El documento describe las principales técnicas moleculares utilizadas en el diagnóstico de enfermedades micóticas, incluyendo PCR convencional, PCR anidada, PCR múltiplex, PCR in situ, AFLP, SSCP, secuenciación del genoma completo, qPCR, LAMP, RCA y NASBA. Cada técnica tiene ventajas y limitaciones respecto a su sensibilidad, especificidad, complejidad, costo y velocidad de obtención de resultados. La elección de la técnica depende de factores como la rapidez
Este documento describe Bordetella pertussis, la bacteria que causa la tos ferina. Detalla los síntomas clásicos de la enfermedad, incluida la fase catarral, paroxística y de convalecencia. Explica que el periodo de transmisibilidad se extiende desde el comienzo de la fase catarral hasta las dos semanas posteriores al inicio de la tos paroxística o hasta 5 días después del tratamiento antibiótico. También resume las medidas de control ante un caso confirmado o sospechoso, como el aislamiento,
Campylobacter jejuni y Campylobacter coli son bacterias patógenas humanas frecuentes que causan enteritis. Se transmiten principalmente a través de alimentos como pollo mal cocido y leche. Helicobacter pylori es una bacteria espiralada que infecta el estómago y se asocia con úlceras pépticas y cáncer gástrico. Ambos patógenos pueden causar diarrea y malestar general.
Este documento describe un examen serológico para detectar anticuerpos contra el parásito Toxoplasma gondii. El examen cuantifica los niveles de anticuerpos IgG mediante la técnica ELISA. Los resultados se utilizan para determinar si una persona está infectada o no con el parásito, lo que es importante para mujeres embarazadas y personas con VIH.
Este documento describe Bordetella pertussis, el agente causal de la tos ferina. Describe que es un microorganismo gramnegativo que se adhiere a las células respiratorias y libera toxinas que causan tos. También contiene información sobre su estructura, cultivo, manifestaciones clínicas, diagnóstico y tratamiento.
1. La familia Streptococcaceae incluye bacterias grampositivas, catalasa negativas que tienden a desarrollarse en cadenas como Streptococcus y Lactococcus.
2. Streptococcus pyogenes habita en la garganta y causa infecciones como fiebre escarlatina, pero también puede causar complicaciones como artritis y endocarditis.
3. S. pyogenes expresa varios factores de virulencia como la proteína M antifagocítica, toxinas hemolíticas y exotoxinas pirogénicas que causan
Microorganismos multiresistentes (marsa y acinetibacter baumannii)María Belén Chacón
Dos de los microorganismos causantes de enfermedad nosocomial que más preocupan en la actualidad por la complejidad que presentan para ser tratados con antimicrobianos por su multirresintencia.
Este documento resume información sobre los virus de la hepatitis B y D. La hepatitis B pertenece a la familia Hepadnaviridae y causa infección en el hígado humano. Tiene un genoma de ADN circular y se transmite a través de fluidos corporales. La hepatitis D requiere del virus de la hepatitis B para replicarse y también se transmite a través de fluidos corporales. Ambos virus pueden causar hepatitis aguda o crónica, y se diagnostican mediante pruebas serológicas e inmunológicas. No existe tratamiento para la hepatitis ag
El documento proporciona información sobre la amebiasis causada por la Entamoeba histolytica. Describe las características del parásito, incluida su morfología y ciclo de vida. Explica los mecanismos patogénicos, los cuadros clínicos de la infección intestinal y extraintestinal, el diagnóstico y el tratamiento. La amebiasis es una enfermedad común en regiones con saneamiento deficiente y puede causar diarrea, abscesos hepáticos y otras complicaciones graves.
Este documento describe Bordetella pertussis, la bacteria que causa la tos ferina. Detalla los síntomas clásicos de la enfermedad, incluida la fase catarral, paroxística y de convalecencia. Explica que el periodo de transmisibilidad se extiende desde el comienzo de la fase catarral hasta las dos semanas posteriores al inicio de la tos paroxística o hasta 5 días después del tratamiento antibiótico. También resume las medidas de control ante un caso confirmado o sospechoso, como el aislamiento,
Campylobacter jejuni y Campylobacter coli son bacterias patógenas humanas frecuentes que causan enteritis. Se transmiten principalmente a través de alimentos como pollo mal cocido y leche. Helicobacter pylori es una bacteria espiralada que infecta el estómago y se asocia con úlceras pépticas y cáncer gástrico. Ambos patógenos pueden causar diarrea y malestar general.
Este documento describe un examen serológico para detectar anticuerpos contra el parásito Toxoplasma gondii. El examen cuantifica los niveles de anticuerpos IgG mediante la técnica ELISA. Los resultados se utilizan para determinar si una persona está infectada o no con el parásito, lo que es importante para mujeres embarazadas y personas con VIH.
Este documento describe Bordetella pertussis, el agente causal de la tos ferina. Describe que es un microorganismo gramnegativo que se adhiere a las células respiratorias y libera toxinas que causan tos. También contiene información sobre su estructura, cultivo, manifestaciones clínicas, diagnóstico y tratamiento.
1. La familia Streptococcaceae incluye bacterias grampositivas, catalasa negativas que tienden a desarrollarse en cadenas como Streptococcus y Lactococcus.
2. Streptococcus pyogenes habita en la garganta y causa infecciones como fiebre escarlatina, pero también puede causar complicaciones como artritis y endocarditis.
3. S. pyogenes expresa varios factores de virulencia como la proteína M antifagocítica, toxinas hemolíticas y exotoxinas pirogénicas que causan
Microorganismos multiresistentes (marsa y acinetibacter baumannii)María Belén Chacón
Dos de los microorganismos causantes de enfermedad nosocomial que más preocupan en la actualidad por la complejidad que presentan para ser tratados con antimicrobianos por su multirresintencia.
