UNIVERSIDAD DE CUENCA 
FACULTAD DE CIENCIAS 
MÉDICAS 
PRIMER CICLO – GRUPO Nº 7 
BIOQUIMICA- PRACTICA 
DOSIFICACIÓN DE LÍPIDOS 
TOTALES, COLESTEROL, 
TRIGLICÉRIDOS Y 
LIPOPROTEÍNAS 
Doménica Ortega 
Christian Ochoa
OBJETIVOS 
Conocer el metabolismo de los lípidos y su camino 
en el organismo. 
Identificar lipoproteínas beneficiosas y 
perjudiciales para el organismo. 
Conocer las alteraciones que se presentan en el 
metabolismo de los lípidos. 
Aprender sobre la aterosclerosis, y las 
dislipidemias.
LOS LÍPIDOS 
Biomoléculas 
Orgánicas 
Hidrófobos
TRIGLICÉRIDOS 
-COLESTEROL 
-COLESTERIL 
-ÉSTERES 
-FOSFOLÍPIDOS 
-ÁCIDOS 
GRASOS NO 
ESTERIFICDOS.
DIGESTIÓN Y ABSORCIÓN 
DE LÍPIDOS
 Su digestión empieza en el 
estómago: 
 - Lipasa lingual 
 - Lipasa gástrica 
 20-30% de triglicéridos (TAG) a 
monoglicéridos y ácidos grasos.
Intestino delgado 
- Ácidos biliares 
(emulsión) 
- Lipasa 
pancreática 
Absorbidos por 
enterocitos 
(micelas)
AG de cadena corta viajan en plasma 
unidos a albúmina 
Todos los AG de cadena larga absorbidos su vuelven 
TAG antes de pasar al s. linfático como quilomicrones 
99% lípidos 
1% proteínas
Lipoproteinlipasa (LPL) metaboliza quilomicrones 
hidrolizando los TAG, liberando ácidos grasos: 
- lípidos tisulares 
- se oxidan como combustible 
Los remanentes de quilomicrones van a ser 
reciclados en el hígado, para formar las VLDL.
LIPOPROTEÍNAS
 En el hígado son sintetizadas las VLDL, que transportan TAG 
desde este órgano hacia los tejidos extrahepáticos, donde 
son hidrolizados por la LPL, originando las IDL, las cuales 
regresan al hígado donde la enzima triglicérido lipasa 
hepática las transforma en LDL. 
 Las LDL son ricas en colesterol y circulan mucho más tiempo 
en el plasma, hacia los tejidos periféricos (de ahí su potencial 
aterogénico).
 Las HDL transportan colesterol en sentido inverso: desde los tejidos 
periféricos hasta el hígado; único órgano capaz de excretarlo por la 
vía biliar.
Colesterol 
Es un esterol (lípido) que se encuentra en los 
tejidos corporales y en el plasma 
sanguíneo de los vertebrados. 
- No se puede metabolizar por lo que se 
elimina a través de la bilis 
- 98% se reabsorbe en íleon terminal 
- 2% se excreta en las heces
DOSIFICACIÓN 
DE 
TRIGLICÉRIDOS
REACTIVOS 
•1 muestra de suero 
(desconocido) 
• Kit de dosificación 
(estándar y reactivo 
de trabajo) 
MATERIALES 
• 3 tubos de ensayo 
• 1 gradilla 
• 1 pinza de madera 
• 3 cubetas para 
espectrofotómetro 
• 1 pipeta 
automática de 10 ul 
• 2 puntas blancas 
• 1 pipeta de 1 ml 
• 1 pera de caucho 
EQUIPOS 
• Espectrofotóm 
etro 
• Termostato
DOSIFICACIÓN DE 
TRIGLICÉRIDOS 
TRIGLICÉRIDOS 
LPL 
GLICEROL 
AC. 
