
PUENTES DE
HIDROGENO
FUERZAS
IONICAS
FUERZAS DE
VAN DER WAALS
HIDROFOBICAS

3. TIPOS DE
REACCIONE
S
En la unión Ag – Ac ocurre en dos reacciones las cuales son utilizadas
principalmente en las pruebas serológicas
FORMACION DEL
COMPLEJO Ag-Ac
EVIDENCIA DE
ESOS COMPLEJOS
MEDIANTE LA
OBSERVACION DE
UN FENOMENO

4. FACTORES QUE
AFECTAN LA
FORMACION DE
INMUNOCOMPL
EJOS
TEMPERATURA
pH
FUERZA IONICA
Características propias del
Ac como la afinidad, la
avidez y la concentración
relativa de éstos en el
medio

5. INMUNODIFU
SION
Es una técnica que puede determinar cuantitativamente la concentración de un
antígeno. Es una técnica sensible que es usada clínicamente para detectar
niveles de proteínas plasmáticas o de anticuerpos como IgG, IgM e IgA que hay
en el suero de un individuo y también para determinar fracciones de C3 y C4
del complemento, entre otras.
RADIAL DOBLE

6. INMUNODIFU
SION RADIAL
los procedimientos basados en esta técnica son los más sencillos entre los
actualmente utilizados y su límite de detección es inferior a 100 mg/L.
1965 INTRODUCIDO POR MANCINI
Empleaba la difusión única para la medición de concentración de
antígenos

7. FUNDAMEN
TO DEL
METODO
• Existencia de una relación
cuantitativa entre la
concentración de Ag colocado
en un pocillo excavado en una
placa de agar, que contiene el
anticuerpo correspondiente, y el
halo de precipitación resultante.
• Requiere de 48 a 72 horas de
difusión.
La especificidad de la reacción
dependerá de la calidad y de
la mono especificidad del
antisuero utilizado en el gel.
• Desde el comienzo de la
difusión del antígeno se va
formando complejo Ag-Ac y
transcurrido el tiempo suficiente
se alcanza el punto final de
difusión que se denomina zona
de equivalencia.

8. PROCEDIMIE
NTO PRUEBA
DE
INMUNODIFU
SION RADIAL
.
Se trata de una reacción in vitro.
El agar noble es el gel utilizado para este cultivo, generalmente
este se prepara en cajas de PETRI de 100x15mm.

10.  La colocación de los controles varia en lugar y numero de acuerdo a la
enfermedad estudiada
 Las cajas de Petri con las muestras se incuban a 30°c en cámara húmeda, la
lectura inicial de la prueba se efectúa a las 24h y la lectura final a las 48h
 El área del anillo de la precipitación, medida por el cuadrado del diámetro del
anillo, es proporcional a la [ ] del Ag.

11. INCOVENIENT
ES DE LA
INMUNODIFU
SION RADIAL.  Es necesario que las concentraciones de Ag y Ac sean similares.
 Las moléculas más pequeñas migran con más rapidez que las de gran tamaño y
conforme la migración continúa el precipitado puede re disolverse y volverse a formar de
acuerdo con los cambios de concentración de Ag o Ac en el gel.
 Si hay grandes cantidades de Ac, el antígeno no se difunde muy lejos antes de alcanzar
la equivalencia y el anillo es más grueso o espeso.

12. ALTERACIÓN EN LA
CONCENTRACIÓN
DE ALGUNAS
PROTEÍNAS
SÉRICAS Y SU
RELACIÓN CON
ALGUNA
PATOLOGÍA.
cirrosis, infecciones crónicas, mieloma, fiebre, síndrome de
inmunodeficiencia adquirida, hígado graso, inflamación
hepatitis aguda, infecciones aguda, mieloma
enfermedades infecciosas crónicas, mieloma,
mononucleosis infecciosa, Kala-azar
tumores, bronquitis, dermatitis atópica La cuantificación
de IgE requiere de métodos de mayor sensibilidad debido
a su baja concentración

13. GRACIAS
POR SU
ATENCION