Este documento resume información sobre los virus de la hepatitis B y D. La hepatitis B pertenece a la familia Hepadnaviridae y causa infección en el hígado humano. Tiene un genoma de ADN circular y se transmite a través de fluidos corporales. La hepatitis D requiere del virus de la hepatitis B para replicarse y también se transmite a través de fluidos corporales. Ambos virus pueden causar hepatitis aguda o crónica, y se diagnostican mediante pruebas serológicas e inmunológicas. No existe tratamiento para la hepatitis ag
El documento proporciona información sobre la amebiasis causada por la Entamoeba histolytica. Describe las características del parásito, incluida su morfología y ciclo de vida. Explica los mecanismos patogénicos, los cuadros clínicos de la infección intestinal y extraintestinal, el diagnóstico y el tratamiento. La amebiasis es una enfermedad común en regiones con saneamiento deficiente y puede causar diarrea, abscesos hepáticos y otras complicaciones graves.
Diapositivas Tema 12.2. GéNero Streptococcus. GéNero Enterococcusdarwin velez
El documento describe varias especies de bacterias del género Streptococcus y Enterococcus. Streptococcus y Enterococcus son cocos gram positivos que forman parte de la flora normal del tracto respiratorio y digestivo. Dentro del género Streptococcus se clasifican especies en base a la hemólisis que producen en medios con sangre (β-hemolíticos, α-hemolíticos, no hemolíticos) y su antígeno de grupo. Se describen características y cuadros clínicos de especies como S. pyogenes
Este documento presenta información sobre la Blastocistosis, un parásito unicelular llamado Blastocystis hominis que se encuentra en el intestino grueso humano. Describe su historia, morfología, ciclo de vida, epidemiología, síntomas clínicos, diagnóstico y tratamiento. La Blastocistosis puede causar diarrea aguda u otros síntomas gastrointestinales, aunque a veces es asintomática. Se diagnostica observando el parásito en muestras fecales mediante tinción, y se trata principalmente con medic
Este documento describe Yersinia pestis, el bacilo causante de la peste. Explica que Y. pestis es un bacilo gramnegativo que crece mejor a temperaturas por debajo de 37°C y describe sus principales factores de virulencia como la cápsula F1 y el sistema de secreción de tipo III. También resume los métodos de diagnóstico como cultivo, pruebas inmunológicas y moleculares para detectar Y. pestis en muestras clínicas de pacientes.
Este documento presenta las normas básicas de bioseguridad que deben seguirse en un laboratorio de inmunología para prevenir accidentes. Incluye reglas como usar ropa de protección como mandil, guantes y gafas, no comer ni beber en el laboratorio, esterilizar material que entra en contacto con muestras biológicas, y seguir protocolos para el manejo seguro de reactivos químicos y muestras potencialmente infecciosas.
Este documento trata sobre tres especies de protozoos flagelados del género Trichomonas: Trichomonas vaginalis, Trichomonas tenax y Trichomonas hominis. Trichomonas vaginalis es la causa más común de infección genital en mujeres y se caracteriza por producir abundante leucorrea. Trichomonas tenax es un comensal inocuo que vive en la boca del hombre en el sarro dental. Trichomonas hominis es un parásito del intestino grueso del hombre que se transmite a través de heces.
Campylobacter es una bacteria común que causa gastroenteritis y puede conducir a complicaciones más graves. Es más prevalente en países desarrollados y coloniza el intestino delgado, causando diarrea, dolor abdominal y fiebre. Algunas cepas pueden causar el síndrome de Guillain-Barré o afectar otros órganos como el hígado o el sistema nervioso central. Se diagnostica mediante el aislamiento de la bacteria en heces y la prevención incluye medidas de higiene y la cocción adecuada de alimentos
Este documento clasifica diferentes tipos de virus según su estructura, composición genética y familia. Describe las características de los virus de ADN como el virus vaccinia y el herpesvirus, así como varios virus de ARN como el virus de la influenza, el poliovirus y el coronavirus. Además, distingue entre virus de ARN simple y doble hebra y envueltos y no envueltos.
Este documento describe las características y clasificación de los estreptococos. Son cocos grampositivos que forman cadenas cortas y son anaerobios facultativos. Se clasifican en grupos según sus antígenos de superficie, y pueden causar infecciones supurativas como faringitis o no supurativas como fiebre reumática. Su patogenicidad se debe a su capacidad de adherirse a células y evadir el sistema inmune a través de toxinas y su cápsula.
Este documento describe los principales mecanismos de resistencia a antibióticos en bacterias, incluyendo alteraciones en el blanco del antibiótico, inactivación enzimática y disminución del acceso al blanco. También describe técnicas para detectar betalactamasas y carbapenemasas, así como el antibiograma para determinar la sensibilidad de microorganismos a antibióticos.
This document discusses genomic DNA libraries and cDNA libraries. It provides information on:
- Genomic DNA libraries contain DNA fragments representing an organism's entire genome, created using molecular cloning. cDNA libraries contain DNA copies of expressed genes from mRNA.
- The process of constructing a genomic library involves isolating genomic DNA, cutting it into fragments, inserting the fragments into vectors, and adding them to bacteria to form a library.
- cDNA libraries are constructed from mRNA. The process involves isolating mRNA, converting it to cDNA using reverse transcriptase, inserting the cDNA into vectors, and cloning the vectors into host cells.
Este documento presenta información sobre la paragonimiasis pulmonar causada por el trematodo Paragonimus. Describe las especies que afectan a los humanos, el ciclo de vida del parásito, la morfología de los parásitos adultos y huevos, la patología causada y los métodos de diagnóstico. La prevención requiere evitar el consumo de cangrejos de agua dulce crudos o mal cocidos en zonas endémicas.
