Este documento proporciona información sobre hemocultivos, incluyendo su objetivo de diagnosticar infecciones del torrente sanguíneo, cómo se toman las muestras, los métodos de detección manuales y automatizados, y cómo se procesan y analizan los resultados. Explica que los hemocultivos son importantes para diagnosticar bacteriemias y fungemias y que se deben tomar muestras de dos sitios diferentes siguiendo la técnica adecuada.

1. Hemocultivo
INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
QUÍMICO BACTERIÓLOGO PARASITÓLOGO
Sección: 1
Equipo: 3
7QV1

2. Objetivo
• Capacitación del alumno para
realizar el diagnóstico
microbiológico de las enfermedades
del torrente sanguíneo.

3. Características
físicas
• Densidad: 1.050 g/ml. depende de la
cantidad de células sanguíneas que se
encuentran diluidas en la solución del
plasma sanguíneo.
• Temperatura ronda los 37°C, en
condiciones normales.
• 8% del Peso Corporal.
• pH entre 7.35 a 7.45.
• Volumen en hombres: 5 a 6 litros.
• Volumen en mujeres: 4 a 5 litros

4. Plasma: 55%
• Transporte de moléculas
• Balance osmótico
• Fibrinógeno: formación de los coágulos.
Capa leucocítica: <1%
• Plaquetas: formación de coágulos y
reparación celular.
• Leucocitos: PMN, monocitos y linfocitos.
Hematíes: 45%
• Glóbulos rojos.
Composición y
función

5. Infecciones del torrente sanguíneo (ITS o BSI
en inglés)
Son una de las complicaciones más graves durante la atención de los
pacientes.
La presencia de bacterias viables en la sangre representa un riesgo
potencial para el paciente.
Se asocian al progreso de las infecciones no tratadas o parcialmente
tratadas y a la complejidad cada vez mayor del estado clínico de los
pacientes.

6. Infecciones del torrente sanguíneo (ITS)
• Bacteriemia: presencia de bacterias en la sangre
• Fungemia: presencia de hongos en la sangre.
• Septicemia: Presencia de bacteriemia + signos y síntomas causados por la invasión
bacteriana de tejidos y manifestaciones de toxemia y choque.
• sepsis: Infección con respuesta inflamatoria sistémica.
• Sepsis grave: Sepsis con mala función de órganos , hipoperfusión e hipotensión.
• Choque séptico: Sepsis con hipotensión que no responde a adecuado manejo de
líquidos.

7. Clasificación de las Bacteriemias
Se puede clasificar acorde al lugar de adquisición :
• Comunitaria: cuando la infección ocurre en un
paciente antes del ingreso en el hospital
• Nosocomial: por maniobras dentro del hospital
• Por su origen :
• Primaria: cuanto la bacteria está presente dentro de
una fuente endo o intravascular (catéter)
• Secundaria: cuando la bacteria es de origen
extravascular (derivado de una neumonía)

8. Tipos de bacteremias

9. Condiciones
predisponentes para ITS
• Cirugías
• Traumatismos
• Inmunodeprimidos
(VIH/ONCOLOGICOS/IR /
ESTEROIDES)
• Mayor riesgo son los Hospitalizados
y que se han sometido a
procedimientos invasivos.

10. Signos y Síntomas de septicemia

11. Diagnostico
-Diagnóstico clínico y bioquímica.
Bioquímico:
-Bhc, Química sanguinea, Reactantes de fase aguda, etc
Diagnostico microbiologico
.-Hemocultivos
.-Urocultivo
.-Otros cultivos

12. Hemocultivos
Se deben de obtener hemocultivos en pacientes con sospecha de sepsis
idealmente antes del inicio del tratamiento antimicrobiano.
-El aislamiento de microorganismos en las sepsis es alrededor del 10-20%.
-Se requieren de por lo menos de dos hemocultivos de dos sitios anatómicos
diferentes con la técnica adecuada.

