La PCR es un método rápido y sencillo para clonar ADN, pero tiene algunas limitaciones. Ofrece ventajas como rapidez, sensibilidad y resistencia, pero también tiene desventajas como la necesidad de conocer la secuencia del ADN objetivo, el tamaño corto de los productos y el riesgo de contaminación. La PCR se usa ampliamente en aplicaciones como la construcción de bibliotecas de ADNc, la secuenciación de ADN, investigaciones forenses y el diagnóstico médico.

1. Ventajas y desventajas
de la PCR como método
de clonación

2. Principales ventajas de la
reacción
Rapidez y sencillez de uso.
Sensibilidad.
Resistencia.

3. Principales desventajas de
la reacción.
 Necesidad de disponer información sobre la
secuencia del ADN diana
 Tamaño corto de los productos de la PCR
 Infidelidad en la replicación del ADN
 Peligro de contaminación

4. APLICACIONES DE LA
REACCIÓN EN CADENA
DE LA POLIMERASA
“PCR”

5. Construcc
ión de
biblioteca
s de ADNc

6. Secuenciación del ADN y
obtención de sondas para
hibridaciones

7. Investigaciones forenses

8. Marcadores polimórficos: Técnica
del oligonucleótido alelo-
específico (ASO)
Sistema Amplitype
para la detección de
alelos DQ alfa

10. CASO PRÁCTICO:
Tira de Nylon con los
halotipos HLA -DQ alfa
Sangre de la víctima:
1.1, 3
Pelo encontrado en la
víctima: 1.3, 4
Sangre del sospechoso I:
1.2, 4
Sangre del sospechoso II:
1.3, 4

11. Huella del ADN

12. Análisis de ADN en dos casos de agresión
sexual
a) Exclusión del
sospechoso
b) Identificación
del sospechoso

13. Sondas Unilocus

14. Análisis de la movilidad de los
fragmentos de restricción originados
en una región unilocus para
identificar los alelos paternos (P) y
maternos (M) de los cuatro hijos de un
matrimonio.

15. Determinación de la paternidad
entre dos posibles padres, P1 y P2
P1 P2
M

16. Diagnóstico Médico por
PCR