La replicación del ADN es el proceso por el cual una molécula de ADN se duplica para producir dos moléculas idénticas. Este proceso ocurre de forma semiconservativa, bidireccional y semidiscontinua mediante la acción coordinada de proteínas como la helicasa, topoisomerasas, ADN girasa y la ADN polimerasa. La ADN polimerasa sintetiza nuevas cadenas complementarias utilizando cada cadena original como molde en la dirección 5' a 3'.
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR por sus siglas en inglés Polymerase Chain Reaction) es, sin lugar a dudas, la técnica más importante y revolucionaria en biología molecular, debido a que permite obtener in vitro millones de copias de un fragmento de (ADN) a partir de una sola molécula.
Introducción
En el laboratorio existen muchas situaciones que pueden causar lesión al personal y perjudicar el edificio o la comunidad.
Las muestras de los pacientes, las agujas, las sustancias químicas, los equipos eléctricos, los reactivos y los elementos de vidrio son posibles causas de accidentes o lesiones.
Todos los laboratorios deben tener precauciones estándares que requieren todos los materiales y que se aplican a materiales infecciosos como sangre, semen, secreciones vaginales, líquido sinovial, cualquier líquido corporal con sangre.
Desarrollo
Algunas de las prácticas de seguridad aplicables requeridas por las normas OSHA son:
El lavado de manos con jabón y agua.
Está prohibido comer, fumar, beber, aplicarse labial en el área de trabajo.
Los alimentos y bebidas no deben estar en el mismo refrigerador que en donde se encuentran las muestras o reactivos del laboratorio.
Las agujas y otros objetos punzocortantes contaminados con sangre no deben manipularse de ningún modo.
Se debe proporcionar ropa y equipo protector al personal del laboratorio.
Las tareas de limpieza son que al finalizar el procedimiento y los pisos deben limpiarse con una solución desinfectante.
Si se usan chaquetas no descartables deben colocarse en recipientes apropiados hasta la sección de lavado en el laboratorio y no debe llevársela a casa.
El personal debe recibir una serie de vacunas contra HBV por si se produce una exposición accidental.
El personal debe capacitarse en epidemiología de debe conocer las enfermedades transmitidas por sangre, el uso del equipo protector, prácticas de trabajo, etc.
Las muestras provenientes del laboratorio se identifican como residuos regulados.
Conclusión
Es importante conocer las reglas y estar al tanto de lo que pasa dentro del laboratorio de hematología y asi prevenir accidentes y llevar a cabo un buen uso del material.
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR por sus siglas en inglés Polymerase Chain Reaction) es, sin lugar a dudas, la técnica más importante y revolucionaria en biología molecular, debido a que permite obtener in vitro millones de copias de un fragmento de (ADN) a partir de una sola molécula.
Introducción
En el laboratorio existen muchas situaciones que pueden causar lesión al personal y perjudicar el edificio o la comunidad.
Las muestras de los pacientes, las agujas, las sustancias químicas, los equipos eléctricos, los reactivos y los elementos de vidrio son posibles causas de accidentes o lesiones.
Todos los laboratorios deben tener precauciones estándares que requieren todos los materiales y que se aplican a materiales infecciosos como sangre, semen, secreciones vaginales, líquido sinovial, cualquier líquido corporal con sangre.
Desarrollo
Algunas de las prácticas de seguridad aplicables requeridas por las normas OSHA son:
El lavado de manos con jabón y agua.
Está prohibido comer, fumar, beber, aplicarse labial en el área de trabajo.
Los alimentos y bebidas no deben estar en el mismo refrigerador que en donde se encuentran las muestras o reactivos del laboratorio.
Las agujas y otros objetos punzocortantes contaminados con sangre no deben manipularse de ningún modo.
Se debe proporcionar ropa y equipo protector al personal del laboratorio.
Las tareas de limpieza son que al finalizar el procedimiento y los pisos deben limpiarse con una solución desinfectante.
Si se usan chaquetas no descartables deben colocarse en recipientes apropiados hasta la sección de lavado en el laboratorio y no debe llevársela a casa.
El personal debe recibir una serie de vacunas contra HBV por si se produce una exposición accidental.
El personal debe capacitarse en epidemiología de debe conocer las enfermedades transmitidas por sangre, el uso del equipo protector, prácticas de trabajo, etc.
Las muestras provenientes del laboratorio se identifican como residuos regulados.