Es una de las enfermedades mas importantes y recurrentes que son causantes de infecciones de transmisión sexual en el humano. La OMS calculó que para la última década se presentaron cerca de 98 millones de casos nuevos a nivel mundial, de los cuales cerca de 39 millones ocurrieron en hombres.
Corynebacterium diphtheriae es el agente causante de la difteria. Produce una potente exotoxina que causa daños severos en diversos órganos una vez que es transportada por la sangre desde el sitio primario de infección, generalmente la garganta. Aunque tanto las cepas toxigénicas como las no toxigénicas pueden causar enfermedad, solo las cepas productoras de toxina son responsables de las manifestaciones clínicas más habituales asociadas con esta enfermedad grave e incluso fatal. El descubrim
Este documento describe las características morfológicas de varios parásitos flagelados y ciliados que habitan en las cavidades corporales. Se proporcionan detalles sobre la forma, tamaño, número de núcleos y flagelos de parásitos como Giardia lamblia, Chilomastix mesnili, Balantidium coli, Pentatrichomonas hominis, Trichomonas vaginalis, Trichomonas tenax y Trichomonas foetus. El documento también describe técnicas para teñir muestras y observar estos
Yersinia pestis es la bacteria que causa la peste bubónica, pulmonar y septicémica. Fue descrita en 1894 por Yersin y Kitasato. Presenta factores de virulencia como las toxinas y antígenos V y W que le permiten evadir el sistema inmune. Las manifestaciones clínicas incluyen fiebre alta, escalofríos y formación de bubones. El diagnóstico se realiza mediante cultivos y la tinción de Wayson. Los antibióticos como la estreptomicina son efectivos para el tratamiento.
Tecnicas para el examen parasitologico de las hecesdegarden
Este documento proporciona instrucciones para la recolección y examen parasitológico de muestras de heces. Se recomienda recolectar heces blandas o pastosas sin purgante ni estreñimiento, y evitar mezclarlas con orina. El examen incluye observaciones macroscópicas y microscópicas con varios métodos como preparaciones directas, diluciones, coloraciones y enriquecimiento para identificar parásitos como protozoos y huevos. El objetivo es obtener una muestra adecuada y realizar un
El documento describe las características de Haemophilus influenzae, una bacteria gram-negativa que puede causar enfermedades como meningitis e infecciones respiratorias. Se detallan sus propiedades microbiológicas, antígenos, factores de patogenicidad, manifestaciones clínicas, diagnóstico, tratamiento y prevención mediante vacunas. También se mencionan otras especies de Haemophilus como H. ducreyi, agente causal del chancro blando.
Este documento proporciona información sobre diferentes técnicas de tinción utilizadas en histotecnología, incluidas la tinción PAS-diastasa, el Rojo Sirius para amiloide y el Cristal Violeta de Lieb para amiloide. Describe los procedimientos para cada técnica, que involucran desparafinar las láminas, teñirlas con diferentes soluciones y lavarlas. También explica que la tinción PAS-diastasa se usa para semicuantificar glucógeno y que el Rojo Sirius y el Cristal V
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S E G O
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G i n e c o l ó g i c o y M a m a r i o
CURSO DE ACTUALIZACIÓN DE PROTOCOLOS EN
CÁNCER GINECOLÓGICO Y MAMARIO
TÉCNICAS DE DETECCIÓN DE VPH. EFICACIA DEL DIAGNÓSTICO
MOLECULAR EN EL TRACTO GENITAL INFERIOR
Alfonso Alba Menéndez
INSTITUTO DE ESTUDIOS CELULARES Y MOLECULARES. LUGO
Diapositivas Tema 12.2. GéNero Streptococcus. GéNero Enterococcusdarwin velez
El documento describe varias especies de bacterias del género Streptococcus y Enterococcus. Streptococcus y Enterococcus son cocos gram positivos que forman parte de la flora normal del tracto respiratorio y digestivo. Dentro del género Streptococcus se clasifican especies en base a la hemólisis que producen en medios con sangre (β-hemolíticos, α-hemolíticos, no hemolíticos) y su antígeno de grupo. Se describen características y cuadros clínicos de especies como S. pyogenes
Este documento presenta información sobre la Blastocistosis, un parásito unicelular llamado Blastocystis hominis que se encuentra en el intestino grueso humano. Describe su historia, morfología, ciclo de vida, epidemiología, síntomas clínicos, diagnóstico y tratamiento. La Blastocistosis puede causar diarrea aguda u otros síntomas gastrointestinales, aunque a veces es asintomática. Se diagnostica observando el parásito en muestras fecales mediante tinción, y se trata principalmente con medic
Este documento describe Yersinia pestis, el bacilo causante de la peste. Explica que Y. pestis es un bacilo gramnegativo que crece mejor a temperaturas por debajo de 37°C y describe sus principales factores de virulencia como la cápsula F1 y el sistema de secreción de tipo III. También resume los métodos de diagnóstico como cultivo, pruebas inmunológicas y moleculares para detectar Y. pestis en muestras clínicas de pacientes.
Este documento presenta las normas básicas de bioseguridad que deben seguirse en un laboratorio de inmunología para prevenir accidentes. Incluye reglas como usar ropa de protección como mandil, guantes y gafas, no comer ni beber en el laboratorio, esterilizar material que entra en contacto con muestras biológicas, y seguir protocolos para el manejo seguro de reactivos químicos y muestras potencialmente infecciosas.
