Evaluar el comportamiento de la enzima pectinasa a partir de la fermentación sumergida con Aspergillus sp y Trichoderma sp en dos sustratos diferentes (pectina comercial y pectina natural).

1. Fermentación en estado sumergido para la obtención
de enzimas, utilizando los hongos Trichoderma sp y
Aspergillus sp
Xiomara Cogollo López
Profesional en acuicultura
Darío González R.
Ingeniero Agropecuario
Maestría en Biotecnología
Cohorte 7
Universidad de Córdoba
2014º

2. • Las enzimas tienen numerosas aplicaciones en la industria de alimentos y bebidas.
Se utilizan para transformación y producción de aromas y de productos
intermedios. Se emplean varias enzimas microbianas en la industria de alimentos
tales como: α y ß amilasa, proteasas, Invertasa, pululanasa, glucosa-isomerasa,
dextranasa, lipasa, lactasa, amiloglucosidasa, glucosa-oxidasa, Pectinasa y otras .
• Las enzimas pectolíticas se utilizan en la industria de alimentos para clarificar
néctares y obtener más volumen de producción, aumentando en un 25% por cada
tonelada tratada de materia prima (frutas).
Amiloglucosidasa
Pectinasa α amilasa

3. El hongo Aspergillus pertenece a la clase Deuteromicetos es decir
que carecen de esporas sexuales. Al orden Moniliales lo cual indica
que presentan micelio claro y sin coloración o con un coloreado débil.
El género Aspergillus es abundante. Muchos de ellos son los
responsables de ciertas alteraciones alimenticias y otros útiles en la
preparación de algunos alimentos.

4. Es un hongo que se encuentra de manera natural en un número importante de
suelos agrícolas y otros tipos de medios. Pertenece a la subdivisión
Deuteromicetes, la cual se caracteriza por no presentar un estado sexual
determinado.

5. Antagonista de patógenos vegetales que se encuentra presente en la mayoría de
los suelos. Activa el crecimiento radicular de las plantas, es capaz de colonizar y
crecer en las raíces a medida que éstas se desarrollan y aumenta la resistencia
del cultivo frente al ataque de posibles patógenos

6. Inducción a la producción de enzimas
Solución
de esporas
Medio líquido + pectina
comercial
5 días a
150 rpm
Maceración
Centrifugación
Sobrenadante
Actividad de la poligalacturonasa (DNS)
Pectina comercial
Pectina
nativa
Complejo enzimático +
pectina comercial
0,1ml
Espectrofotometría
540 nm
DN
S
Incubar 1 y 2 horas

7. Figura 1. Curva de absorbancia para fermentación de azucares
reductores
y = 0,5856x - 0,0294
R² = 0,99989
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
CURVA DNS
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4
ABS
concentración

8. Grupo Microorganismo Peso(gr)
1 Biomasa Aspergillus sp 0,17
2 Biomasa Aspergillus sp 0,16
3 Biomasa Trichoderma sp 0,59
4 Biomasa Trichoderma sp 0,72

9. GRUPO 1 ABSORBANCIA
(1 HORA)
ENZIMA (1
HORA)
ABSORBANCI
A (2 HORA)
ENZIMA (2
HORA)
PECTINA NATIVA + COMPL ENZIM
CMCIAL
1,754 3,0454 1,338 2,335
PECTINA CMCIAL + ASPERGILLUS 1,774 3,0796 1,417 2,4699
PECTINA NATIVA + ASPERGILLUS 0,232 0,4464 0,114 0,2449
GRUPO2 PECTINA NATIVA + COMPL ENZIM
CMCIAL
1,537 2,6749 1,465 2,5519
PECTINA CMCIAL + ASPERGILLUS 1,394 2,4307 1,383 2,4119
PECTINA NATIVA + ASPERGILLUS 0,093 0,209 0,113 0,2432
GRUPO3 PECTINA NATIVA + COMPL ENZIM
CMCIAL
0,398 0,539 0,286 0,73
PECTINA CMCIAL + TRICHODERMA 0,105 0,349 0,175 0,23
PECTINA NATIVA + TRICHODERMA 0,058 0,236 0,109 0,15
GRUPO4 PECTINA NATIVA + COMPL ENZIM
CMCIAL
0,233 0,4481* 1,633 0,8154*
PECTINA CMCIAL + TRICHODERMA 0,135 0,2807* 0,753 0,5296*
PECTINA NATIVA + TRICHODERMA 0,351 0,6496* 0,163 1,1595*
Tabla 2. Técnica de DNS

10. 3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
PECTINA COMERCIAL+ HONGO
1 2
Concentración (mg/ml) de azucares reductores
Tiempo (horas)
Aspergillus sp
Aspergillus sp
Trichoderma sp
Trichoderma sp

11. 3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
PECTINA COMERCIAL + COMPLEJO ENZIMATICO
1 2
Concentración (mg/ml) de azucares reductores
TIEMPO (HORAS)

12. 3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
PECTINA NATIVA+ HONGO
1 2
Concentración (mg/ml) de azucares reductores
Tiempo (horas)
Aspergillus sp
Aspergilllus sp
Trichoderma sp
Trichoderma sp

13. La diferencia entre los tratamientos evaluados
con pectina nativa, pectina comercial y enzima
mas la enzima comercial , pudo deberse
principalmente a la actividad metabólica del
hongo y al efecto de la interacción entre los
factores (pH, temperatura, aireación,
contaminación y manipulación)

14. La actividad de la pectina para los
cuatro casos, fue mayor en la
primera hora de evaluación, debido
a la concentración de sustrato que es
superior en comparación a la del
segundo tiempo asumiendo la
actividad enzimática.

15. En la segunda hora donde se evaluó el
Aspergillus sp, la concentración disminuyo
mientras que en el grupo 4 donde se
evaluó Trichoderma sp, la concentración
aumento en la segunda hora, hallándose
diferencias entre microorganismos en el
mismo sustrato.
Aspergillus sp
Trichoderma sp

16. GRACIAS