GRASOS 
GLICEROL ATP 
Glicerol Kinasa 
ADP 
GLICEROL 
1-P 
GLICEROL 
1-P 
O2 
GPO 
H2O2 
DIHIDROXI 
ACETONAFOSFATO 
2 H2O2 4-AF 
POD QUINONIMINA 
ROJA
PROCEDIMIENTO 
1. Colocar los tubos de ensayo en la 
gradilla y rotularlos 
A= Blanco B=Estándar C= 
Desconocido 
2. Tomar 10 ul de estándar y colocar 
en el tubo B. 
3. Cambiar de punta; tomar 10 ul de 
desconocido y colocar en el tubo C. 
4. Colocar 1 ml de reactivo e color en 
cada tubo (A, B,C)
5. Incubar en el termostato los tres 
tubos a 37º C, durante 5 min. 
6. Trasvasar el contenido de los tubos en 
cubetas para espectrofotómetro, y 
rotularlas. 
7. Leer en el espectrofotómetro a 
505 nm.
INTERPRETACIÓN 
 Para conocer la concentración de 
triglicéridos en el suero desconocido, 
aplicamos una regla de tres: 
푋 = 
퐴푏푠. 푀푢푒푠푡푟푎 ∗ 퐶표푛푐. 푆푢푠푡푟푎푡표 
퐴푏푠. 푆푢푠푡푟푎푡표
 0,310 Absorbancia (Conocido). 
 0,243 Absorbancia (Desconocido). 
 200 mg/dl Constante. 
TENEMOS: 
200 mg/dl 0,310 
X 0,243 
0,243 × 200 
푚푔 
푑푙 
0,310 
= 156,77 푚푔/푑푙 
CONCENTRACIÓN DEL DESCONOCIDO: 156,77 mg/dl
VALORES NORMALES 
• <1,5 g/l 
• 44 – 158 mg/dl 
• 0,50-1,67 mmol/l 
Deseable 
• 1,55 – 1,99 g/l 
Moderada 
mente elevado 
Elevado • 2,0 – 4,99 g/l 
Muy elevado • >5,0 g/l
DOSIFICACIÓN 
DE 
COLESTEROL
REACTIVOS 
•1 muestra de suero 
(desconocido) 
• Kit de dosificación 
(estándar y reactivo 
de trabajo) 
MATERIALES 
• 3 tubos de ensayo 
• 1 gradilla 
• 1 pinza de madera 
• 3 cubetas para 
espectrofotómetro 
• 1 pipeta 
automática de 20 ul 
• 2 puntas amarillas 
• 1 pipeta de 2 ml 
• 1 pera de caucho 
EQUIPOS 
• Espectrofotóm 
etro 
• Termostato
DOSIFICACIÓN DE COLESTEROL 
Esteres de 
colesterol 
Lipasa 
Colesterol 
AC. 
GRASOS 
Colesterol O2 
CHOD 
H2O2 
Colesten 
3-ona 
4-AF Fenol 
POD 
Quinona 
H2O2 Coloreada 
H2O
PROCEDIMIENTO 
1. Colocar los tubos de ensayo en la 
gradilla y rotularlos 
A= Blanco B=Estándar C= Desconocido 
2. Tomar 20 ul de estándar y colocar en 
el tubo B. 
3. Cambiar de punta; tomar 20 ul de 
desconocido y colocar en el tubo C. 
4. Colocar 2 ml de reactivo e color en 
cada tubo (A, B,C)
5. Incubar en el termostato los tres 
tubos a 37º C, durante 15 min. 
6. Trasvasar el contenido de los tubos en 
cubetas para espectrofotómetro, y 
rotularlas. 
7. Leer en el espectrofotómetro a 
505 nm.