Este documento trata sobre tres especies de protozoos flagelados del género Trichomonas: Trichomonas vaginalis, Trichomonas tenax y Trichomonas hominis. Trichomonas vaginalis es la causa más común de infección genital en mujeres y se caracteriza por producir abundante leucorrea. Trichomonas tenax es un comensal inocuo que vive en la boca del hombre en el sarro dental. Trichomonas hominis es un parásito del intestino grueso del hombre que se transmite a través de heces.
Campylobacter es una bacteria común que causa gastroenteritis y puede conducir a complicaciones más graves. Es más prevalente en países desarrollados y coloniza el intestino delgado, causando diarrea, dolor abdominal y fiebre. Algunas cepas pueden causar el síndrome de Guillain-Barré o afectar otros órganos como el hígado o el sistema nervioso central. Se diagnostica mediante el aislamiento de la bacteria en heces y la prevención incluye medidas de higiene y la cocción adecuada de alimentos
Este documento clasifica diferentes tipos de virus según su estructura, composición genética y familia. Describe las características de los virus de ADN como el virus vaccinia y el herpesvirus, así como varios virus de ARN como el virus de la influenza, el poliovirus y el coronavirus. Además, distingue entre virus de ARN simple y doble hebra y envueltos y no envueltos.
Este documento describe las características y clasificación de los estreptococos. Son cocos grampositivos que forman cadenas cortas y son anaerobios facultativos. Se clasifican en grupos según sus antígenos de superficie, y pueden causar infecciones supurativas como faringitis o no supurativas como fiebre reumática. Su patogenicidad se debe a su capacidad de adherirse a células y evadir el sistema inmune a través de toxinas y su cápsula.
Este documento describe los principales mecanismos de resistencia a antibióticos en bacterias, incluyendo alteraciones en el blanco del antibiótico, inactivación enzimática y disminución del acceso al blanco. También describe técnicas para detectar betalactamasas y carbapenemasas, así como el antibiograma para determinar la sensibilidad de microorganismos a antibióticos.
This document discusses genomic DNA libraries and cDNA libraries. It provides information on:
- Genomic DNA libraries contain DNA fragments representing an organism's entire genome, created using molecular cloning. cDNA libraries contain DNA copies of expressed genes from mRNA.
- The process of constructing a genomic library involves isolating genomic DNA, cutting it into fragments, inserting the fragments into vectors, and adding them to bacteria to form a library.
- cDNA libraries are constructed from mRNA. The process involves isolating mRNA, converting it to cDNA using reverse transcriptase, inserting the cDNA into vectors, and cloning the vectors into host cells.
Este documento presenta información sobre la paragonimiasis pulmonar causada por el trematodo Paragonimus. Describe las especies que afectan a los humanos, el ciclo de vida del parásito, la morfología de los parásitos adultos y huevos, la patología causada y los métodos de diagnóstico. La prevención requiere evitar el consumo de cangrejos de agua dulce crudos o mal cocidos en zonas endémicas.
Es una de las enfermedades mas importantes y recurrentes que son causantes de infecciones de transmisión sexual en el humano. La OMS calculó que para la última década se presentaron cerca de 98 millones de casos nuevos a nivel mundial, de los cuales cerca de 39 millones ocurrieron en hombres.
Corynebacterium diphtheriae es el agente causante de la difteria. Produce una potente exotoxina que causa daños severos en diversos órganos una vez que es transportada por la sangre desde el sitio primario de infección, generalmente la garganta. Aunque tanto las cepas toxigénicas como las no toxigénicas pueden causar enfermedad, solo las cepas productoras de toxina son responsables de las manifestaciones clínicas más habituales asociadas con esta enfermedad grave e incluso fatal. El descubrim
Este documento describe las características morfológicas de varios parásitos flagelados y ciliados que habitan en las cavidades corporales. Se proporcionan detalles sobre la forma, tamaño, número de núcleos y flagelos de parásitos como Giardia lamblia, Chilomastix mesnili, Balantidium coli, Pentatrichomonas hominis, Trichomonas vaginalis, Trichomonas tenax y Trichomonas foetus. El documento también describe técnicas para teñir muestras y observar estos
Yersinia pestis es la bacteria que causa la peste bubónica, pulmonar y septicémica. Fue descrita en 1894 por Yersin y Kitasato. Presenta factores de virulencia como las toxinas y antígenos V y W que le permiten evadir el sistema inmune. Las manifestaciones clínicas incluyen fiebre alta, escalofríos y formación de bubones. El diagnóstico se realiza mediante cultivos y la tinción de Wayson. Los antibióticos como la estreptomicina son efectivos para el tratamiento.
Tecnicas para el examen parasitologico de las hecesdegarden
Este documento proporciona instrucciones para la recolección y examen parasitológico de muestras de heces. Se recomienda recolectar heces blandas o pastosas sin purgante ni estreñimiento, y evitar mezclarlas con orina. El examen incluye observaciones macroscópicas y microscópicas con varios métodos como preparaciones directas, diluciones, coloraciones y enriquecimiento para identificar parásitos como protozoos y huevos. El objetivo es obtener una muestra adecuada y realizar un
El documento describe las características de Haemophilus influenzae, una bacteria gram-negativa que puede causar enfermedades como meningitis e infecciones respiratorias. Se detallan sus propiedades microbiológicas, antígenos, factores de patogenicidad, manifestaciones clínicas, diagnóstico, tratamiento y prevención mediante vacunas. También se mencionan otras especies de Haemophilus como H. ducreyi, agente causal del chancro blando.
