El corpúsculo de Barr es una estructura condensada visible en el núcleo de las células de las hembras que representa un cromosoma X inactivo. Mary Lyon sugirió en 1999 que el corpúsculo de Barr representa el cromosoma X enrollado de manera compacta en las hembras. La inactivación del cromosoma X ocurre al azar en cada célula durante el desarrollo fetal temprano, determinando qué cromosoma X permanecerá inactivo.
3.1 Fundamento de la tinción de Feulgen.
La tinción de Feulgen es una técnica de tinción descubierta por Robert Feulgen y usada en histología para teñir selectivamente el material cromosómico o ADN en células. Depende de la hidrólisis ácida del ADN.
Esta técnica consiste en la hidrolización del DNA mediante una dilución débil de ácido clorhídrico que libera las bases púricas, quedando libres los radicales aldehídos de las pentosas, y en la coloración con leucofuscina, que pone de manifiesto los grupos aldehído.
El fundamento de este método se basa en la identificación altamente específica de ácidos nucleicos del ADN a partir del reconocimiento de los grupos aldehídos de la pentosa (azúcar). Para esto se realizan 2 pasos fundamentales:
1) Hidrólisis ácida:
Se utiliza para romper los puentes de hidrogeno que unen a la doble hélice, mediante la desnaturalización de la cadena. Para esto se utiliza ácido clorhídrico (HCl), que es el componente reactivo más crítico del método, controlando la concentración del ácido, temperatura y tiempo, que depende del tipo de tejido (compactación de cromatina) y fijador empleado.
Durante la hidrólisis ácida suave la mayor parte del RNA se divide en sustancias solubles y se pierde del tejido, sin ser removidos los grupos ribosil debido a la presencia de un grupo hidroxilo en la posición 2' de la ribosa, por lo que, este material no reacción posteriormente con el reactivo de Schiff. Mientras tanto el DNA es parcialmente hidrolizado siendo removidas y liberadas las bases púricas (A y G) de los residuos de deoxiribosa (depurinización) formando ácido apurínico y generando grupos aldehído (CHO) en el C1 de la pentosa, donde se encontraba unida la base nitrogenada.
Este es un paso crítico por lo que hay que tener en cuenta las variables de tiempo de exposición a la hidrólisis acida, pH ([ H+]) al que se lleve a cabo la reacción, temperatura, el fijador utilizado en el tejido y el grado de compactación de la cromatina que depende de la naturaleza del tejido.
2) Tinción con Reactivo de Schiff:
Los grupos aldehídos liberados por la hidrólisis de Feulgen son teñidos con reactivo de Schiff. Cualquier grupo aldehído libre endógeno y preexistente producido por el fijador (ej. glutaraldehído), tejido elástico inmaduro o algunos lípidos son removidos tratando el tejido con boro hidrato de sodio antes de ser teñido. (Ortiz, 2019)
3.2 Describir y explicar la Técnica completa.
Opcionalmente, la muestra se puede contrateñir con Light Green SF amarillento. Finalmente, se deshidrata con etanol, se aclara con xileno y se monta en un medio resinoso. (Perez)
3.3 Características de las muestras que podemos teñir con esta técnica.
Solamente el método de Feulgen puede considerarse estequiométrico en donde es posible observar una intensidad de coloración proporcional a la concentración de DNA, por lo que es posible determinar cuantitativamente el DNA presente en el núcleo de las células, lo que se aplica en patología
3.1 Fundamento de la tinción de Feulgen.
La tinción de Feulgen es una técnica de tinción descubierta por Robert Feulgen y usada en histología para teñir selectivamente el material cromosómico o ADN en células. Depende de la hidrólisis ácida del ADN.
Esta técnica consiste en la hidrolización del DNA mediante una dilución débil de ácido clorhídrico que libera las bases púricas, quedando libres los radicales aldehídos de las pentosas, y en la coloración con leucofuscina, que pone de manifiesto los grupos aldehído.
El fundamento de este método se basa en la identificación altamente específica de ácidos nucleicos del ADN a partir del reconocimiento de los grupos aldehídos de la pentosa (azúcar). Para esto se realizan 2 pasos fundamentales:
1) Hidrólisis ácida:
Se utiliza para romper los puentes de hidrogeno que unen a la doble hélice, mediante la desnaturalización de la cadena. Para esto se utiliza ácido clorhídrico (HCl), que es el componente reactivo más crítico del método, controlando la concentración del ácido, temperatura y tiempo, que depende del tipo de tejido (compactación de cromatina) y fijador empleado.
Durante la hidrólisis ácida suave la mayor parte del RNA se divide en sustancias solubles y se pierde del tejido, sin ser removidos los grupos ribosil debido a la presencia de un grupo hidroxilo en la posición 2' de la ribosa, por lo que, este material no reacción posteriormente con el reactivo de Schiff. Mientras tanto el DNA es parcialmente hidrolizado siendo removidas y liberadas las bases púricas (A y G) de los residuos de deoxiribosa (depurinización) formando ácido apurínico y generando grupos aldehído (CHO) en el C1 de la pentosa, donde se encontraba unida la base nitrogenada.
Este es un paso crítico por lo que hay que tener en cuenta las variables de tiempo de exposición a la hidrólisis acida, pH ([ H+]) al que se lleve a cabo la reacción, temperatura, el fijador utilizado en el tejido y el grado de compactación de la cromatina que depende de la naturaleza del tejido.