INTERPRETACIÓN 
 Para conocer la concentración de 
triglicéridos en el suero desconocido, 
aplicamos una regla de tres: 
푋 = 
퐴푏푠. 푀푢푒푠푡푟푎 ∗ 퐶표푛푐. 푆푢푠푡푟푎푡표 
퐴푏푠. 푆푢푠푡푟푎푡표
VALORES NORMALES 
• <2,0 g/l 
• 44 – 158 mg/dl 
• 0,50-1,67 mmol/l 
Deseable 
• 2,0 – 2,39 g/l 
Moderada 
mente alto 
Elevado • >2,4 g/l
DISLIPIDEMIA 
TIPO ANOMALÍA PERFIL LIPÍDICO 
Hipercolesterolemia 
familiar 
Defecto en la codificación 
de los receptores para las 
LDL 
Hipercolesterolemia o 
hiperlipemia mixta 
Hipercolesterolemia 
familiar combinada 
Defecto en la secreción 
hepática de las VLDL 
Perfil cambiante 
(hipercolesterolemia, 
hipertrigliceridemia y mixto) 
Disbetalipoproteinemia 
familiar 
Alteración de la ApoE que 
impide la metabolización 
de VLDL y quilomicrones 
Hipercolesterolemia e 
hipertrigliceridemia 
Hipercolesterolemia 
poligénica 
Interacciones de numerosos 
genes – ambiente (p.ej: 
alimentación) 
Colesterol moderadamente 
elevado 
Hipertrigliceridemia 
familiar 
Mayor secreción de 
triglicéridos (más VLDL y de 
mayor tamaño). Defectos 
en la LPL 
Aumento de las VLDL 
Disminución de las HDL y LDL 
Sitosterolemia o 
fitosterolemia 
Defectos en ABC G5/G8 
Aumento de la absorción de 
sitosteroles y colesterol 
dietético. Altos niveles de 
esteroles (de origen vegetal y 
animal) en el plasma.
PERFIL LIPÍDICO 
Colesterol total (mg/dL) 
Deseable 
< 200 
Límite alto 
200 – 239 
Elevado 
> 240 
LDL (mg/dL) 
Óptimo < 
100 
Cercano a 
lo óptimo 
100 – 129 
Límite alto 
130 – 159 
Elevado* 
160 – 189 
Muy 
elevado* 
> 190
Triglicéridos (mg/dL) 
Normal 
< 150 
Límite alto 
150 – 199 
Elevado2 
00 – 499 
Muy 
elevado 
> 500 
HDL (mg/dL) 
Bajo* 
< 40 
Elevado 
> 60
ATEROSCLEROSIS 
Enfermedad 
de arterias 
Se da el depósito de placas de ateroma, a 
nivel de la pared vascular, provocando el 
estrechamiento u occlusion completa de la luz 
arterial. 
Clínicamente puede causar infarto agudo del 
miocardio, accidente cerebro vascular o 
enfermedad perférica.
GRACIAS

Dosificación de lipidos

  • 1.
    UNIVERSIDAD DE CUENCA FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS PRIMER CICLO – GRUPO Nº 7 BIOQUIMICA- PRACTICA DOSIFICACIÓN DE LÍPIDOS TOTALES, COLESTEROL, TRIGLICÉRIDOS Y LIPOPROTEÍNAS Doménica Ortega Christian Ochoa
  • 2.
    OBJETIVOS Conocer elmetabolismo de los lípidos y su camino en el organismo. Identificar lipoproteínas beneficiosas y perjudiciales para el organismo. Conocer las alteraciones que se presentan en el metabolismo de los lípidos. Aprender sobre la aterosclerosis, y las dislipidemias.
  • 3.
    LOS LÍPIDOS Biomoléculas Orgánicas Hidrófobos
  • 4.
    TRIGLICÉRIDOS -COLESTEROL -COLESTERIL -ÉSTERES -FOSFOLÍPIDOS -ÁCIDOS GRASOS NO ESTERIFICDOS.
  • 5.
  • 6.
     Su digestiónempieza en el estómago:  - Lipasa lingual  - Lipasa gástrica  20-30% de triglicéridos (TAG) a monoglicéridos y ácidos grasos.
  • 7.
    Intestino delgado -Ácidos biliares (emulsión) - Lipasa pancreática Absorbidos por enterocitos (micelas)
  • 8.