Este documento proporciona información sobre diferentes técnicas de tinción utilizadas en histotecnología, incluidas la tinción PAS-diastasa, el Rojo Sirius para amiloide y el Cristal Violeta de Lieb para amiloide. Describe los procedimientos para cada técnica, que involucran desparafinar las láminas, teñirlas con diferentes soluciones y lavarlas. También explica que la tinción PAS-diastasa se usa para semicuantificar glucógeno y que el Rojo Sirius y el Cristal V
S E G O X X R e u n i ó n d e l a S e c c i ó n d e P re v e n c i ó n d e l ...Alberto Cuadrado
S E G O
X X R e u n i ó n d e l a S e c c i ó n d e P re v e n c i ó n d e l C á n c e r
G i n e c o l ó g i c o y M a m a r i o
CURSO DE ACTUALIZACIÓN DE PROTOCOLOS EN
CÁNCER GINECOLÓGICO Y MAMARIO
TÉCNICAS DE DETECCIÓN DE VPH. EFICACIA DEL DIAGNÓSTICO
MOLECULAR EN EL TRACTO GENITAL INFERIOR
Alfonso Alba Menéndez
INSTITUTO DE ESTUDIOS CELULARES Y MOLECULARES. LUGO
Este documento describe varios métodos modernos de diagnóstico de enfermedades de plantas. Explica que la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es uno de los métodos moleculares más efectivos, permitiendo detectar patógenos incluso cuando no muestran síntomas. También describe pruebas serológicas como ELISA e inmunocaptura. El documento concluye que si bien las técnicas moleculares son las más usadas, las pruebas serológicas son suficientes para la mayoría de patógenos excepto viro
La tecnología de chips microfluídicos, conocida como "lab-on-a-chip", permite recrear procesos bioquímicos a escala microscópica utilizando canales y reservorios en dispositivos. Tiene utilidad para la detección de bacterias y virus patógenos mediante pequeñas muestras con aplicaciones en el control de seguridad alimentaria, monitoreo ambiental y diagnóstico clínico.
El documento describe la técnica de PCR cuantitativa (qPCR), incluyendo sus fundamentos, materiales, etapas y aplicaciones. La qPCR permite cuantificar ADN además de detectarlo y amplificarlo mediante el uso de fluorocromos y un termociclador que mide la fluorescencia después de cada ciclo. Esta técnica se utiliza comúnmente para detección de patógenos, análisis genético y detección de mutaciones.
Diagnostico Molecular Enf 2 Qca Clin Esp Nov PdfCESI-DESAN
Este documento presenta información sobre el diagnóstico molecular de enfermedades. Brevemente describe tres puntos clave: 1) El diagnóstico molecular actualmente detecta la presencia del ADN de patógenos directamente de muestras clínicas sin necesidad de cultivo; 2) Las técnicas que utilizan ADN tienen ventajas sobre las proteínas como la capacidad de autoreplicación; 3) Los polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) son marcadores útiles que se analizan fácilmente con técnicas de
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una técnica que permite la rápida replicación del ADN y la amplificación de cantidades mínimas de material genético millones de veces en pocas horas, lo que permite la detección de marcadores genéticos. La PCR consiste en ciclos repetidos de desnaturalización, alineación y extensión a diferentes temperaturas que duplican la cantidad de ADN en cada ciclo. Esta técnica se utiliza comúnmente para la detección de virus, bacterias y la investigación genética.
El documento describe las técnicas moleculares utilizadas para analizar ácidos nucleicos y detectar microorganismos y variaciones genéticas. Explica técnicas como la extracción de ADN, PCR, qPCR, RT-PCR, secuenciación del genoma y microarrays. La PCR se usa para amplificar regiones específicas de ADN utilizando cebadores, mientras que la qPCR y dPCR permiten cuantificar el ADN inicial. La secuenciación del genoma determina el orden completo de las bases en el genoma.
En esta presentación se exponen las técnicas aplicadas para el aislamiento, purificación y cuantificación de ácidos nucleicos previos a su utilización para la aplicación de técnicas de diagnóstico molecular. Se exponen también los fundamentos y las principales caracteristicas de cada técnica.
La qPCR es una técnica que permite detectar y cuantificar ADN de forma cuantitativa y en tiempo real mediante el uso de reporteros fluorescentes. Se utiliza para detectar granulovirus en diferentes muestras como larvas, suelo y bioplaguicidas con el objetivo de desarrollar bioplaguicidas para el control biológico de plagas agrícolas. La metodología consiste en diseñar cebadores específicos para el gen de la granulina altamente conservado en granulovirus y utilizar una sonda Taqman para la
El documento describe la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), incluyendo que fue creada en 1985 por Kary Mullis, su objetivo de amplificar segmentos específicos de ADN, y su uso vital de la enzima polimerasa. También resume algunas de sus aplicaciones como la clonación de ADN, el diagnóstico de enfermedades hereditarias y infecciosas, y pruebas de paternidad; y destaca sus características de gran especificidad, sensibilidad y capacidad de obtener grandes cantidades de copias de ADN en
Este documento describe los métodos de amplificación de ácidos nucleicos, en particular la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Explica las etapas de la PCR, incluida la preparación de los reactivos, los ciclos térmicos de desnaturalización, alineamiento y extensión, y los métodos posteriores como la electroforesis. Finalmente, destaca las ventajas de la PCR para aplicaciones como el diagnóstico molecular, la ingeniería genética y la medicina legal.
Este documento describe las técnicas de hibridación del ADN y sus aplicaciones. Explica el proceso de desnaturalización del ADN mediante calor o químicos para separar las hebras de ADN, y la posterior hibridación cuando se vuelven a unir las hebras complementarias. También define las sondas de ADN y describe técnicas como Southern blot, Northern blot e hibridación in situ. Finalmente, destaca las ventajas de las técnicas moleculares como la especificidad, sensibilidad y rapidez para la detección
El documento describe la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y sus aplicaciones. Explica que la PCR permite amplificar una región específica de ADN para su evaluación, lo que tiene valor debido a sus usos en diversos campos como la biología molecular, biotecnología y diagnóstico médico. También discute los parámetros importantes a considerar en el diseño de una reacción de PCR como la secuencia de los cebadores utilizados.