2) Tinción con Reactivo de Schiff:
Los grupos aldehídos liberados por la hidrólisis de Feulgen son teñidos con reactivo de Schiff. Cualquier grupo aldehído libre endógeno y preexistente producido por el fijador (ej. glutaraldehído), tejido elástico inmaduro o algunos lípidos son removidos tratando el tejido con boro hidrato de sodio antes de ser teñido. (Ortiz, 2019)
3.2 Describir y explicar la Técnica completa.
Opcionalmente, la muestra se puede contrateñir con Light Green SF amarillento. Finalmente, se deshidrata con etanol, se aclara con xileno y se monta en un medio resinoso. (Perez)
3.3 Características de las muestras que podemos teñir con esta técnica.
Solamente el método de Feulgen puede considerarse estequiométrico en donde es posible observar una intensidad de coloración proporcional a la concentración de DNA, por lo que es posible determinar cuantitativamente el DNA presente en el núcleo de las células, lo que se aplica en patología
Hoja de trabajo sobre análisis de pedigrí, Los alumnos deben enfrentarse a 4 pedigríes, los cuales deben ser analizados para responder a algunas preguntas. Luego deberán construir un pedigrí familiar donde deberán trazar un carácter genético asignado por su profesor. Finamente, realizan la actividad PDI investigador, basado en Genetic Learning Center, de la University of Utah
Los Cromosomas, concepto, partes, clasificación, determinación cromosómica del sexo,Homocigoto, heterocigoto, herencia ligada al sexo, cariotipo y sus alteraciones.
Un libro sin recetas, para la maestra y el maestro Fase 3.pdfsandradianelly
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Today is Pentecost. Who is it that is here in front of you? (Wang Omma.) Jesus Christ and the substantial Holy Spirit, the only Begotten Daughter, Wang Omma, are both here. I am here because of Jesus's hope. Having no recourse but to go to the cross, he promised to return. Christianity began with the apostles, with their resurrection through the Holy Spirit at Pentecost.
Hoy es Pentecostés. ¿Quién es el que está aquí frente a vosotros? (Wang Omma.) Jesucristo y el Espíritu Santo sustancial, la única Hija Unigénita, Wang Omma, están ambos aquí. Estoy aquí por la esperanza de Jesús. No teniendo más remedio que ir a la cruz, prometió regresar. El cristianismo comenzó con los apóstoles, con su resurrección por medio del Espíritu Santo en Pentecostés.
2. Historia y primeras evidencias
M. Barr y E. Bertram observaron por primera vez en el núcleo un corpúsculo
condensado distinto del nucléolo y se dieron cuenta de que las gatas
normales poseen un único corpúsculo condensado mientras que los gatos
no muestran ninguno. Estos investigadores se refirieron a este corpúsculo
como cromatina sexual y desde entonces se ha denominado corpúsculo
de Barr. En 1999, Mary Lyon sugirió que este corpúsculo de Barr
representaba un cromosoma X inactivo el cual se enrolla en las hembras
de manera compacta, tomando la estructura conocida como
heterocromatina, una forma condensada y por tanto visible de la
cromatina. Investigaciones recientes al microscopio revelan que los
extremos del corpúsculo de Barr están en estrecha proximidad, formando
un anillo.
3. CORPÚSCULO DE BARR
Varias evidencias apoyan la
hipótesis de Lyon. Primero, los
varones XXY poseen un
corpúsculo de Barr mientras
que las mujeres X0 no
presentan ninguno. Segundo,
las personas con un número
anormal de cromosomas X
tienen un corpúsculo de Barr
menos que cromosomas X
poseen por célula: las
mujeres XXX presentan 2
corpúsculos de Barr y las XXXX
presentan tres.
4.
5. HIPOTESIS DE LYON
La prueba directa de la hipótesis de Lyon
se produjo cuando, en mujeres
normales,los citólogos identificaron el
corpúsculo de Barr como el cromosoma
X. las hembras heterocigóticas para un
locus del cromosoma X muestran un
patrón peculiar de expresión fenotípica.
Se sabe ahora que en los seres humanos
el cromosoma X es inactivado en cada
célula alrededor del decimosegundo día
de vida fetal y además el azar determina
qué cromosoma X se inactiva en cada
célula. A partir de este momento, el
mismo cromosoma X permanece como
un corpúsculo de Barr para futuras
generaciones celulares. En lugar de ser
hembras típicamente heterocigotas, son
hemicigotas en cada célula para uno u
otro de los alelos del cromosoma X.
6. INACTIVACION DEL CROMOSOMA X
Dentro de este proceso juega un papel fundamental el centro de inactivación de X (XIC),
ya que es el punto donde comienza. Además existen dos tipos de inactivación del
cromosoma X: al azar o por imprinting. Aunque ambas formas utilicen los mismos ARNs y
enzimas silenciadoras, se diferencian en tiempo de aparición y mecanismo de acción.
7. Inactivación del cromosoma X con
imprinting:
el cromosoma X de origen paterno se inactiva de forma preferencial
en las células de la placenta de los mamíferos eutherian y en las
células de mamíferos marsupiales.
8. Inactivación del cromosoma X al azar
Ocurre tempranamente en el embrión de hembra, en el que
los dos cromosomas X, de origen materno o paterno , tienen
la misma posibilidad de ser inactivados.
Cada célula femenina tiene la tarea difícil de distinguir entre
dos Cromosomas X dentro del mismo núcleo, y designar un
Cromosoma X como activo y el otro como X inactivo.
Este proceso complejo es logrado por separado en cada
célula, en gran parte por XIST Y TSIX.
Parece que cada célula cuenta, en primer lugar, su número
de Cromosomas X, entonces al azar escoge un X para
permanecer activo, y, finalmente, silencia el futuro X inactivo