Conclusión
Es importante conocer las reglas y estar al tanto de lo que pasa dentro del laboratorio de hematología y asi prevenir accidentes y llevar a cabo un buen uso del material.
Mediante la replicación, se obtienen dos copias idénticas a partir de una doble cadena
inicial de ADN. Francis Crick y James Watson (Watson, J. & Crick, F. 1953. A structure
for deoxyrribose nucleic acid. Nature 171: 737-738), al mismo tiempo que dedujeron la
estructura del ADN, propusieron un mecanismo para la replicación de esta molécula.
Teniendo en cuenta la importancia de la conservación de la secuencia de bases original,
consideraron posible que las dos cadenas de la doble hélice se separasen y cada una
sirviese de molde para la síntesis de otra complementaria.
Tema 43 Etapas en el proceso de la replicación: inicio , elongación , termina...Dian Alex Gonzalez
tema 43 Etapas en el proceso de la replicación: inicio (actividad de las proteínas involucradas topoisomeras, helicasas, proteína de unión a cadena sencilla y primasa), elongación (mecanismo de elongación en la cadena continua y en la discontinua, fragmentos de Okazaki), terminación, replicación de telómeros
3. DIRECCIÓN DE LA CADENA DE ADN
El extremo 5’- ( se pronuncia "cinco prima") designa el extremo de una hebra de
ADN o ARN que coincide con el grupo fosfato del quinto carbono de la respectiva
ribosa o desoxirribosa terminal.
El extremo 3’ de una hebra de ADN o ARN coincide con el grupo hidroxilo del
tercer carbono de la respectiva ribosa o desoxirribosa terminal
Replicación o Duplicación del ADN
4.
5. El dogma central de la biología
molecular afirma que el ADN
contiene las instrucciones para
crear proteínas, las que se
copian en el ARN. Luego el ARN
usa estas instrucciones para
crear una proteína. En resumen:
ADN → ARN → Proteína, o ADN
a ARN a Proteína.
8. MODELOS DE REPLICACION DEL ADN
La doble hélice
original permanece
intacta, formándose
una completamente
nueva
La molécula antigua
se rompe y las
nuevas moléculas se
construyen con
precursores viejos y
nuevos
Cada molécula
nueva de ADN está
formada por una
cadena nueva y
una antigua.
9. REPLICACION DEL ADN
• El proceso de replicación de ADN es el
mecanismo que permite al ADN
duplicarse (es decir, sintetizar una copia
idéntica).
• De esta manera de una molécula de ADN
única, se obtienen dos o más "réplicas"
de la primera.
• Esta duplicación del material genético se
produce de acuerdo con un
mecanismo semiconservativo.
10. CARACTERÍSTICAS REPLICACION DEL ADN
La duplicación o replicación del ADN se produce
según las siguientes normas:
1. Es semiconservativa
2. Es bidireccional
3. Presenta un punto de inicio, que es único en
procariontes y varios en organismos eucariontes.
4. Es semidiscontinua.
5. Avanza por adición de mononucleótidos en el
sentido 5’→ 3’
6. La iniciación requiere un extremo hidróxilo libre
proporcionado por un ARN cebador
11. 1. HELICASA: separan las dos hebras del ADN para que cada
una actúe de molde. Enzima que consume ATP.
2. TOPOISOMERASAS: relajan la tensión, desata nudos,
desenrollan
3. ADN GIRASA : desenrollan
4. PROTEINA SSB: mantiene separadas las hebras de ADN
5. ADN POLIMERASA: enzima capaz de sintetizar una
cadena nueva de ADN. Para que se active necesita:
a) 4 desoxinucleótidos.
b) Una cadena de ADN que sirva de molde o templado
c) Un extremo 3’ OH que sirva de iniciador.
La REPLICACION DEL ADN se lleva a cabo por una serie de proteínas que
actúan coordinadamente formando una compleja maquinaria celular. Las
enzimas más importantes son:
REPLISOMA
ENZIMAS DE LA REPLICACIÓN DEL ADN
14. La replicación es bidireccional, semiconservativa y semidiscontinua
PASOS REPLICACION DEL ADN
1.-Se separan las cadenas de nucleótidos, gracias a la ruptura de los
puentes de hidrógeno que unen las bases nitrogenadas de ambas
cadenas ( acción de enzima helicasa)
2.- Al separarse las cadenas, se forma la horquilla de replicación,
estructura en forma de “Y”, por la que se desplazan las enzimas que
catalizan la replicación del ADN.