Este documento describe la simulación de electroforesis en gel de agarosa utilizando el programa SnapGene con datos de un artículo científico sobre el aislamiento de bacterias con potencial biorremediador. El objetivo general fue realizar la simulación, mientras que los objetivos específicos fueron analizar las secuencias de 13 bandas de nucleótidos y identificar el gel de agarosa. La metodología incluyó descargar las secuencias del NCBI, abrir SnapGene, simular el gel de agarosa al 1% y visualizar el comportamiento de los 13
Este documento describe diferentes técnicas de marcadores de determinación directa de ADN como la extracción y cuantificación de ADN, enzimas de restricción, PCR, secuenciación y micromatrices. También describe varios tipos de polimorfismos como RFLPs, VNTRs, SNPs, ADN mitocondrial y cromosoma Y que pueden ser analizados usando estas técnicas.
La PCR es una técnica que permite amplificar un fragmento de ADN específico. Utiliza cebadores y la enzima ADN polimerasa para replicar el ADN molde en ciclos repetidos de calentamiento y enfriamiento. Esto genera millones de copias del fragmento de ADN deseado que pueden ser detectadas y analizadas. La PCR tiene muchas aplicaciones en investigación científica y diagnóstico clínico.
Este documento describe la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Explica que la PCR permite amplificar fragmentos de ADN para identificar gérmenes. Detalla los pasos y reactivos de la PCR, incluyendo la extracción de ADN, separación de cadenas, unión de cebadores y replicación. También cubre los usos de la PCR en medicina como diagnóstico de enfermedades infecciosas y genéticas.
Este documento describe la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Explica que la PCR permite amplificar fragmentos de ADN para identificar gérmenes. Detalla los pasos y reactivos de la PCR, incluyendo la extracción de ADN, separación de cadenas, unión de cebadores y replicación del ADN. También cubre los usos de la PCR en medicina como herramienta de diagnóstico para detección de enfermedades genéticas e infecciosas.
Similar a Diagnostico molecular en micologia.pdf (20)
La medicina tradicional
Ñn´anncue Ñomndaa es el saber-conocimiento de mayor trascendencia en la vida de
quienes integran las comunidades amuzgas, vinculadas por cómo la
población se relaciona con el mundo donde vive .Es un elemento integrador de conductas,
saberes y prácticas sociales, simbólicas y
psicológicas en la que se puede apreciar su interrelación para resolver y afrontar los
problemas emocionales, espirituales y de
salud (equilibrio del cuerpo, la mente y el
espíritu).
Desde esta perspectiva de salud/enfermedad
SABEDORAS y SABEDORES
atienden diferentes enfermedades (malestares que están dentro y
fuera del cuerpo), entre ellas: el espanto, el empacho, el antojo o motolin, y el
coraje. La incidencia en la curación de acuerdo a los Ñonmdaa
depende de algunos elementos centrales: A la experiencia del Sabedor y al carácter
territorial.
En esta presentación encontrarán información detallada sobre cómo realizar correctamente la maniobra de Heimlich y también información sobre lo que es la asfixia.
EL CÁNCER, ¿QUÉ ES?, TIPOS, ESTADÍSTICAS, CONCLUSIONESMariemejia3
El cáncer es una enfermedad caracterizada por el crecimiento descontrolado de células anormales en el cuerpo. Puede afectar a cualquier parte del organismo y su tratamiento varía según el tipo y la etapa de la enfermedad. Los factores de riesgo incluyen la genética, el estilo de vida y la exposición a ciertos agentes carcinógenos. Aunque el cáncer sigue siendo una de las principales causas de morbilidad y mortalidad en el mundo, los avances en la detección temprana y el tratamiento han mejorado las tasas de supervivencia. La investigación continúa en busca de nuevas terapias y métodos de prevención. La concienciación sobre el cáncer es fundamental para promover estilos de vida saludables y fomentar la detección precoz.
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1. MASTER EN ANÁLISIS CLÍNICOS (CEMP) FECHA:20/03/2023
TRABAJO: Actividad Final de Módulo 8 ALUMNO: Jesús González Pérez Salazar
MICOLOGÍA: Fundamentos, utilidad y limitaciones de las técnicas de diagnóstico molecular de las enfermedades micóticas.
Antecedentes
Las células micóticas son eucariotas, con membrana nuclear y organelos celulares propios de este
tipo de células. Las hay unicelulares como las levaduras o pluricelulares como los mohos cuyas hifas
forman micelios. Algunas especies de hongos son dimórficos, que en función de las condiciones
ambientales pueden adoptar características de levadura o de hongo filamentoso. Su genoma de
ADN es de tamaño muy variable, así como variables son sus estructuras reproductivas.
Se distinguen de otros eucariotas por la presencia de una pared celular rígida, que en su mayoría
está formada por quitina, glucano y en algunas especies por manano y porque su membrana celular
contiene ergosterol como principal lípido esteroideo.
Se conocen más de 90,000 especies de hongos, aunque menos de 200 se han identificado como
patógenas para humanos. Las características anteriormente descritas son herramientas útiles para
su identificación, tanto microscópica, como bioquímica y de cultivo, pero pueden ser insuficientes
para identificar más allá del género.
El tiempo de identificación de los hongos es otro factor a considerar. Algunas cepas son de
crecimiento rápido, pero la mayoría requiere de tiempos de cultivo medianamente prolongados.
Todo lo anterior, lleva a la necesidad de mejorar y acelerar las técnicas diagnósticas utilizando
metodologías modernas de diagnóstico molecular (Ryan K., 2017)
A continuación se analizan las principales técnicas moleculares y su utilidad en micología.