13. Indicaciones clínicas básicas para practicar
hemocultivo
• Septicemia a partir de un foco infeccioso.
• Infección crónica diseminada (Gonococica o meningococica).
• Diseminación de infecciones graves
• Infeccion intravascular localizada
• Infecciones sistémicas (Brucelosis, leptospirosis, fiebre tifoidea etc)
• Infecciones iatrogénicas(Cateteres, infusiones contaminadas)
• sepsis neonatal o inmunocomprometidos.

14. Etiologia de ITS
Depende de innumerables factores, como la edad, el tipo de
hospital, los servicio que ofrece el hospital, en inclusive las
prácticas de toma de hemocultivo.
• S.epidermidis
• S.aureus
• S.haemolyticus
• S. hominis
• K.pneumoniae
• E.coli
• A.baumannii
● Reporte de RHOVE 2014:
S.epidermidis, K.pneumoniae ,
E.coli (36%)

15. -En una infeccion de torrente sanguineo los microorganismos están viables, la
densidad bacteriana puede ser menor de 10 UFC/ml en adultos y de 100
UFC/ml en niños. Lo anterior nos sugiere que los hemocultivos tienen una
excelente sensibilidad para detectar bajas cantidades de microorganismos. sin
embargo las cargas del microorganismo son variables en el curso de la
enfermedad.

16. Los hemocultivos se clasifican según:
-El tipo de paciente.
-La toma de muestra (Periferico o central)
-El tipo de microorganismo (aerobicas, anaerobicas, fastidiosos, micobacterias
u hongos.
-La metodología empleada en convencionales (manuales), o los que emplean
sistemas automatizados como el sistema de lisis-centrifugación o en sistemas
automatizados como BACTEC, BacT/Alert, Septi Chek, entre otros.

17. Métodos automatizados
-Los métodos automatizados o de monitoreo continuo se basa en la detección
de metabolitos bacterianos como el CO2; el cual es captado por técnicas
radiométricas, espectrofotométricas, fluorimétricas y/o colorimétricas. (Según
el equipo).
La ventaja de estos métodos consiste , en que el sistema asociado a un equipo
de cómputo, en donde un programa o software analiza algoritmos que
relacionan con la presencia de Co2 con los índices de crecimiento bacteriano,
y da aviso cuando la detección sobrepasa el punto de corte.

18. Fundamento de equipos automatizados
Los frascos contienen el medio de caldo enriquecido de digerido de soya -
caseína con CO2, además de una resina que permite neutralizar la carga de
antimicrobianos que pudiera tener el paciente al momento de tomar la muestra.
Las botellas con la muestra deben ser rápidamente introducidas en el equipo, el
cual efectúa lecturas cada 10 minutos de la concentración de CO2 a partir de
una línea basal. En las muestras positivas el incremento en el CO2 se detecta al
activarse una alarma visual y sonora, de igual forma las muestras que no tengan
incrementos de CO2 al cabo de 5 días serán detectadas por alarmas, pero es
necesario confirmar las muestras tanto positivas como negativas por medio de
frotis, teñido al Gram y por subcultivo en agar sangre y agar chocolate.

20. Método de lisis celular (Fundamento)
El método de lisis-centrífuga es la base del sistema Isolator (DuPont). Consiste
en un tubo que contiene saponina como agente lisante, polipropilenglicol
como agente antiespumante, SPS y EDTA como anticoagulantes y un líquido
fluoroquímico inerte. Tras la inoculación de la sangre, ésta se mezcla con el
contenido del tubo para conseguir la lisis de las células. A continuación, para
separar los microorganismos y los elementos sanguíneos, se centrifuga el tubo a
3.000xg durante 30 minutos. Después se desecha el sobrenadante y se siembra
el sedimento en distintos medios de cultivo.