    AG de cadenacorta viajan en plasma unidos a albúmina Todos los AG de cadena larga absorbidos su vuelven TAG antes de pasar al s. linfático como quilomicrones 99% lípidos 1% proteínas
  • 10.
    Lipoproteinlipasa (LPL) metabolizaquilomicrones hidrolizando los TAG, liberando ácidos grasos: - lípidos tisulares - se oxidan como combustible Los remanentes de quilomicrones van a ser reciclados en el hígado, para formar las VLDL.
  • 11.
  • 13.
     En elhígado son sintetizadas las VLDL, que transportan TAG desde este órgano hacia los tejidos extrahepáticos, donde son hidrolizados por la LPL, originando las IDL, las cuales regresan al hígado donde la enzima triglicérido lipasa hepática las transforma en LDL.  Las LDL son ricas en colesterol y circulan mucho más tiempo en el plasma, hacia los tejidos periféricos (de ahí su potencial aterogénico).
  • 15.
     Las HDLtransportan colesterol en sentido inverso: desde los tejidos periféricos hasta el hígado; único órgano capaz de excretarlo por la vía biliar.
  • 16.
    Colesterol Es unesterol (lípido) que se encuentra en los tejidos corporales y en el plasma sanguíneo de los vertebrados. - No se puede metabolizar por lo que se elimina a través de la bilis - 98% se reabsorbe en íleon terminal - 2% se excreta en las heces
  • 17.
  • 18.
    REACTIVOS •1 muestrade suero (desconocido) • Kit de dosificación (estándar y reactivo de trabajo) MATERIALES • 3 tubos de ensayo • 1 gradilla • 1 pinza de madera • 3 cubetas para espectrofotómetro • 1 pipeta automática de 10 ul • 2 puntas blancas • 1 pipeta de 1 ml • 1 pera de caucho EQUIPOS • Espectrofotóm etro • Termostato
  • 19.
    DOSIFICACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS TRIGLICÉRIDOS LPL GLICEROL AC. GRASOS GLICEROL ATP Glicerol Kinasa ADP GLICEROL 1-P GLICEROL 1-P O2 GPO H2O2 DIHIDROXI ACETONAFOSFATO 2 H2O2 4-AF POD QUINONIMINA ROJA
  • 20.
    PROCEDIMIENTO 1. Colocarlos tubos de ensayo en la gradilla y rotularlos A= Blanco B=Estándar C= Desconocido 2. Tomar 10 ul de estándar y colocar en el tubo B. 3. Cambiar de punta; tomar 10 ul de desconocido y colocar en el tubo C. 4. Colocar 1 ml de reactivo e color en cada tubo (A, B,C)
  • 21.
    5. Incubar enel termostato los tres tubos a 37º C, durante 5 min. 6. Trasvasar el contenido de los tubos en cubetas para espectrofotómetro, y rotularlas. 7. Leer en el espectrofotómetro a 505 nm.
  • 22.
    INTERPRETACIÓN  Paraconocer la concentración de triglicéridos en el suero desconocido, aplicamos una regla de tres: 푋 = 퐴푏푠. 푀푢푒푠푡푟푎 ∗ 퐶표푛푐. 푆푢푠푡푟푎푡표 퐴푏푠. 푆푢푠푡푟푎푡표
  • 23.
     0,310 Absorbancia(Conocido).  0,243 Absorbancia (Desconocido).  200 mg/dl Constante. TENEMOS: 200 mg/dl 0,310 X 0,243 0,243 × 200 푚푔 푑푙 0,310 = 156,77 푚푔/푑푙 CONCENTRACIÓN DEL DESCONOCIDO: 156,77 mg/dl
  • 24.
    VALORES NORMALES •<1,5 g/l • 44 – 158 mg/dl • 0,50-1,67 mmol/l Deseable • 1,55 – 1,99 g/l Moderada mente elevado Elevado • 2,0 – 4,99 g/l Muy elevado • >5,0 g/l
  • 25.