2. Metodología
y descripción
Utilidad en
micología
Ventajas Desventajas o limitaciones Diagrama del procedimiento
PCR
Convencional
o de punto
final
Identificación de
ADN libre en sangre
de Aspergillus spp y
confirmación de
cepas de cultivo de
Alternaria, Fusarium
y Trchosporon
Metodología de complejidad
moderada, aunque muy
estandarizada y de relativamente
fácil implementación, cuyos costos
han disminuido con el tiempo.
Proceso razonablemente rápido y
sensible.
Requiere instrumental sofisticado. los
especímenes a estudiar para patologías
fúngicas, suelen tener muy poco DNA,
disminuyendo su sensibilidad diagnóstica
y la técnica es muy sensible a la
contaminación.
PCR anidada
Implica dos
rondas de
amplificación
Para identificación
de S. schenckii,
especies de Candida
y Cryptococcus
La 2a amplificación utiliza
cebadores más específicos que
incrementan sensibilidad y
especificidad.
Toma más tiempo que la PCR
convencional y requiere equipamiento y
reactivos costosos.
PCR
múltiplex Pcr
de punto
final para
identificar
múltiples
objetivos
moleculares
Identificación de
Aspergillus ssp,
Rhizopus ssp y en la
identificación y
diferenciación de
aalgunas especies
de Candida
Técnica que permite la detección e
identificación simultánea de genes
de distintos agentes etiológicos de
interés, lo que ahorra tiempo y
dinero.
Especificidad y sensibilidad más baja que
la PCR convencional. Las longitudes de
los amplicones deben ser
suficientemente diferentes para que las
bandas sean distinguibles. La secuencia
del procedimiento y los cebadores deben
ser adecuados para que los amplicones y
su concentración sean los correctos. La
identificación suele limitarse al género.
PCR in situ
FISH / CISH
Hibridación
de sondas
específicas de
ADN con
revelado
cromógeno o
fluorescente
Identificación de
Aspergillus spp en
muestras de tejido
así como en la
identificación de
especies de
Fusarium y
Scedosporium
Es una potente herramienta para
localizar objetivos de ácidos
nucleicos específicos en células y
tejidos previamente fijados y que
pueden ser de diversas especies.
Los resultados se obtienen en
corto tiempo porque se practica
sobre la muestra directa.
Hay que tener precaución para evitar
contaminación cruzada con el
instrumental y espacios donde se
procesan las muestras histológicas.
También se debe tener precaución con el
tiempo de fijación de los tejidos con
formol. La fijación del tejido puede
producir ruptura del ADN, que impediría
su amplificación. Técnica que requiere
personal especializado.
3. Metodología
y descripción
Utilidad en
micología
Ventajas Desventajas o limitaciones Diagrama del procedimiento
AFLP PCR ADN
Amplificación
de poli-
morfismos de
longitud de
fragmentos
Para realizar
análisis
filogenético y
comparación de
fingerprints de
genómas fúngicos
en epidemiología
Técnica de fingerprinting, muy
específica para el análisis de la
variación genética
Se utiliza equipo costoso y personal
altamente especializado. Requiere
grandes cantidades de ADN. Sensible a la
concentración de Mg. Laborioso proceso
de hibridación. Los resultados toman
tiempo porque implica elaborar una PCR
y análisis de resultados por electroforesis
SSCP PCR ADN
Amplificación
de poli-
morfismos de
conformación
de cadena
simple
Para identificar
especies y
resistencias a
antifúngicos de los
complejos de A.
fumigatus y
S. apiospermum
Técnica de fingerprinting, muy
específica para el rastreo de
mutaciones puntuales
Se utiliza equipo costoso y personal
altamente especializado. Requiere
grandes cantidades de ADN. Sensible a la
concentración de Mg. Laborioso proceso
de hibridación. Los resultados toman
tiempo porque implica elaborar una PCR
y análisis de resultados por electroforesis
WGS
Secuenciació
n completa
del genoma
En identificación de
especies de hongos
relacionados a la
enfermedad de
Crohn
Es una metodología con mucho
potencial diagnóstico, muy
sensible y específica. Útil para
estudios epidemiológicos de las
enfermedades micóticas
Técnica costosa y compleja. Por el tiempo
de obtención de resultados es un
método aún inviable para el laboratorio
de micología, tanto para el servicio de
emergencias como el de rutina
qPCR o
RT-PCR
Reacción en
cadena de la
polimerasa
cuantitativa,
en tiempo
real
Cuantificación de
ADN de
Aspergillus spp en
Aspergilosis
invasiva y en la
identificación de
algunas especies
del género Candida
Técnica cuantitativa, con alta
especificidad y sensibilidad
analíticas por los amplios rangos
dinámicos de límite de detección.
Es menos susceptible a inhibidores
como el formol utilizado para fijar
tejidos y los resultados se obtienen
más rápido que con las pruebas
PCR panfúngicas de punto final,
que suelen requerir técnicas de
revelado adicional
La presencia de mutaciones en las
regiones de los cebadores y sondas,
pueden derivar en resultados falsos
negativos en la identificación del
patógeno. Requiere equipo complejo y
personal altamente especializado
4. Metodología
y descripción
Utilidad en
micología
Ventajas Desventajas o limitaciones Diagrama del procedimiento
LAMP
Amplificación
isotérmica
mediada por
bucle
Se empieza a usar
para identificación
de Aspergillus en
humanos. La amplia
experiencia en el
diagnóstico fúngico
en el ámbito
fitosanitario, puede
extrapolarse al
“Point of care”
Tiene mayor sensibilidad y
especificidad que la PCR
convencional, por el uso de más
pares de cebadores. Los resultados
se obtienen en menor tiempo
porque no se requiere
desnaturalizar el ADN. Utiliza
equipo simple de bajo costo, que
puede ser portátil. La lectura
puede hacerse visualmente
El diseño de los cebadores es mucho más
complejo y requiere análisis y programa
informático especializado. La polimerasa
utilizada no es tan temoestable y se
puede inactivar con pequeñas
variaciones de temperatura. No es 100 %
eficiente y puede presentar ruido de
fondo. Técnica menos conocida que
compite con la PCR convencional y RT-
PCR que tienen mucha aceptación
RCA
Amplificación
isotérmica en
círculo
rodante
Se ha utilizado con
éxito en la
identificación de
especies de hongos
Mucorales Rhizopus,
Rhizomucor y
Mucor y de generos
Cryptococcus y
Exophiala
Por la polimerasa utilizada, permite
una gran amplificación del objetivo
y es resistente a contaminantes.