21. Toma de muestra
1.-Toma de muestra periférica con técnica cerrada.
2.-Toma de muestra a través de un acceso vascular (Está indicada cuando se
sospecha bacteriemia relacionada con tratamiento intravascular o cuando no es
posible realizar la toma por punción)

22. • Uso de guantes
• Desinfección con Etanol o alcohol
isopropílico (70 – 95%) y yodo o
clorhexidina (2%)
• Aplicación en círculos concéntricos,
po 30s
• Anticoagulante: polianetol sulfonato
de sodio (0.025 – 0.05%) inactiva
animoglucosidos y poder bactericida
del suero, y se agregar gelatina (1 –
2%) para evitar inhibir
Peptostreptococcus, neisserias y H.
influenzae
• Si hay tratamiento con penicilinas
agregar penicilinasas y sacarosa (10 –
15%) como estabilizador osmótico
Toma de muestra

23. • La sangre se inocula directamente en las botellas correspondientes. (medios líquidos o
bifásicos
• Medio bifasico: Ruiz-Castañeda.
• Vol. directamente proporcional a la sensibilidad, 20, 40, 60 mL da una sensibilidad de:
65-76%, 80-89% y 96-98% respectivamente.
• Se recomienda inocular 2 botellas para anaerobios, 2 para aerobios y en caso de
pacientes con tratamiento una botella con resina que absorba antibióticos
• Si el volumen es insuficiente se inocula preferentemente la botella de aerobios
• Para adultos se inoculan entre 10 y 15mL de sangre, para niños 2 – 6mL
• Cada frasco indica el volumen recomendado

24. Transporte y recomendaciones
Las muestras se deben transportar inmediatamente al laboratorio a
temperatura ambiente. Se recomienda no exceder 2 horas antes de
ser llevadas al laboratorio
En pacientes hospitalizados la muestra se debe tomar
inmediatamente después de la aparición de fiebre

25. Subcultivos

26. Casos particulares
Dependiendo del cuadro clínico, se pueden emplear medios
especiales para Bordetella, Brucella, Leptospira, Mycobacterium,
Francisella y Streptobacillus
Coxiella burnetii, Chlamydophila sp., Rickettsia y Tropheryma whippelii
deben buscarse con pruebas serológicas o de amplificación de ácidos
nucleicos porque no crecen en medios de cultivo convencionales

27. Reporte
Algunas infecciones requieren de notificación epidemiológica semanal, mensual
o inmediata para que un laboratorio de referencia pueda hacer la
serotipificación de Salmonella, Neisseria meningitidis, H. influenzae, Leptospira y
Brucella, por ejemplo.
• NOM – 017 – SSA2 – 2012, Para la vigilancia epidemiológica
• NOM – 026 – SSA2 – 1998, Para la vigilancia epidemiológica, prevención y control de
infecciones nosocomiales

28. Observar desarrollo bacteriano (hemólisis, turbidez, gas,
coágulo, velo, microcolonias)
Hacer frotis, fijar con metanol, teñir por Gram
Inocular los medios de cultivo aunque no se observe
desarrollo macro o microscópico (subcultivo ciego)
Observar morfología colonial y hacer tinción de Gram
Realizar pruebas bioquímicas y susceptibilidad a
antimicrobianos
Desarrollo
*Frasco de hemocultivo
positivo
Medios de cultivo:
• Gelosa chocolate
• GS al 5%
• MacConkey
• Gelosa sal y manitol
• GS hemina menadiona.

29. • GSHM
• Anaerobiosis, 37°C/48h
Anaerobios obligados
• Gelosa chocolate con polienriquecimiento
• CO2, 37°C/48h
Capnofílicos
• GS 5%
• CO2, 37°C/24h
Anaerobios
facultativos
• MacConkey
• 37°C/24h
BGN

30. Referencias
Beavis KG, Charnot-Katsikas A. Specimen collection and handling for diagnosis of infectious diseases. In: McPherson
RA, Pincus MR, eds. Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 23rd ed. St Louis, MO:
Elsevier; 2017:chap 64.
Munford RS, Suffredini AF. Sepsis, severe sepis, and septic shock. In: Bennett JE, Dolin R, Blaser MJ, eds. Mandell,
Douglas, and Bennett's Principles and Practice of Infectious Diseases, Updated Edition. 8th ed. Philadelphia, PA:
Elsevier Saunders; 2015:chap 75.
Murray PR. The clinician and the microbiology laboratory. In: Bennett JE, Dolin R, Blaser MJ, eds. Mandell, Douglas,
and Bennett's Principles and Practice of Infectious Diseases, Updated Edition. 8th ed. Philadelphia, PA: Elsevier
Saunders; 2015:chap 16.