  • 26.
    REACTIVOS •1 muestrade suero (desconocido) • Kit de dosificación (estándar y reactivo de trabajo) MATERIALES • 3 tubos de ensayo • 1 gradilla • 1 pinza de madera • 3 cubetas para espectrofotómetro • 1 pipeta automática de 20 ul • 2 puntas amarillas • 1 pipeta de 2 ml • 1 pera de caucho EQUIPOS • Espectrofotóm etro • Termostato
  • 27.
    DOSIFICACIÓN DE COLESTEROL Esteres de colesterol Lipasa Colesterol AC. GRASOS Colesterol O2 CHOD H2O2 Colesten 3-ona 4-AF Fenol POD Quinona H2O2 Coloreada H2O
  • 28.
    PROCEDIMIENTO 1. Colocarlos tubos de ensayo en la gradilla y rotularlos A= Blanco B=Estándar C= Desconocido 2. Tomar 20 ul de estándar y colocar en el tubo B. 3. Cambiar de punta; tomar 20 ul de desconocido y colocar en el tubo C. 4. Colocar 2 ml de reactivo e color en cada tubo (A, B,C)
  • 29.
    5. Incubar enel termostato los tres tubos a 37º C, durante 15 min. 6. Trasvasar el contenido de los tubos en cubetas para espectrofotómetro, y rotularlas. 7. Leer en el espectrofotómetro a 505 nm.
  • 30.
    INTERPRETACIÓN  Paraconocer la concentración de triglicéridos en el suero desconocido, aplicamos una regla de tres: 푋 = 퐴푏푠. 푀푢푒푠푡푟푎 ∗ 퐶표푛푐. 푆푢푠푡푟푎푡표 퐴푏푠. 푆푢푠푡푟푎푡표
  • 31.
    VALORES NORMALES •<2,0 g/l • 44 – 158 mg/dl • 0,50-1,67 mmol/l Deseable • 2,0 – 2,39 g/l Moderada mente alto Elevado • >2,4 g/l
  • 32.
    DISLIPIDEMIA TIPO ANOMALÍAPERFIL LIPÍDICO Hipercolesterolemia familiar Defecto en la codificación de los receptores para las LDL Hipercolesterolemia o hiperlipemia mixta Hipercolesterolemia familiar combinada Defecto en la secreción hepática de las VLDL Perfil cambiante (hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia y mixto) Disbetalipoproteinemia familiar Alteración de la ApoE que impide la metabolización de VLDL y quilomicrones Hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia Hipercolesterolemia poligénica Interacciones de numerosos genes – ambiente (p.ej: alimentación) Colesterol moderadamente elevado Hipertrigliceridemia familiar Mayor secreción de triglicéridos (más VLDL y de mayor tamaño). Defectos en la LPL Aumento de las VLDL Disminución de las HDL y LDL Sitosterolemia o fitosterolemia Defectos en ABC G5/G8 Aumento de la absorción de sitosteroles y colesterol dietético. Altos niveles de esteroles (de origen vegetal y animal) en el plasma.
  • 33.
    PERFIL LIPÍDICO Colesteroltotal (mg/dL) Deseable < 200 Límite alto 200 – 239 Elevado > 240 LDL (mg/dL) Óptimo < 100 Cercano a lo óptimo 100 – 129 Límite alto 130 – 159 Elevado* 160 – 189 Muy elevado* > 190
  • 34.
    Triglicéridos (mg/dL) Normal < 150 Límite alto 150 – 199 Elevado2 00 – 499 Muy elevado > 500 HDL (mg/dL) Bajo* < 40 Elevado > 60
  • 35.
    ATEROSCLEROSIS Enfermedad dearterias Se da el depósito de placas de ateroma, a nivel de la pared vascular, provocando el estrechamiento u occlusion completa de la luz arterial. Clínicamente puede causar infarto agudo del miocardio, accidente cerebro vascular o enfermedad perférica.
  • 38.