Los resultados se obtienen en
menor tiempo porque no se
requiere desnaturalizar el ADN.
Utiliza equipo simple de bajo costo,
que puede ser portátil. La lectura
puede hacerse visualmente
No es 100 % eficiente y puede presentar
ruido de fondo por la aparición de
productos inespecíficos, probablemente
por cebado falso en sitios donde se
forman dímeros del cebador. Técnica
menos conocida que compite con la PCR
convencional y RT-PCR que tienen mucha
aceptación.
NASBA
Amplificación
isotérmica
basada en
secuencia de
ácidos
nucleicos
Su utilización se ha
concentrado en
estudios
bacteriológicos,
pero su potencial es
alto para análisis
genómicos
Permite la amplificación de ARN, lo
que incrementa su sensibilidad, por
la ubicuidad de este ácido nucleico.
Los resultados se obtienen en
menor tiempo. Utiliza equipo
simple de bajo costo, que puede
ser portátil. La lectura puede
hacerse visualmente
Técnica mas costosa por requerir tres
enzimas diferentes. Susceptible a falsos
positivos que requerirían métodos de
comprobación adicional. Técnica menos
conocida que compite con la PCR
convencional y RT-PCR que tienen mucha
aceptación
(Jiménez-Moraleda B., et al., 2021; Refojo N, 2021; Unda F., Agüero J., Fariñas M.C., Martínez-Martínez L., 2011; Ryan K., 2017)
5. Conclusión
La elección de la técnica dependerá de factores como la rapidez, la complejidad, la capacidad de discriminación, la reproducibilidad, el
coste de la metodología y la facilidad de la interpretación de resultados, que puedan ser cuantitativos y sin necesidad de
procesamiento posterior. Se debe tener en consideración la sensibilidad, que permita el análisis de muestras de procedencia diversa,
ya sea de cultivo puro o directamente de la lesión, de muestras líquidas o de tejido sólido, con células vivas o inviables, con o sin
tratamiento previo. La mayoría de las técnicas moleculares panfúngicas se basan en la amplificación e identificación de las secuencias
de ADNr, región repetitiva que codifica para los ARN ribosomales, comprendida por los genes 18s, 5.8s y 28s y los ITS 1 y 2 (18s-ITS1-
5.8s-ITS2-28s). La secuenciación del ITS2 no permite identificar todas las especies ya que es un gen pequeño de escasa variabilidad,
por lo que muchas veces sólo permite la identificación a nivel de género, sección o complejo. Refojo (2021), reporta algunas
reacciones cruzadas en técnicas panfúngicas y de qPCR entre los géneros Candida, Purpureocillium, Curvularia y Exophiala.
Para el desarrollo de nuevas técnicas de diagnóstico molecular, hay otras características a considerar como el grado de especialización
requerido del personal, la sofisticación del equipo, su capacidad o volumen de análisis, el espacio e instalaciones necesarias y su
mantenimiento. Si el equipo es costoso, para que sea rentable deberá ser versátil y escalable para poder analizar otro tipo de
muestras y detectar amplio número de microorganismos. Las plataformas diagnósticas deben ofrecer posibilidad de identificar las
especies fúngicas, independientemente de si se encuentran en fase levaduriforme o filamentosa y poder demostrar la robustez del
método para conseguir las acreditaciones de los organismos reguladores internacionales (Wickes B., Wiederhold N.P., 2018).
Referencias bibliográficas
• Jiménez-Moraleda B., et al. (agosto 3, 2021). Diagnóstico y tipos de PCR. Revisión bibliográfica. Recuperado el 15 de marzo de 2023 de:
https://revistasanitariadeinvestigacion.com/diagnostico-y-tipos-de-pcr-revision-bibliografica/
• Refojo N., (2021). Diagnóstico molecular de la enfermedad fúngica invasora causada por hongos oportunistas. [Tesis de doctorado]. Universidad de Buenos Aires. Recuperado el 15 de
marzo de 2023 de: https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n6833_Refojo.pdf
• Ryan K., et al., (2017). Hongos. Conceptos básicos. Access Medicina. (Ed.). En Sherris, Microbiología Médica (6ª Ed., pp 1-10). McGraw Hill Medical.
https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookId=2169§ionId=162985092#1143537556
• Unda F., Agüero J., Fariñas M.C., Martínez-Martínez L., (febrero 20, 2011). Identificación de hongos de importancia clínica mediante técnicas moleculares. Recuperado el 10 de marzo de
2023 de: https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-identificacion-hongos-importancia-clinica-mediante-S0213005X10005045
• Wickes B., Wiederhold N.P., (diciembre, 2018). Molecular diagnostics in medical mycology. Nat Commun. 3;9 (1):5135. Recuperado el 10 de marzo de 2023 de:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6277409/pdf/41467_2018_Article_7556.pdf