Guía para la discusión y el análisis de resultados en los reportes de laboratorio de Bioquímica General de los Ingenieros Biotecnólogos plan 2009 ITSON.

1.
Ciudad Obregón, Sonora, México Verano 2015
GUÍA PARA LA DISCUSIÓN Y ANÁLISIS DE RESULTADOS EN LOS
REPORTES DEL LABORATORIO DE BIOQUÍMICA GENERAL
Dra. Ana Karina Blanco Ríos
M. en C. Laura Elisa Gassós Ortega
Academia de Bioquímica
Departamento de Biotecnología y Ciencias Alimentarias

2.
2015, Instituto Tecnológico de Sonora.
5 de Febrero, 818 sur, Colonia Centro,
Ciudad Obregón, Sonora, México; 85000
Web: www.itson.mx
Email: rectoria@itson.mx
Teléfono: (644) 410‐90‐00
Primera edición 2015
Hecho en México
Esta obra está licenciada bajo una Licencia Creative
Commons Atribución‐NoComercial‐SinDerivadas 2.5
México. Para ver una copia de esta licencia, visita
http://creativecommons.org/licenses/by‐nc‐
nd/2.5/mx/ o envía una carta a Creative Commons,
444 Castro Street, Suite 900, Mountain View,
California, 94041, USA.

3.
PRESENTACIÓN
Esta guía está dirigida a los alumnos que cursan el Laboratorio de Bioquímica General con
el manual de prácticas de la edición 2015. Su objetivo es orientar en la redacción del
reporte, en particular en la sección de resultados y discusión, proporcionándoles una serie
de preguntas detonantes por práctica para que logren mejorar su habilidad de
comunicación escrita en la ciencia.
Para aplicar esta guía, es necesario que se lea en el previamente en el manual la práctica a
realizar, que se investiguen los fundamentos teóricos del fenómeno en estudio así como
tener gran claridad en el método que se aplicará para la demostración experimental.
Posterior a la fase práctica se generará el reporte escrito de acuerdo al formato indicado
para ello, y es en la sección de resultados y discusión donde esta guía será aplicada.
Se elaboraron un conjunto de preguntas detonantes por práctica como una manera de
guiar al estudiante hacia lo que debe discutir sobre los resultados obtenidos en sus
experimentos. Solo debe identificar el número de práctica o tema en estudio en esta guía.
Antes de redactar, es importante leer fuentes de información científicas (libros, artículos
de investigación, otros) para obtener ideas y adoptar el lenguaje especializado de la
ciencia bioquímica. También es recomendable discutir estas ideas con sus compañeros de
equipo y si es posible, con un integrante de la Academia de Bioquímica, como una buena
práctica para desarrollar la habilidad de la comunicación y el pensamiento crítico en la
ciencia.
Finalmente, se recomienda acercarse a asesorías con los miembros de la Academia de
Bioquímica para lograr tener una mayor comprensión, práctica del nuevo lenguaje
adoptado y aprendizaje de los fascinantes temas de la bioquímica.

4.
Guía para la discusión y análisis de resultados en los reportes del Laboratorio de
Bioquímica General
Práctica 1. Morfología celular y organelos visibles.
Esta práctica es muy sencilla y no requiere una discusión de resultados de mucha profundidad. Se
solicita dibujar lo observado en el microscopio, registrar las formas celulares, destacar la
presencia de organelos y comparar los resultados obtenidos con imágenes publicadas en literatura
científica sobre la morfología de las células similares.
En caso de no haber podido observar las células realizar una breve discusión de los factores que
pudieron haber interferido en la observación de las mismas: tinción y muestreo.
Responder a las siguientes preguntas ¿Es la tinción adecuada para el tipo celular que se quiso
observar sin éxito? ¿Se tomó la muestra de manera adecuada?
Práctica 2. Extracción de ácido desoxirribonucleico
Comparar el ADN obtenido con fotos de ADN obtenidos a nivel laboratorio (publicados en web).
En base a tal comparación: ¿Se obtuvo ADN en el laboratorio?
Si no se obtuvo ADN, ¿Qué factor pudo haber influido en esa falla? ¿Qué métodos de extracción
están reportados en textos científicos? ¿Hay similitud con el método utilizado en la práctica? Si no
es así, ¿Cuáles son las diferencias detectadas, como resultado de la comparación con otras
técnicas, con el método que aplicaste?
Práctica 3. Pruebas cualitativas e identificación de aminoácidos y proteínas.
Para discutir la práctica deberás identificar las estructuras de cada aminoácido, la composición de
la proteína evaluada y además deberás conocer la composición de la muestra problema que tu
equipo analizó. Con los resultados obtenidos en tu laboratorio (positivo o negativo según sea el
caso) llenarás las siguientes tablas que corresponden a cada una de las pruebas.
Pruebas
Blanco Alanina
Albúmina de
huevo
Proteína de
trigo
Muestra
problema
Ninhidrina
Blanco Tirosina Fenilalanina Albúmina
de huevo
Proteína de
trigo
Muestra
problema
Reacción de
Millon
Reacción
Xantoproteica
Blanco Metionina Cisteína
Albúmina
de huevo
Proteína de
trigo Problema
Reacción con
Acetato de
Plomo Alcalino