15. 4.-Desde cada origen, la replicación avanza bidireccionalmente,
observándose una burbuja de replicación, que está formada por dos
horquillas que avanzan en direcciones opuestas.
PASOS REPLICACION DEL ADN
3.-El lugar donde se inicia la replicación se llama origen de la replicación.
Es una secuencia específica de nucleótidos a la que se unen las enzimas que
iniciarán el proceso. En el ADN de eucariontes, existen muchos orígenes de
replicación, mientras que en el de procariontes, hay solo uno.
16. La elongación de la nueva
cadena complementaria siempre
es en dirección 5’➝ 3’, ya que
solo en el extremo 3’-OH se
puede unir un nuevo nucleótido.
PASOS REPLICACION DEL ADN
5.-En la burbuja de replicación,
las enzimas específicas van
uniendo los nucleótidos
complementarios a las bases
nitrogenadas libres de la cadena
original.
17. PASOS REPLICACION DEL ADN
6.-Como las cadenas son antiparalelas, una vez formada la horquilla solo una de
ellas tiene su extremo 3’-OH libre ( hebra original) y su cadena complementaria
( hebra nueva) puede ser sintetizada sin interrupciones a medida que se abre la
horquilla; a esta se le llama hebra continua, adelantada o conductora.
A la cadena complementaria, de aquella hebra original que tiene 5’-P libre, se le
conoce como discontinua o retrasada porque se sintetiza produciendo
fragmentos cortos (fragmentos de Okazaki), que luego serán unidos por
enzimas. Es por esto que la replicación es semidiscontinua
18. PASOS REPLICACION DEL ADN
-Hebra vieja-Molde 3’-----------5’
-Hebra nueva líder 5’------------3’
o conductora
-Hebra vieja-Molde 5’-----------3’
-Hebra nueva retrasada 3’-----------5’
o discontinua
19. 9.- Cada molécula de ADN
resultante se convertirá en
una de las dos cromátidas
que formarán un cromosoma
durante la mitosis
PASOS REPLICACION DEL ADN
7.-Cuando las enzimas
encargadas de la replicación
llegan cerca de los extremos de
la cadena molde, se encuentran
con una secuencia de término,
que indica el final del proceso.
8.-Ahora, cada una de las moléculas de ADN resultantes contiene
una de las cadenas del ADN de origen y otra nueva, por eso se dice
que la replicación es semiconservativa.
35. El siguiente segmento de ADN codifica un segmento de un péptido:
5'-ATG-TTC-GCC-AAT-GTA-ACC-AAA-ACT-CCT-CGG-3'
3'-TAC-AAG-CGG-TTA-CAT-TGG-TTT-TGA-GGA-GCC-5'
a)La secuencia de bases se ha separado de tres en tres para facilitar el
ejercicio ¿Cuál será la secuencia de la hebra que se ha replicado utilizando
como molde la hebra 3' a 5'?
b) Dicha hebra ¿será la conductora o la retardada?
c) ¿Cómo se denomina el enzima encargado de su replicación?
d) La hebra retardada ¿utilizará uno o varios primer?
e)¿El primer es un fragmento de ADN o de ARN?
f) ¿Cómo se denomina también el primer?
36. a)La secuencia de bases se ha separado de tres en tres para facilitar el
ejercicio
¿Cuál será la secuencia de la hebra que se ha replicado utilizando
como molde la hebra 3' a 5'?
5'-ATG-TTC-GCC-AAT-GTA-ACC-AAA-ACT-CCT-CGG-3'
3'-TAC-AAG-CGG-TTA-CAT-TGG-TTT-TGA-GGA-GCC-5 MOLDE
Hebra
nueva
5'-ATG-TTC-GCC-AAT-GTA-ACC-AAA-ACT-CCT-CGG-3’
b)Dicha hebra ¿será la conductora o la retardada?
Como nos proporcionan la dirección de las hebras, podemos indicar
que la hebra nueva producida en dirección 5’ a 3’ es la conductora o
continua.
37. c) ¿Cómo se denomina el enzima encargado de su replicación?
La enzima encargada de la replicación es la ADN polimerasa (III)
d) La hebra retardada ¿utilizará uno o varios primer?
La hebra retardada al sintetizarse por fragmentos necesita varios primer
e)¿El primer eso un fragmento de ADN o de ARN?
Es un fragmento de ARN originado de la ADN primasa
f) ¿Cómo se denomina también el primer?
Se puede llamar cebador.