5.
Albúmina Tirosina Triptófano Fenilalanina Cisteína Arginina
Agua
peptonada Pepsina Albúmina
Reacción
de
Biuret
Antes de discutir cada prueba deberás incluir una pequeña explicación del fundamento de la
misma. Se discutirán los resultados de cada prueba. En caso de que el aminoácido o proteína
hayan dado positivo, ¿Qué grupos funcionales de la molécula reaccionaron con el reactivo de
prueba? ¿Existen en el aminoácido o proteína grupos que reaccionan con cada uno de los
reactivos de prueba?
Si los resultados fueron negativos ¿Cuál fue la razón? ¿Por qué no hubo reacción entre el
aminoácido o proteína y el reactivo de prueba?
Con respecto a la muestra problema, deberás deducir que tipo de aminoácidos tienes en base a
los resultados de las diferentes pruebas, posteriormente compararás con la composición de
aminoácidos de la muestra que investigaste previamente (si se tratara de una proteína).
¿Concuerdan los resultados de composición obtenidos en las diferentes pruebas y los aminoácidos
que tiene tu muestra problema?
Práctica 4. Desnaturalización y precipitación de proteínas.
A) Precipitación de albúmina de huevo con sulfato de amonio (Salting out).
Según lo observado durante la práctica, ¿Hubo precipitación de proteína? ¿Cómo los
comprobaste?, es decir, ¿De qué manera la prueba de Biuret afirma o descarta la precipitación de
proteína?
B) Precipitación de albúmina por solventes orgánicos (efecto del pH)
Tubo
pH del medio 1 (medio ácido) 2 (medio alcalino) 3 (punto isoeléctrico)
¿En qué tubo y con qué pH observaste mayor precipitación?
¿Cómo puedes relacionar la precipitación con el punto isoeléctrico de la proteína? Busca la
definición de punto isoeléctrico para que puedas relacionar el concepto con la precipitación.
Si el punto isoeléctrico de la caseína es 4.6, ¿Dónde esperarías una mayor precipitación, en medio
ácido o alcalino? Apóyate en la definición de punto isoeléctrico para responder.

6.
C) Precipitación de albúmina con metales pesados.
Sales Observaciones
Cloruro de mercurio
Nitrato de plata
Acetato de plomo
Cloruro de sodio
Cloruro de bario
¿Con qué sal obtuviste mayor precipitación de la proteína? ¿Cómo puedes vincular la precipitación
con la fuerza iónica de cada sal disuelta? Recuerda que en medio alcalino la proteína están
cargadas negativamente comportándose como aniones.
Si a una solución de proteína se le agrega el catión de un metal pesado como Hg, Pb, Cu o Zn, estos
iones positivos se unirán por atracción electrostática a las cargas negativas de las proteínas
produciendo un precipitado en forma de sal (ver manual de laboratorio). ¿Se disociarán con mayor
eficacia algunas de las sales probadas en comparación al resto de las evaluadas?
D) Cálculo y análisis de la eficiencia en la recuperación de la caseína de la leche
Toma en cuenta las indicaciones del manual para tu discusión. ¿Cuántos gramos de caseína
recuperaste? ¿Cuál sería la eficiencia de recuperación de caseína obtenida por tu equipo de
trabajo? Considera un valor teórico de 3.5 g de proteína por 100 g de leche.
Compara tu porcentaje de recuperación con el obtenido por otros autores, ya sea con una técnica
similar o técnicas diferentes. Si tu porcentaje es menor que los reportados bibliográficamente
indica cuáles podrían ser las causas de esa baja recuperación.
Práctica 5. Identificación de hidratos de carbono
Tabla 1. Resultados de la prueba de Molisch.
Muestra Resultado Observaciones

7.
Tabla 2. Resultados de la prueba de Fehling.
Muestra Resultado Observaciones
Tabla 3. Resultados de la prueba de Yodo.
Muestra Resultado Observaciones
Deberás completar cada una de las tablas con los resultados obtenidos en tu práctica y
posteriormente explicar, de acuerdo a las indicaciones del manual, el fundamento de cada técnica
y porqué algunas muestras son positivas y otras negativas. Identifica si las pruebas son específicas
para ciertos tipos de azúcares (en cuanto a polimerización: monosacáridos, polisacáridos o si bien
son específicas para azúcares reductores) y discute los resultados obtenidos.
Práctica 6. Hidrólisis ácida y enzimática de polisacáridos
Hidrólisis enzimática Hidrólisis ácida
Tubo Reacción de Benedict
Prueba de
lugol
Tubo
Reacción de
Benedict
Prueba de lugol
1 5
2 6
3 7
4 8
Hidrólisis enzimática (tubos 1‐4)
¿Qué tubos fueron dieron positivo a la prueba de lugol? ¿Cuál es el fundamento de dicha prueba?
¿Fue positiva la prueba en los tubos 3 y 4?
Si no fue así ¿Cuál es la razón?
¿Fue positiva la prueba de lugol en los tubos 3 y 4?
Si fue así ¿Qué reacción se llevó a cabo en la mezcla almidón‐agua‐enzima?

8.
Si no fue así ¿Qué ocurrió en la mezcla de reacción?
¿Dio positiva la reacción de Benedict después de cada hidrólisis? ¿Qué significa eso? Básate en el
fundamento de la reacción de Benedict.
Hidrólisis enzimática (tubos 1‐4)
Responde las mismas preguntas para los tubos 5, 6, 7 y 8
Hidrólisis enzimática (espectrofotómetro)
Es importante saber lo que estás leyendo a 540 nm (longitud de onda utilizada en la práctica, ver
introducción de tu manual).
¿Cómo se comportó la absorbancia con respecto al tiempo? Aumentó o disminuyó? Después de
conocer lo que estás leyendo a 540 nm ¿Hubo hidrólisis? De no ser así ¿Cuál es la explicación?
Práctica 7. Fermentación alcohólica de diferentes sustratos
Considerar los resultados de los demás equipos. ¿Cuál sustrato formó gas primero en menos
tiempo? Si no hubo diferencia entre ellos, ¿Cómo puedes explicarlo considerando el tipo de azúcar
y el fundamento de la fermentación alcohólica?
Si hubo diferencias ¿Cómo puedes justificarlas? Recurre a las estructuras de los azúcares y
fundamento de la fermentación.
¿Dio positiva la prueba de etanol? Explica cualquier resultado obtenido (positivo o negativo). ¿Qué
significa un resultado positivo?
Práctica 8. Cuantificación de pigmentos fotosintéticos.
Según las instrucciones de tu manual, realiza el cálculo de la concentración de cada tipo de
clorofila. Revisa información bibliográfica, ¿Concuerdan tus resultados con lo reportado en otras
determinaciones? De no ser así, ¿Qué diferencias encuentras en el método que tú realizaste con
respecto a los métodos utilizados en la información que encontraste?
¿Son lógicos los valores que tú obtuviste? Revisa bien tus ecuaciones.
¿Qué tipo de clorofila se encuentra en mayor cantidad en las plantas, la “a” o la “b”? De acuerdo a
lo investigado, ¿Hay concordancia con las concentraciones que tu obtuviste?
Práctica 9. Catálisis enzimática.
¿Cuánto tiempo tardó tu muestra en desprender burbujas? ¿Qué gas forma las burbujas? ¿Qué
indica su presencia? Recurre al fundamento de la prueba y de la actividad de la enzima.
¿En qué tipos de sustratos actúa la enzima evaluada? ¿Esperas la presencia de la enzima en el
hígado? ¿De qué enzima estamos hablando?

9.
Práctica 10. Pruebas cualitativas para lípidos.
Solubilidad: ¿En qué solvente hubo mayor solubilidad (no se visualizaron dos fases)? ¿En qué
solventes no fue soluble la muestra? ¿Cuál es la explicación para ambos comportamientos?, es
decir, ¿En qué tipo de solventes son solubles los lípidos? ¿A qué se debe la solubilidad de los
lípidos en algunos solventes? ¿Qué tipo de interacciones ocurren cuando la solubilidad es buena?
Formación de emulsiones: ¿Qué es una emulsión? ¿En qué tubo se formó una emulsión? ¿Qué
papel juega la lecitina? De acuerdo a tu respuesta, ¿Obtuviste los resultados que teóricamente
esperabas tener?
Saponificación: ¿Se llevó a cabo la reacción de saponificación en tus muestras? De ser así, ¿Cómo
lo sabes?
Práctica 12. Determinación de la constante de Michaelis‐Menten.
¿Cuál fue tu Km calculada? ¿Qué significa ese valor? Si no pudiste calcular la Km, ¿Cual crees que
fue la razón? Busca alguna metodología práctica para determinar la constante de Michaelis‐
Menten (prácticas de otros laboratorios en la red) y compara con la metodología que tú realizaste,
indica las diferencias y discute los factores que pudieron haber influido en tus resultados.